阳离子膜融合脂质体包裹DNA体外转染和稳定性研究

目的 研究阳离子膜融合脂质体包裹DNA的体外稳定性以及体外细胞转染。方法 采用表达E .coilβ 半乳糖苷酶的pSV4 0 β报告基因质粒及组化染色评价阳离子膜融合脂质体的转染效率。用DNase 1考察阳离子膜融合脂质体的体外稳定性。结果 当阳离子膜融合脂质体 (CFL)及阳离子脂质体 (CL)与DNA电荷比为 (2∶1)时 ,CFL的转染效率为 (4 2 .3±4 .3) % ,明显高于CL的转染效率 (2 3.9± 2 .1) % ,且有很较高的稳定性。结论 CFL可作为载体有待进一步研究。

脱水再加水法包裹DNA——影响包裹率因素的研究

脂质体(liposome)做为一种新的基因工程载体,近年来受到了广泛的重视。本文尝试用脱水再加水法制备脂质体来包裹质粒DNA,摸索包裹的合适条件。 脱水再加水法按文献[1];

包裹质粒DNA及线状DNA脂质体的制备

本实验制备组成分别为DOPE/Chol/OA(4:4:3)的酸敏脂质体及DOPC/Chol/OA(4:4:3)脂质体,用于包裹质粒pSV_2-neo、pUC18-ras、pSV-neo-ras及大分子线状DNA,包裹率可达50％.被脂质体包裹的DNA不被DNase降解,提示DNA分子被脂质体包裹在微球体内部.电泳检测表明,被包裹的DNA分子没有断裂.所得到的脂质体较稳定,4℃放置5～6月,脂质体内仍保留部分DNA分子.制备酸敏脂质体时,pH为8.0时脂质体较稳定,pH<6.5～7时则不稳定.