化学去细胞异种神经移植后宿主的许旺细胞在移植物内的增殖

目的观察化学去细胞异种神经移植后宿主许旺细胞向移植物内增殖的情况。方法移植化学去细胞兔神经修复大鼠1 cm坐骨神经缺损,4个月后处死动物,取移植物行苏木精-伊红染色、S-100免疫组织化学染色及透射电镜观察。结果再生神经纤维顺利长入移植物,围绕再生纤维有大量胞体S-100免疫组化反应阳性的细胞呈条索状排列,半薄切片显示移植物内再生轴突排列整齐,透射电镜显示有细胞包绕再生轴突并形成髓鞘。结论化学去细胞异种神经移植后宿主许旺细胞可随再生纤维长入移植物并形成髓鞘。

异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损的功能评价

[目的]评价异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损后神经功能恢复,从而为临床应用去细胞异种神经移植修复神经缺损提供更为充分的理论依据。[方法]雄性Wistar大鼠15只,致左侧坐骨神经1 cm缺损,以等粗兔化学去细胞神经移植修复。每2周测定坐骨神经指数,移植后4个月动物麻醉后暴露移植段神经,刺激近侧神经干、于同侧胫后肌群记录运动诱发电位,之后取移植段神经切片后行HE组织化学及NF-160免疫组织化学染色。[结果]去细胞异种神经移植物未被宿主排斥,大量神经纤维长入移植物,神经电生理及坐骨神经指数显示宿主坐骨神经功能有部分恢复。[结论]去细胞异种神经移植可以作为修复周围神经缺损的一种有效方法。

化学去细胞同种异体神经移植物储存方法的初步研究

目的 :探索犬去细胞神经的最佳储存方法。方法 :采用真空封装辐照灭菌法深低温储存犬去细胞坐骨神经12个月 ,进行细菌学检查、一般组织学观察、免疫组化染色、透射电镜观察。结果 :储存过程中不会发生细菌污染 ,储存去细胞神经的延展性及神经外膜的韧弹性保持良好 ;其基本结构、神经基底膜及许旺细胞基底板层被保留 ;仍然保持为没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管。结论 :真空封装辐照灭菌法可有效储存去细胞神经 1年。

人类去细胞同种异体神经移植物化学萃取方法的研究(英文)

背景:研究表明:应用化学消化剂处理同种异体神经可以有效地清除细胞、髓鞘而不出现宿主免疫排斥反应,但目前这种方法仅在小动物及低等哺乳类实验中取得成功,离临床应用尚有差距。目的:清除人类周围神经中的细胞和髓鞘,萃取粗大和长段的去细胞神经移植物。设计:非随机非对照实验研究。地点和对象:实验在解放军第三○四医院骨科完成,对象为急性脑外伤死亡者,男,26岁,体质量75kg,死者家属同意遗体捐献。干预:切取年轻男性遗体捐献者的长段尺神经,以TritonX-100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经及新鲜神经行HE染色、髓鞘染色及纤维素染色,以观察细胞、髓鞘及神经基底膜;免疫组织化学染色以显示许旺细胞基底板层;行半薄切片及超薄切片透射电镜检查,观察超微结构。主要观察指标:去细胞神经的物理形状,组织学观察和超微结构。结果:去细胞神经的延展性及神经外膜的韧弹性良好。细胞和髓鞘被彻底清除,神经基底膜被保留;许旺细胞基底板层保留完好;去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管。结论:TritonX-100及脱氧胆酸钠化学处理方法,可有效清除人类周围神经中的细胞及髓鞘,萃取粗大和长段的去细胞神经;该神经移植物保持了网管柱状组织结构,保留了许旺细胞基底板层及其主要?

化学去细胞神经同种异体移植后近期运动功能的恢复(英文)

目的:研究去细胞同种异体神经移植修复大型哺乳类动物粗大和长段周围神经缺损的效果。方法:15只犬分成去细胞神经同种异体移植组6只、自体神经移植组6只、新鲜神经同种异体移植组3只。右侧坐骨神经主干造成5.0cm长缺损,分别以上述3种神经移植物桥接修复。术后6个月进行步态分析。结果:同种异体移植组和自体神经移植组功能恢复一般情况相似,正常组、同种异体移植组及自体神经移植组犬距小腿关节角度平均极大值分别为59.0°,58.0°和61.9°,平均极小值分别为16.4°,7.6°和8.4°。新鲜神经同种异体移植组无任何恢复;同种异体移植组和自体神经移植组的右后肢运动及步态周期非常相似,距小腿关节跖屈及背伸肌群的肌力均有一定程度的恢复,但不及正常犬。结论:化学去细胞神经同种异体移植修复犬坐骨神经长段缺损,在术后6个月近期运动功能恢复与自体神经移植相似。

化学去细胞神经同种异体移植后近期感觉及运动传导功能的神经电生理观察(英文)

目的:以化学去细胞同种异体坐骨神经移植修复犬坐骨神经的粗大和长段缺损,观察其近期神经电生理恢复。方法:12犬随机分成去细胞神经移植组(实验组)和自体神经移植组(对照组)各6犬。右侧坐骨神经造成5.0cm长缺损,以两种神经移植物桥接修复。术后6个月行神经电生理观察,包括小腿三头肌运动诱发电位、神经移植段运动传导速度、感觉诱发电位等。结果:①方波(1.0～2.0mA,0.1ms,1.0Hz)刺激移植段近侧神经,均在小腿三头肌上记录到运动诱发电位曲线。②神经移植段运动传导速度,实验组平均为47.2m/s,对照组为60.9m/s,正常值为122.0m/s。③方波(5.0～10.0mA,0.2ms,1.9Hz)刺激胫神经远端,均在颅顶部记录到感觉诱发电位曲线;两组动物的感觉恢复程度相似,但均不及正常侧。结论:化学去细胞神经同种异体移植修复犬坐骨神经长段缺损,术后6个月近期感觉及运动传导功能恢复与自体神经移植相似。

化学去细胞神经同种异体移植的初步临床应用

目的 评价去细胞同种异体神经移植修复人体长段周围神经缺损的效果。报告1例化学去细胞同种异体神经成功修复长段神经缺损的体会。方法 对3例正中神经损伤，1例骨间背侧神经以及1例正中神经和桡神经损伤的患者应用去细胞同种异体神经移植，修复神经缺损，术后定期对患者进行感觉、运动功能检查，并行肌电图检查。结果 1名患者术后9个月感觉、运动功能恢复。结论 化学去细胞神经同种异体移植修复人体周围神经缺损，能够恢复神经功能。避免了取自体神经的弊端，在临床上是可行的。

NGF和GM_1联合应用对去细胞异种神经支架移植后神经再生和修复的影响

为了探讨神经生长因子(NGF)和单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合应用对去细胞异种神经支架移植后神经再生及功能恢复的影响,本研究将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、NGF治疗组、GM1治疗组、NGF+GM1联合治疗组,选取兔胫神经进行化学萃取,形成去细胞异种神经支架桥接大鼠10mm坐骨神经缺损,移植前分别用等渗盐水(NS)、NGF液、GM1液或NGF+GM1液浸泡去细胞异种神经支架,术后各组大鼠术侧小腿肌内分别注射NS液、NGF液、GM1液或NGF+GM1液。术后4、8周行大体观察并用神经电生理、肌湿重、免疫组织化学等方法测定神经纤维再生及功能恢复情况。结果显示:在同一时间点,NGF+GM1联合治疗组坐骨神经运动传导速度恢复率、小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率、小腿三头肌湿重恢复率均优于单独用药组(P<0.05);免疫组织化学结果显示NGF+GM1联合治疗组有大量再生有髓神经纤维顺畅地通过远端吻合口。本研究结果提示联合应用NGF和GM1可明显促进去细胞异种神经支架移植后的神经纤维再生与功能恢复。

补阳还五汤和GM1对去细胞异种神经支架移植后神经再生和修复的实验研究

目的:探讨补阳还五汤对异种去细胞神经支架移植后神经再生及功能恢复的影响以及与GM1(mono-sialotetrahexosy 1 gangliosides)的效果比较。方法:36只健康成年SD大鼠随机分为3组:补阳还五汤(BYHWD)治疗组、GM1治疗组和生理盐水(NS)对照组。动物分别存活4、8周,不同时段各组为6只。以上3组大鼠分别以10 mm长度的兔异种去细胞神经支架桥接大鼠坐骨神经缺损。术后补阳还五汤组和生理盐水对照组分别用补阳还五汤水煎剂和生理盐水按10 ml/kg灌胃,持续1个月。GM1治疗组术后大鼠损伤侧小腿三头肌内注射GM1 0.1 ml/d;各组分别在术后第4周、8周行大体观察、测定坐骨神经运动传导速度恢复率(MNCV%)和小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率(CMAP%)、移植体的神经纤维行电镜半薄切片观察记数有髓纤维的数目,免疫组织化学标记NF和S-100。结果:在同一时相点补阳还五汤组坐骨神经运动传导速度恢复率、小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率(CMAP%)及移植体的有髓纤维数目均优于生理盐水对照组(P<0.05)。补阳还五汤组与GM1组比较没有显著性差异(P>0.05)。结论:应用补阳还五汤可促进异种去细胞神经支架移植后神经再生与功能恢复;补阳还五汤和GM1对异种神经支架移植后神经再生与功能恢复的效果没有显著性差异。

补阳还五汤和NGF对异种去细胞神经支架移植后神经再生和修复的影响

为了探讨补阳还五汤对异种去细胞神经支架移植后神经再生及功能恢复的影响以及与NGF的效果比较。我们将36只健康成年SD大鼠随机分为3组:补阳还五汤(BuYangHuanWu Decotion,BYHWD)治疗组、NGF治疗组和生理盐水(NS)对照组。动物分别存活4周和8周,不同时段各组为6只。以上3组大鼠分别以10mm长度的兔异种去细胞神经支架桥接大鼠坐骨神经缺损。术后补阳还五汤组和生理盐水对照组分别用补阳还五汤水煎剂和生理盐水按10ml/kg灌胃,持续1月。各组分别在术后第4周、8周行大体观察、坐骨神经功能指数(SFI)测定、辣根过氧化物酶逆行示踪、小腿三头肌湿重恢复率测定、移植体的组织学观察。结果显示,在同一时相点补阳还五汤组SFI、术侧L3～L5脊神经节和L3～L5脊髓节段前角运动细胞的HRP标记细胞数均优于生理盐水对照组(P<0.05)。补阳还五汤组与NGF组比较没有显著性差异(P>0.05)。在同一时相点形态学观察结果:各组神经移植体粗细基本正常,表面大量血管分布,与周围组织轻度粘连;补阳还五汤组再生神经纤维更加密集、排列规则整齐,移植体雪旺细胞(SC)大量增殖,接近于正常。上述结果提示,应用补阳还五汤可促进异种去细胞神经支架移植后神经再生与功能恢复,与NGF的作用效果没有差别。

冻干去细胞异种神经和类许旺细胞共移植修复外周神经缺损的实验研究

目的研究冻干化学去细胞异种神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法48只成年雌性DA大鼠分别用4种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损:冻干化学去细胞异种神经与类许旺细胞共移植组、冻干化学去细胞异种神经移植组、化学去细胞异种神经移植组、异种神经移植组。术后4周、24周通过大体观察、神经电生理、肌肉湿重及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果术后24周A组运动神经传导速度和肌肉湿重恢复率优于B、C、D组(P<0.05);组织学检测发现,术后24周A组移植段再生神经纤维较多,以有髓神经纤维为主。结论种植类许旺细胞的冻干化学去细胞异种神经能有效的修复大鼠周围神经缺损。

异种神经脱细胞移植物修复周围神经缺损的实验研究

目的探讨异种神经脱细胞移植物桥接大鼠坐骨神经缺损后的神经再生及其再生过程中免疫排斥反应。方法用脱细胞兔周围神经作为移植物桥接大鼠坐骨神经1 cm缺损;术后3、5、8、11、15天检测血液中淋巴细胞占白细胞百分比;3个月后取移植物及腓肠肌,用甲苯胺蓝、乙酰胆碱酯酶(AchE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)组化染色,光、电镜观察神经再生及腓肠肌运动终板的恢复情况。结果术后大鼠血液中淋巴细胞占白细胞的百分比与正常大鼠相比较无显著性差异,3个月后大鼠术侧下肢足趾能分开,行走时后蹬动作有力,针刺足底有逃避反应,桥接物内见有大量再生的坐骨神经纤维,腓肠肌肌纤维上见有呈AchE阳性的运动终板和神经纤维。结论异种神经脱细胞移植物桥接大鼠坐骨神经缺损具有促进其再生的作用。

异种脱细胞神经移植物修复坐骨神经缺损的实验研究

目的:观察异种脱细胞神经修复坐骨神经缺损的效果,探寻修复周围神经的新型移植物。方法:分别取家犬、新西兰大白兔臂丛神经及SD大鼠坐骨神经,对其适当切修使直径、长度相近,对获取的神经进行低渗-脱细胞处理,得到脱细胞神经移植物。32只大鼠均制造人为坐骨神经缺损,随机均分为4组,A组,家犬脱细胞神经移植修复;B组,兔脱细胞神经移植修复;C组,大鼠脱细胞神经移植修复;D组,未修复组。修复后进行神经运动和感觉功能的检测。结果:修复组大鼠坐骨神经功能恢复均显著优于未修复组,而各修复组间无明显差异。结论:异种脱细胞神经可取得与同种脱细胞神经修复周围神经缺损相似的效果。

人源性胰母细胞瘤异种移植模型的构建与验证

目的研究构建合适的动物模型用于胰母细胞瘤(PBL)的化疗药物筛选及新药评估。方法将手术切除的PBL肿瘤组织碎块移植到免疫缺陷的小鼠皮下组织,待移植瘤生长至1500 mm^(3)时进行瘤体传代及保存。使用HE染色、免疫组织化学及PCR法对成功建立的PBL患儿起源的异种移植(PDX)模型进行人源性鉴定。结果HE染色显示小鼠PDX中的肿瘤组织及细胞和患儿肿瘤细胞形态基本相同,免疫组化结果显示β-连环蛋白(β-Catenin)、细胞角蛋白7(CK7)和细胞角蛋白19(CK19)在PDX模型组织与人属源性肿瘤组织中有相同的免疫学特征。PCR分析显示PDX组织和原发肿瘤组织具有相同的个体来源。结论所建立胰母细胞瘤来源PDX高度保留了原发胰母细胞瘤的生长模式及蛋白表达特性,为胰母细胞瘤患者的基础研究和临床用药指导提供了重要的实验模型工具,给推动疾病机制探索及制定个性化治疗方案提供了科学依据。

异种脱细胞神经移植修复大鼠面神经缺损的实验研究

目的探讨异种脱细胞神经桥接大鼠面神经缺损后的神经再生方式。方法用脱细胞兔面神经作为移植物桥接大鼠面神经颊支2 cm缺损,以自体腓神经移植作为正常对照组。术后5周和12周,取面神经移植段中部及远端吻合口处各3mm神经组织,进行组织学检测。结果 12周时,两组中移植段分叉处远端均有再生纤维,再生纤维数在两组之间无显著性差异。结论异种脱细胞神经作为神经再生通道,其再生能力与自体神经无显著差异,可以作为自体神经移植的可选替代物。

脱细胞异种神经移植体复合BMSCs修复大鼠坐骨神经缺损的研究

目的:对脱细胞异种神经的生物相容性进行评价,证明应用其复合BMSCs促进神经再生和功能恢复的效果。方法:采用化学萃取法制备兔的脱细胞神经,应用扫描电镜观察其超微结构;将BMSCs种植到神经支架构建神经移植体,体外培养后观察细胞形态;用构建的异种神经移植体桥接大鼠坐骨神经缺损,术后8周,检测胫前肌湿重比率,对再生神经进行组织形态学分析;并应用免疫荧光染色检测神经内NGF的表达。结果:脱细胞异种神经较完整地保留了天然立体的施万细胞基底膜管结构,完全地移除了神经内的施万细胞、轴突和髓鞘成分;在体外培养中支持种植的BMSCs黏附和生长。神经移植术后,与单纯异种脱细胞神经移植组相比,复合BMSCs的异种神经移植体移植能使胫前肌湿重比率增加、有髓神经纤维数目、髓鞘厚度和轴突直径增加;增加再生神经内NGF的表达。结论:异种脱细胞神经移植体具备天然的立体结构,移除了施万细胞、髓鞘等抗原成分;神经支架无细胞毒性,具有良好的细胞相容性;复合BMSCs的异种神经移植体可显著地促进神经再生及功能恢复。

兔化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损

目的 :以化学去细胞兔神经移植修复大鼠坐骨神经缺损 ,从而探索化学去细胞异种神经移植修复神经缺损的可能性 ;方法 :以 3 .0 %TritonX 1 0 0和 4 .0 %脱氧胆酸钠顺序处理新鲜取材的兔神经 (直径 1 .5mm左右 ) ,移植修复成年wistar大鼠 1 .0cm坐骨神经缺损 ,4个月后行电生理及组织学检查 ,观察神经再生情况 ;结果 :移植神经未被宿主排斥 ,大量再生的神经纤维长过移植物 ,并恢复电传导功能 ;结论 :化学去细胞异种神经可以作为修复周围神经缺损的一种很有前途的方法。

环孢素A对异种脱细胞神经移植的影响

目的研究脱细胞异种面神经移植中环孢素A(cyclosporin A,CSA)的作用效果。方法 48只Wistar大鼠随机选择一侧作为实验侧,解剖面神经后于颊支制造1cm的神经缺损。按神经移植的种类分为4组,A组:异种面神经移植组;B组:异种面神经移植应用CSA免疫抑制组;C组:异种脱细胞神经移植组;D组:异种脱细胞神经移植应用CSA免疫抑制组。各组实验动物分别于术后5周,12周进行电生理学测试(潜伏期、运动神经传导速度),并进行光镜、电镜观察形态学变化。结果术后5周和12周时,C,D组动物在电生理指标及光镜、电镜指标上均优于A,B组,术后5周和12周,D组面神经颊支传导速度均高于其它各组。结论 1.0 cm缺损的异种脱细胞面神经移植动物实验中,应用CSA5mg/(kg.d)5周可以降低排斥反应,提高神经再生能力。