7个匍匐翦股颖抗褐斑病的初步比较及生理响应

为筛选抗病匍匐翦股颖材料,本实验对立枯丝核菌接菌侵染后的7个匍匐翦股颖材料的生理指标进行测定,通过主成分分析对其抗病性进行综合比较。结果表明,受到病原菌入侵后,植物叶片的叶绿素、可溶性蛋白(SP)、过氧化氢(H_(2)O_(2))含量下降;丙二醛(MDA)、可溶性糖(SS)、游离脯氨酸(Pro)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(APX)含量上升。将这10个生理指标转化为4个主成分因子,计算出得分D值,评分最高的为‘光芒’。通过主成分分析法综合各项生理指标表明:7个品种匍匐翦股颖的抗病性排序为光芒>A-1>007>A4>朝阳>宣言>佳美,为后续匍匐翦股颖抗病机制的研究以及抗病新品种的培育奠定基础。

EDTA对重金属胁迫下匍匐翦股颖种子萌发的影响

【目的】研究外源EDTA对重金属胁迫下匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)种子萌发的影响。【方法】以匍匐翦股颖品种潘威为试验材料,对不同浓度Cu、Cd、Pb胁迫下的匍匐剪股颖进行EDTA处理,并测定匍匐翦股颖种子发芽率、发芽势、发芽指数、幼苗叶片及根系相关指标。【结果】匍匐翦股颖对Pb的耐受能力最强,Cu次之,Cd最差。施加3 mmol/L EDTA对中、重度重金属胁迫下匍匐翦股颖的发芽指标、叶片指标和根系指标均较优,其中,中度Cu、轻度Cd、中度Pb胁迫下施用3 mmol/L EDTA的匍匐翦股颖种子的发芽率分别较对照增加了16.67%、3.36%、8.72%,叶片长度分别增加了30.99%、30.60%、1.63%,根系长度分别增加了35.93%、0.37%、29.80%。【结论】通过隶属函数法对各处理进行综合排序,发现施用3 mmol/L EDTA匍匐翦股颖对重金属胁迫的缓解效果最优,对3种重金属的缓解效果排序为Pb>Cu>Cd。

不同修剪处理对匍匐翦股颖币斑病的影响

【目的】研究不同修剪处理对匍匐翦股颖币斑病发病的影响,为草坪管理提供理论参考。【方法】分别将3种不同修剪频率1天1次(F1)、2天1次(F2)、4天1次(F3)和3种不同修剪高度1.0 cm(H1)、1.5 cm(H2)、2.0 cm(H3)组合作为处理,通过病原菌侵染试验测定不同修剪组合下病斑直径大小以及匍匐剪股颖的生理响应。【结果】随着修剪频率和修剪高度的提高,呈现出病斑直径、MDA含量逐渐变小,相关抗氧化酶活性、可溶性蛋白含量逐渐升高的趋势,F1H3组具有最好的病情控制效果(病斑直径为0.43 cm)和最高的抗氧化酶活性,F3H1组病情最重(病斑直径为2.5 cm),相关抗氧化酶活性、可溶性蛋白含量也最低。【结论】草坪在湿度较高的时期适当提高修剪频率和修剪高度可以在一定程度上减轻币斑病的病症。

转基因匍匐翦股颖ASR368品系特异性实时荧光PCR检测方法的建立

针对未获我国农业部批准的转基因匍匐翦股颖ASR368,建立特异性实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。通过分析ASR368特异性边界序列,建立ASR368品系特异性检测方法,并测定本方法的灵敏度、特异性及可重复性。结果显示,建立的检测方法特异于ASR368成分的检测,灵敏度测试表明其定量下限为20拷贝;重复性试验显示其相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于25%。因此,建立的转基因匍匐翦股颖ASR368品系特异性实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和高灵敏度,适合对匍匐翦股颖ASR368品系进行鉴别检测。

匍匐翦股颖品种(系)的坪用性状与耐热性评价

[目的]本研究旨在探究不同匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)品种(系)的田间坪用性状、适应性和耐热性差异,从而筛选出具有推广利用潜力的抗逆种质资源。[方法]以国外引进的14个匍匐翦股颖品种(系)为试验材料,在南京地区越夏前、后开展田间坪用性状(密度、均一性、色泽、质地)和适应性(耐旱性、耐热性)评价,同时在室内常温条件(25℃/20℃,昼/夜)和高温胁迫(38℃/28℃,昼/夜)下测定草坪质量耐热指数、生长速率、叶长和叶宽,进一步评价其耐热性。[结果]在越夏后,不同品种(系)的坪用性状和适应性均明显降低,但是T-1、Alpha和Barracuda(MVS-AP-101)的草坪密度、均一性、色泽、质地和适应性表现相对较好,草坪综合质量评分均为中等(4~5分)。在盆栽试验中,高温胁迫导致各品种(系)的草坪质量耐热指数下降至0.76~0.91。基于草坪质量耐热指数进行系统聚类分析,可将14个匍匐翦股颖品种(系)聚成3类,分别为5个耐热型、6个中间型和3个热敏感型。T-1、Luminary、Barracuda(MVS-AP-101)、Pure Distinction(PST-OJO)和007属于耐热型品种(系),其中T-1的生长速率较快。[结论]T-1和Barracuda(MVS-AP-101)的综合表现突出,越夏能力相对较强,适合在南京地区推广利用。

盐胁迫下匍匐翦股颖抗氧化酶活性及基因表达机制研究

为研究匍匐翦股颖在盐胁迫下抗氧化酶活性与基因表达的影响机制,模拟盐胁迫条件,用0mol/L(CK),0.2mol/L的NaCl溶液对两种不同耐盐性的匍匐翦股颖Penncross和SeasideⅡ进行处理,测定了超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化物酶(POD)活性;用同源克隆的方法克隆了匍匐翦股颖CytSOD,FeSOD,CAT,APX,POD的部分片段,并设计了5个基因的qRT-PC引物,对5个抗氧化酶基因表达量进行了荧光实时定量测定,分析了两种不同耐盐性的匍匐翦股颖在盐胁迫条件下,抗氧化酶活性与基因表达的变化规律。结果表明,盐胁迫对两种不同耐盐性的匍匐翦股颖抗氧化酶活性和基因表达的影响不同,在盐胁迫初期,盐敏感的Penncross SOD活性比耐盐的SeasideⅡ高,盐处理中、后期Penncross SOD活性快速下降,SeasideⅡSOD活性下降慢而且能保持相对稳定,在这一阶段SeasideⅡSOD活性显著高于Penncross;CAT,APX和POD活性随着盐处理的延长,酶活性增加,Penncross CAT和APX活性低于SeasideⅡ,POD活性两者差异不大。盐胁迫下,Penncross CytCu/ZnSOD,CAT、APX和POD表达量上调,而FeSOD下调;SeasideⅡ5种抗氧化酶基因表达量上调,CytCu/ZnSOD,FeSOD,CAT和APX的表达量显著高于Penncross,而POD表达量差异不大。两种匍匐翦股颖CytCu/ZnSOD、CAT、APX和POD表达量变化与酶的活性变化较一致,而盐敏感的FeSOD的表达量变化与SOD活性变化不一致。

污泥蚓粪对匍匐翦股颖草生长的影响

在塑料大棚内采用盆栽试验方法研究污泥蚓粪作为草坪坪床基质改良剂对基质理化性状和草生长的影响,并与泥炭进行了对比,以确定污泥蚓粪作为坪床基质改良剂的可行性,为开拓生活污泥资源化利用途径提供理论基础。结果表明:污泥蚓粪的加入增加了基质的养分供应,可促进草的生长,缩短草坪成坪时间。20g·kg-1和40g·kg-1蚓粪处理的草屑量分别是40g·kg-1泥炭处理的2.4倍和3.3倍。20～80g·kg-1蚓粪处理草的再生速度和叶绿素含量均大于40g·kg-1泥炭处理。但高含量的污泥蚓粪会抑制草坪草的生长,使草坪成坪时间延长,且成坪后盖度较差,质地较粗。实际建设中20～60g·kg-1的污泥蚓粪用量较为合适。污泥蚓粪具备取代泥炭成为坪床基质改良剂的潜能,可成为生活污泥农业工程利用的有效途径。

高温胁迫下粤选1号匍匐翦股颖新品系的生理效应研究

对匍匐翦股颖(Agrostisstolonifera)品种Penncross及其所选育出的粤选1号新品系在高温胁迫条件下的一些生理效应进行研究,结果表明,在高温胁迫下,匍匐翦股颖原品种叶片中的丙二醛(MDA)含量随高温胁迫时间延长而持续增加,新品系MDA的含量在胁迫初期增加,随后呈下降至缓慢上升趋势。新品系叶片中游离脯氨酸的含量在高温胁迫下显著增加,而原品种的在高温胁迫第3天才开始显著增加。高温胁迫下,新品系游离脯氨酸含量明显高于原品种。新品系SOD,POD和CAT活性在胁迫第1天便显著增加,而原品种的保护酶活性到胁迫第4天才显著增加。此外,新品系叶片中SOD,POD和CAT活性远高于原品种,这可能与新品系具有较强的应急机制有关。

高温对匍匐翦股颖果岭草坪草生理特性及再生性的影响

测定粤选1号匍匐翦股颖(AgrostisstoloniferaL.cv.YuexuanNo.1)和匍匐翦股颖品种Pen-ncross2年生果岭草坪草在38℃高温胁迫下叶片的一些生理指标和匍匐茎再生性。结果表明,高温胁迫下叶绿素和抗坏血酸含量下降,粤选1号叶绿素含量降幅低,抗坏血酸含量明显高于Penncross;丙二醛和脯氨酸含量增加,粤选1号丙二醛含量明显低于Penncross,而脯氨酸含量显著高于Pen-ncross。高温胁迫下粤选1号匍匐翦股颖保护酶(POD、SOD和CAT)活性明显高于Penncross。高温胁迫1-6d粤选1号匍匐翦股颖匍匐茎再生能力明显高于Penncross。

优良草坪草匍匐翦股颖研究进展

匍匐翦股颖是一种优良的冷季型草坪草,常用于建植高质量草坪。通过综合国内外大量研究成果,系统阐述了匍匐翦股颖在引种与品种选育,建坪方法、草坪养护与管理,抗逆性(耐热性、抗病性、抗虫性、其他抗性)及分子生物学等方面的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望。

Pb对匍匐翦股颖根系超氧化物歧化酶活性的影响

通过Pb离子浓度胁迫与处理时间两因素试验方案,利用甲基氮蓝四唑(NBT)光密度测定法测定了匍匐翦股颖(Agrotistolonifera)根系细胞内超氧化物歧化酶(SODs)活性,并用统计分析软件SPSS13.0中的GenearLinearModel模块,对试验数据进行了F测验,用LSD法对各水平间进行多重比较检验。结果表明,重金属Pb各处理浓度对SODs的影响均达到极显著水平,处理后SODs水平显著上升,到第4d时达到最高值,处理第3d与第4d之间未达显著水平,第1、2d与第3、4、5d之间达到极显著水平发现低浓度(<2.5mmol·L-1)Pb处理可促使根系细胞积极的防御策略,使细胞SODs水平持续增加;高浓度(>10.0mmol·L-1)处理使SODs活性在早期上升,第4d后SODs开始下降,其主要原因是Pb离子胁迫产生的超量自由基导致酶失活效应所致。

粤选1号匍匐翦股颖新品系选育

对粤选1号匍匐翦股颖新品系在形态特性、坪用性状及耐热性等方面进行了研究。结果表明,与原品种Penncross相比,新品系植株叶片短、窄,叶鞘短,叶舌小,叶舌形态明显不同于原品种,匍匐茎和直立茎节间短、茎细;新品系植株的匍匐茎生长速度较慢,但具有非常强的分蘖能力,能形成非常致密的草坪;新品系的质地、颜色、盖度、均匀性、地上生物量以及综合喜好等坪用性状指标均优于原品种。此外,从生理抗性来看,在干热胁迫下(除轻干热胁迫38℃、相对湿度65%下处理4h外)新品系叶片的质膜相对透性小,而湿热胁迫下叶片失水较快,新品系具有更强的适应高温高湿的能力,是一种具有广阔应用前景的高尔夫果岭草坪草。

盐胁迫下匍匐翦股颖高光谱分析与电解质渗透率反演

叶片电解质渗透率是反映植物细胞渗透性的一个重要指标,对草坪草遭受盐胁迫的研究有重要意义。针对叶片电解质渗透率传统检测方法,耗时长,损伤叶片,无法大面积监测等弊端,探讨了用高光谱快速无损检测叶片电解质渗透率的方法。以匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)为对象,在温室中水培两周后进行浓度分别为0(对照),100和200mmol·L-1的盐处理,7d后按间隔7d取样3次,共72个样。每次取样时先测量样品的光谱值,然后采用电导率法测定叶片电解质渗透率。分析匍匐翦股颖三种盐处理与光谱反射率之间的关系和差异,对三种盐处理的光谱反射率计算归一化植被指数和差值植被指数,采用差分法计算光谱反射率的一阶微分,同时计算出蓝、绿和红光的三边参数,分析叶片电解质渗透率与光谱反射率、归一化植被指数、差值植被指数和三边参数的相关性。利用叶片电解质渗透率和各光谱数据相关程度高的数据,对校正集采用一元线性回归、多元线性回归和偏最小二乘回归法构建叶片电解质渗透率反演模型,用预测集检验反演模型。结果表明:盐胁迫与叶片高光谱在450~700nm波段呈正相关;叶片电解质渗透率与450~732nm波段反射率在0.01水平上显著相关;三边参数中绿边幅值和绿边面积与叶片电解质渗透率显著相关;采用偏最小二乘回归法建立的反演模型精度最好,建模和反演预测的决定系数分别达到了0.681和0.758,均方根误差分别为7.124和7.079。偏最小二乘法构建的反演模型实现了盐胁迫下匍匐翦股颖叶片电解质渗透率的快速无损检测,也为采用高光谱实时监测盐胁迫对匍匐翦股颖及其同类植物的伤害提供了依据和理论参考。

几种匍匐翦股颖品种植株再生的研究

以匍匐翦股颖Agrostisstoloni fera潘娜1号、海滨和普特的成熟种子为外植体,进行愈伤组织诱导、分化及生根研究。结果表明:在MS培养基上,以不同浓度2,4-D诱导潘娜1号、海滨和普特的愈伤组织时,普特的愈伤组织诱导率均高于潘娜1号和海滨。2mg/L2,4-D+0.1mg/L6-BA为潘娜1号和海滨诱导愈伤组织的最适激素组合,3mg/L2,4-D+0.1mg/L6-BA为普特愈伤组织诱导的最适激素组合。诱导率分别为45.2%、76.5%和87.0%;MSO(MS培养基的大量、微量元素和铁盐+B5培养基的有机元素)为最适合的分化培养基,分化率分别为50.0%、59.0%和57.6%。1/2MS+1.0mg/LIBA为生根培养基。

农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究

以匍匐翦股颖Penn A-1成熟胚为供试材料,建立了其植株高效再生体系。利用农杆菌介导法将溶菌酶与绿色荧光蛋白Lyz-GFP双元基因转入匍匐翦股颖Penn A-1胚性愈伤组织中,经培养获得抗病转基因植株。并对Lyz-GFP双元基因转化Penn A-1的适宜条件进行了研究。研究结果表明,在2.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA的MS培养基上Penn A-1愈伤组织诱导率最高,可达36%,且质量最好。愈伤组织在MSO+0.5mg/L NAA上分化率最高,达42.5%;浓度为300mg/L的头孢霉素(Cef)可抑制农杆菌LBA4404的生长;Penn A-1胚性愈伤组织经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(OD600值0.3～0.5)侵染10～15min,共培养3d后,转化愈伤组织生长状况良好,转化率达12.5%,且在后期的生长和转化苗的再生中有良好的表现,转化苗再生率为27.5%;转化植株有较强的荧光表达量,并经PCR检测,获得的2株匍匐翦股颖Penn A-1转化植株中均扩增出750bp的目标基因片断。

农杆菌介导的匍匐翦股颖胚性愈伤组织的转化和转CBF1基因植株的获得

以匍匐翦股颖成熟胚诱导的胚性愈伤组织为受体,利用农杆菌介导的遗传转化方法就不同的菌液浓度、共培养条件和真空处理等对愈伤组织的转化效率进行研究.结果表明,适宜的农杆菌侵染浓度光密度OD600nm为0.8～1.2,真空处理加全光照的共培养条件有助于提高转化效率;CBF1基因是来源于拟南芥的与抗逆相关的转录因子基因,在匍匐翦股颖中实现了其转化,通过PCR检测,50株转基因植株中32株扩增出640bp的目标片断,部分转基因植株生长缓慢,表现出矮化性状.非胁迫条件下,转基因植株游离脯氨酸含量为对照的5倍.断水处理5d后,转基因植株生长基本正常,脯氨酸含量增加约2倍,比对照植株高2～3倍.

匍匐翦股颖草坪根系对城市生活污水的净化效应

针对匍匐翦股颖草坪根系对生活污水的净化效应进行了初步的探索,结果表明,城市生活污水能显著促进匍匐翦股颖地上部分叶片的生长,其叶片生长量随着其处理的进程而逐渐增加,至第6周时叶片生长量比净水灌溉的对照增加了75.6%;根系生长在污水灌溉与净水灌溉之间未显示出明显的差异;匍匐翦股颖草坪根系对生活污水中总氮(TN)、总磷(TP)、化学耗氧量(CODCr)的去除率分别达到了71.0%、53.1%、82.8%,而无草坪的裸土对TN、TP、CODCr的去除率只有24.6%、13.0%、44.2%。结果显示了匍匐翦股颖草坪根系对生活污水有着较好的净化效果,有望在城市生活污水处理中应用。

粤选1号匍匐翦股颖新品系果岭草坪夏季性状及高温胁迫效应

粤选1号匍匐翦股颖新品系是丛Penncross建坪的老果岭中分离出的无性系。在广州地区夏季果岭草坪密度、绿叶盖度、叶片老化指数、抗坏血酸含量显著高于原品种Penncross,叶片质膜相对透性低。持续高温(36℃)胁迫下,新品系叶片中游离脯氨酸含量显著增加,而原品种在高温胁迫第3d才开始显著增加,新品系游离脯氨酸含量明显高于原品种;高温胁迫下新品系叶片可溶性蛋白含量增加并高于Penncross,而Penncross在高温胁迫2d后显著下降;新品系匍匐茎可溶性糖含量增加,高温胁迫5d后,Penncross显著高于新品系;新品系匍匐茎淀粉含量显著高于Penncross;高温胁迫对叶片相对含水量和叶绿素含量无明显影响。

新型诱导剂丁二醇对匍匐翦股颖抗病性诱导的研究

研究了新型诱导剂丁二醇诱导匍匐翦股颖对褐斑病(Rhizoctonia solani)的抗病性.结果表明:50～150μmol/L丁二醇均对匍匐翦股颖有一定的诱导作用,其中100μmol/L丁二醇处理的诱导效果最好,病情指数由对照的93.33降至31.33,发病率由100%下降到43.33%,防治效果高达75%,且与农药扑海因防治效果差异不显著.

外源甜菜碱对匍匐翦股颖的抗旱性调控作用分析

为了探究外源甜菜碱(GB)对干旱胁迫及复水条件下匍匐翦股颖的生长调控作用,以匍匐翦股颖(T-1)成熟草皮为材料,移栽至温室适应性生长50d后,分别用0,50,100,200mmol/L的GB喷施匍匐翦股颖叶片,3d后进行人工模拟干旱处理和复水处理,研究在不同水分条件下,外源GB对匍匐翦股颖坪观质量、叶片相对含水量、细胞膜透性、叶绿素、游离脯氨酸、可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量以及抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)]活性的影响。结果表明,干旱胁迫降低了匍匐翦股颖的坪观质量、相对含水量和叶绿素含量,提高了细胞膜透性、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、MDA含量和SOD、CAT、POD活性,而外施一定浓度的GB可使干旱胁迫引起的坪观质量、叶片相对含水量和叶绿素含量的下降幅度显著降低,同时相对提高了叶片脯氨酸含量、可溶性蛋白含量以及SOD和CAT活性,并降低了细胞膜透性和MDA含量,复水后,各指标均得到不同程度的恢复,其中GB处理恢复甚至优于干旱处理前的水平。本研究结果表明,外施一定浓度的GB对干旱胁迫下匍匐翦股颖的抗旱性具有增效作用,并且在复水后使匍匐翦股颖积累了更多对干旱逆境的防御能力,使其能够更好地适应干旱胁迫环境。综合各项指标,100mmol/L的GB处理最有利于提高匍匐翦股颖的抗旱性。