促黄体生成素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制

目的 研制人血清中促黄体生成素 (LH)的化学发光免疫检测试剂盒。方法 以LH单克隆抗体作为固相包被 ,LH多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体 ,以金刚烷胺作为底物 ,采用两步法建立了双位点夹心法人血清LH的化学发光免疫定量分析法。结果 该方法的敏感度为 1mIU/ml,可测范围为 1～ 2 0 0mIU/ml,批内和批间的变异率分别为 6.7%和 7.7% ,回收率在 85 %～1 1 0 %之间。本法与TSH的交叉为 1 .3 % ,与FSH的交叉为0 .0 2 % ,与HCG的交叉为 0 .0 8% ,血清样品测定结果与国外同类试剂的测定结果呈正相关 ,相关系数r=0 .993。结论 该试剂盒有较高的灵敏度 ,重复性和准确度 ,与国外同类试剂有良好的相关性 ,适合用于临床检验。

基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术建立血清IL-6水平检测方法与初步应用评价

目的基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法。方法采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和素包被的磁性固相微粒特异反应发光,通过测量发光信号值进行定量分析;并对其标记抗体稀释缓冲液、标记抗体浓度、样本加样量等进行条件优化;对空白限(LOB)、检出限(LOD)、中间精密度、可报告范围、干扰实验、钩状(HOOK)效应等性能指标进行评价;选择145例血清样本,采用线性回归分析与罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果成功建立一种基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术检测血清IL-6的方法。该方法选择MESBSA作为标记抗体稀释缓冲液,标记抗体浓度选择0.2μg/ml,样本加样量选择50μl。该方法的LOB为0.2 pg/ml,LOD为0.5 pg/ml,可报告范围为0.5~30000 pg/ml,中间精密度<5.3%。在IL-6达到200000 pg/ml浓度水平时,未出现HOOK效应现象。在三酰甘油(TG)30000μg/ml,血红蛋白(HGB)9000μg/ml,胆红素(TBIL)330μg/ml,类风湿因子(RF)1500 IU/ml浓度范围内,干扰物质对检测结果无影响。与电化学发光法测定IL-6比对,线性回归方程为Y=0.9802X-3.4879,r=0.9977,两种方法试剂测定结果呈高度相关(P<0.05)。结论建立了基于吖啶酯化学发光检测血清IL-6的方法,各项指标均符合临床应用要求,适宜在临床实验室推广应用。

基于化学发光酶免疫分析法检测花生过敏原Ara h 2

Ara h 2是花生主要过敏原之一,为开发食物中Ara h 2过敏原成分的快速检测方法,减少因误食导致花生过敏事件的发生,该研究采用鼠源单克隆抗体作为捕获抗体、兔源多克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘法优化抗体工作浓度,建立了一种检测花生过敏原Ara h 2的间接双抗夹心化学发光酶免疫分析法,并对该方法的灵敏度、准确度、精密度和特异性进行评价。该方法的检出限为1.085 ng/mL,线性范围为3.12~200 ng/mL,添加回收率为78.30%~94.39%,批内和批间变异系数均小于10%,且特异性良好,与其他常见食物过敏原无交叉反应。该方法与相同抗体所建立的间接双抗夹心酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法相比,在灵敏度上表现出一定优势。该研究开发的化学发光酶免疫分析法可对花生食品生产过程中和消费前的Ara h 2过敏原成分检测提供可靠的技术支持。

人类免疫缺陷病毒抗体初筛阳性确证结果分析及化学发光法检测抗体吸光度值/临界值灰区范围的合理性探究

目的分析人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体初筛阳性确证结果及化学发光法检测抗体吸光度值/临界值(S/CO值)灰区范围的合理性。方法收集184例HIV抗体筛查阳性标本。采用免疫印迹法(WB)及病毒核酸测定法进行确证,观察确证结果及条带分布。采用受试者工作特征(ROC)曲线预测最佳临界值,分析HIV抗体S/CO值灰区设置的合理性。结果184例HIV抗体筛查阳性标本中,经化学发光法初筛153例(83.15%),经胶体金法初筛31例(16.85%)。男性(57.07%)、年龄在40岁以上(75.00%)的HIV抗体初筛阳性病例占比高于女性及其他年龄段病例。WB补充试验发现,共101例(54.89%)病例确证为HIV-1抗体阳性,56例(30.43%)病例确证为HIV-1抗体阴性,27例(14.67%)病例为HIV-1抗体不确定。27例中,1例经核酸检测为阳性(化学发光法初筛抗体S/CO值:5.60),其余26例为阴性。化学发光法、胶体金法与WB补充试验的阳性符合率分别为65.36%、3.23%,差异有统计学意义(χ^(2)=40.191,P<0.05)。27例HIV-1抗体不确定病例经核酸检测载量发现,1例病例WB带型为P24+gp160,核酸检测该病例为阳性。不确定样本带型分布中,P24出现率最高(74.07%),其后依次是P66(11.11%)、gp160(7.41%)和P17(3.70%)、gp41(3.70%)。ROC曲线预测HIV抗体S/CO最佳临界值为5.15,曲线下面积(AUC)为0.904,敏感度与特异度分别为83.30%、76.40%,95%CI为0.861~0.948。HIV抗体初筛阳性病例的WB检测带型与确证结果之间具有较好相关性(P<0.05),其中P24带型与确证结果之间的相关性最高(r=0.910)。结论HIV抗体初筛阳性病例中存在一定的假阳性,采用WB实验能进行有效排查。此外,基于本实验检测平台设置化学发光法检测HIV抗体S/CO值灰区范围为1.00~5.15,其具有较高的敏感度。

基于化学发光磁酶免疫技术建立粮食中铅的自动化检测方法

利用抗原抗体高特异性,建立一种自动化的化学发光磁酶免疫方法,快速定量检测粮食中铅元素的含量。通过优化前处理条件和化学发光磁酶免疫分析方法的反应条件,实现了大米、小麦、玉米等粮食样品中铅的自动测定。该方法的检测范围为0.05~0.71 mg/kg,大米和玉米中检出限为0.02 mg/kg,小麦中检出限为0.01 mg/kg,回收率范围89.2%~113.6%,相对标准偏差均小于10%。基于化学发光免疫平台,本方法可在30分钟内完成8个样品的同时自动化检测,有效减少人为误差,提高检测准确性和检测效率,在粮食中铅的快速定量检测方面具有良好的应用前景。

化学发光免疫法在肝癌检测中实施效果分析

分析化学发光免疫法在肝癌检测效果。方法 选取2020年3月-2023年3月我院收治的100例肝癌患者为观察组,再选取同时期健康体检人员100例为对照组,所有受试者均进行化学发光免疫法检测,分析临床检测效果。结果 观察组肿瘤生物标志物水平高于对照组,P<0.05;观察组AFP、AFU、GGT、CA-199、CEA、CA125的阳性率均低于联合检测切高于对照组,P<0.05。结论 化学发光免疫法在肝癌检测效果理想,有利于区分肝癌患者和普通人群,并且联合检测肿瘤生物标志物水平的阳性率高于单独检测,为临床医生提供科学参考依据。

甲状腺功能疾病诊断中化学发光免疫检测技术的应用价值

目的探讨化学发光免疫检测技术(CLIA)在甲状腺功能疾病(TFD)中的应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月镇江三五九医院收治的100例TFD患者,作为观察组;选取同期100例健康人群,作为对照组。两组均接受CLIA检验,比较两组检验结果。结果观察组FT_(4)、TG-Ab、FT_(3)、Tpo-Ab、TSH水平均明显高于对照组(P<0.05)。FT_(4)、TG-Ab、FT_(3)、Tpo-Ab、TSH联合检查诊断TFD的敏感度为98.00%,特异度为99.00%,准确度为98.50%。结论对TFD患者实施CLIA检验具有敏感度高、操作简单、准确率高等优势,可为TFD的临床诊断提供科学依据。

化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清的效果

确定研究对象为乙肝病毒血清,分析化学发光法与酶联免疫法效果。方法 研究对象:患者(确诊乙肝,430例);收治时间:2022.01-2023.05。收集血液标本,共430份,平均分为2份。分别用2种方式检验,分别为化学发光法(H组)、酶联免疫法(M组)。结果 ①检出率,H组vsM组=45.81%>30.23%(=22.150,P<0.05)。②阳性检出率,HBsAb、HBcAb、HBeAb、HBsAg、HBeAg,H组>M组(=9.671/7.839/10.153/9.107/8.401,,P<0.05)。结论 HBV检测中,与酶联免疫法相比,化学发光法检验准确性更高,可行。

化学发光法与酶联免疫吸附试验在血液标本内乙肝病毒检测中的价值对比

对比分析化学发光法、酶联免疫吸附法用于检测血液样本内乙肝病毒的价值。方法 选择2022年1月-2023年12月我中心接收疑似乙肝血液样本50例进行回顾性分析,均采取化学发光法、酶联免疫吸附试验对样本内乙肝病毒进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应结果为金标准,分别计算化学发光法、酶联免疫吸附试验检测的灵敏度、特异度及准确率,进一步分析两种检测方法在检测乙肝五项的阳性检出率。结果 50例疑似乙肝患者经实时荧光定量聚合酶链反应检查,结果 显示35例确诊为乙肝疾病,占比70.00%,经过计算,化学发光法检测的灵敏度为97.14%、特异度为93.33%、准确率为96.00%,与酶联免疫吸附试验计算结果比较无统计学差异(p>0.05)。进一步检测乙肝五项结果显示,两项技术在检测HBsAb(乙肝表面抗体)、HBcAb(乙肝核心抗体)、HBsAg(乙肝表面抗原)阳性率比较无统计学差异(p>0.05),化学发光发检测HBeAg(乙肝e抗原)、HBeAb(乙肝e抗体)阳性率高于酶联免疫吸附试验(p<0.05)。结论 化学发光法与酶联免疫吸附试验均可作为检测血液样本内乙肝病毒的方法,其中以化学发光法检测结果更为准确,可用于临床动态监测病情,值得借鉴。

荧光定量聚合酶链反应法与免疫学化学发光法检测乙型肝炎病毒的比较

目的比较荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法与免疫学化学发光法(CLEIA)检测乙型肝炎病毒(HBV)的价值。方法选择2020年8月—2022年6月上饶市人民医院检验科341份应用FQ-PCR法测定HBV-DNA阳性血清标本作为研究对象,所有血清标本均采用FQ-PCR法及CLEIA检测。分析HBV-DNA阳性标本中乙肝5项[乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝核心抗体(HBcAb)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝e抗原(HBeAg)]阳性检出率在不同血清模式下HBV-DNA载量分布情况,对比HBV-DNA载量于HBeAg阳性与HBeAb阳性中的分布情况。结果HBsAg+、HBcAb+、HBeAg+及HBsAg+、HBcAb+、HBeAb+阳性检出率最高,分别为38.42%、43.70%;HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAg+阳性检出率为4.99%,HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAb+阳性检出率为4.69%。另外,HBcAb阳性标本共331份,约占所有HBV-DNA阳性标本数的97.07%。大三阳组(131例)患者HBV-DNA平均载量为5.65×10^(8)U/mL,其中低载量占全组比例为17.56%(23/131)、中载量占全组比例为17.56%(23/131)、高载量占全组比例为64.89%(85/131);小三阳组(149例)患者HBV-DNA平均载量为1.82×10^(6)U/mL,其中低载量占全组比例为81.88%(122/149)、中载量占全组比例为15.44%(23/149)、高载量占全组比例为2.68%(4/149)。HBeAg阳性患者于高载量HBV-DNA中占比为60.67%,HBeAb阳性患者于低载量HBV-DNA中占比为77.71%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论2种方法联合检测在判断HBV感染中具有较高的应用价值,可为诊断及治疗方案制定等提供可靠的参考依据。

阿尔茨海默病中Aβ1-42磁微粒化学发光免疫检测方法的建立和应用

目的建立一种定量检测血清中β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)的磁微粒化学发光免疫检测方法.方法制备活化磁性微球,并标记抗Aβ1-42抗体;制备Aβ1-42抗体-吖啶酯发光试剂,建立一步式定量检测Aβ1-42浓度的磁微粒化学发光免疫检测方法,组装成试剂盒,并评估其灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性等,推测血清Aβ1-42正常参考区间.结果该方法对血清Aβ1-42检测灵敏度评估的空白限(LoB)为0.03 pg/mL,检测限(LoD)为0.05 pg/mL,功能灵敏度(FS)为0.11 pg/mL,线性范围0.1~5000 pg/mL,加标回收率为103.78%~106.10%;试剂盒检测的分析内精密度为1.06%~2.70%,分析间精密度为3.61%~5.21%,总不精密度为5.93%~8.60%.在试剂盒特异性方面,与血清中常见蛋白的交叉反应率低于2%;同时,样本中常见的3种干扰物在胆红素、甘油三酯、血红蛋白浓度分别低于40 U/L、2 mmol/L、3 g/L时,检测结果基本不受影响.试剂盒在37℃下可稳定保存7 d以上,说明2~8℃下产品有效期不低于12个月.且100例正常人血清检测所得Aβ1-42正常参考区间>654.2 pg/mL.结论本方法建立的Aβ1-42磁微粒化学发光免疫检测方法具有灵敏度高、准确性强、重复性和特异性高等优点,可为血清中Aβ1-42精准定量检测提供新的技术手段.

β-人绒毛膜促性腺激素快速高灵敏化学发光POC检测方法的建立及评价

目的:建立β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)快速高灵敏化学发光POC检测法(POC-CLIA)并进行评价。方法:采用碱性磷酸酶(Alp)-AMPPD发光体系,以磁微粒(Mps)为固相载体构建POC-CLIA,并评估其灵敏度、精密度、准确度、线性范围、特异性、稳定性、钩状效应和临床应用。结果:β-HCG最低检测限为0.71 mU/ml,线性检测范围为0.710~1.092×10^(4) mU/ml,且在1.7×10^(5) mU/ml内无钩状效应影响。批内和批间变异系数均<10%,可在37℃稳定保存10 d。准确度偏差在±10%之内,结果可靠。干扰物质与β-HCG均无交叉反应。对100例临床血清标本进行检测,与临床标准方法检测结果高度相关(R^(2)=0.997 0)。单个样品检测时间<15 min,且测试通量可达到200 T/h。结论:该方法具有较高应用价值,可广泛用于基层社区,助力基层医疗中妊娠及相关疾病筛查。

两种化学发光免疫检测系统检测血清CA153的结果一致性研究

目的探讨罗氏cobas E602型全自动电化学发光免疫分析仪和深圳新产业Biolumi 8000型模块化化学发光免疫分析仪检测血清CA153的结果一致性。方法将2020年1月至2022年1月柳州市人民医院收治的恶性肿瘤患者89例,健康志愿者46例作为研究对象。运用罗氏cobas E602型全自动电化学发光免疫分析仪和深圳新产业Biolumi 8000型模块化化学发光免疫分析仪检测受试人员血清CA153水平,CA153<30 U/mL为低浓度,30~300 U/mL为中浓度,300~500 U/mL为高浓度,参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件要求,对检测结果的一致性进行统计分析(包括绝对偏倚分析、相对偏倚分析、Pearson相关性分析和临床可接受评价)。结果两种检测方法的CA153检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。CA153在95%一致性界限内占比均>95.00%,相对偏倚和绝对偏倚符合评价要求。两种检测系统检测结果的相关系数为0.989(P<0.01),呈高度正相关。低浓度、中浓度CA153的相对偏倚SE%均>12.5%。Bland-Altman分析显示,两种检测方法差值随着CA153浓度增高而增大,中、高浓度检测数值不具有一致性。结论罗氏cobas E602型全自动电化学发光免疫分析仪和深圳新产业Biolumi 8000型模块化化学发光免疫分析仪检测血清CA153的相关性良好,两者的检验效能一致,均能满足临床检测需求。当CA153在30~300 U/mL浓度范围内时,两个检测系统检测数值不具有可比性。

化学发光免疫分析法诊断糖尿病的价值分析

目的:分析化学发光免疫分析(CLIA)法诊断糖尿病的价值。方法:选取2022年1月—2023年1月山东泰安八十八医院收治的疑似糖尿病患者50例作为研究对象,均进行CLIA法检测,以口服葡萄糖耐量试验(OGTT)诊断结果为“金标准”,分析CLIA法诊断糖尿病的效能。结果:50例疑似糖尿病患者中,经OGTT确诊38例。CLIA法与OGTT诊断糖尿病的准确度、灵敏度、特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CLIA法诊断糖尿病的效能较高,准确度、灵敏度、特异度与OGTT无明显差异,值得临床应用并予以推广。

化学发光免疫测定技术在甲状腺疾病生化免疫检验中的应用

对生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用价值进行分析。方法 收集本院2020-2022年期间的生化免疫检验患者200例均分为对照组和观察组,每组100例,给予对照组放射免疫法检测,给予观察组化学发光免疫测定,对比两组的检验准确率和阳性率,比较诊断价值。结果 观察组的效果更理想,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用价值显著,能够提高诊断符合率、灵敏度和特异度,具有推广价值。

凝血酶-抗凝血酶复合物化学发光免疫分析检测方法的建立

凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)是人体凝血和抗凝血平衡的产物,反映人体的凝血状态,其检测结果可用于血栓性疾病的辅助诊断。该研究建立了人血浆样本中TAT化学发光免疫分析检测方法,并对其性能进行评估。该研究以TAT为免疫原制备杂交瘤抗体,以双抗体夹心模式建立TAT化学发光免疫分析检测方法。经过反应优化,磁珠浓度和吖啶酯抗体浓度确定为0.20 g/L和0.2 mg/L,样本量为50μL,在37℃条件下,磁珠抗体和待测物孵育5 min,再与吖啶酯标记抗体孵育5 min。结果表明,该方法与含有凝血酶原(0.20 mg/mL)和抗凝血酶Ⅲ(0.31 mg/mL)的样本没有交叉反应,且与日本希森美康的TAT试剂的检测结果相关性较高(r>0.95)。此外,该方法的各项性能指标良好:空白限LoB≤0.20 ng/mL,检出限LoD≤0.40 ng/mL,在0.40~120 ng/mL范围内的线性相关系数为0.998,准确度在±8%的范围内,可满足临床上对血栓性疾病进行辅助诊断的需求。

化学发光免疫分析法简介及其在动物疫病检测中的研究进展

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是将化学发光测定和免疫反应结合起来的一种检测分析技术。与放射性免疫和酶联免疫相比,此方法具有更高的特异性和灵敏度,因此被广泛应用于临床医学、药物检测、环境监测等方面,但在动物疫病检测领域,CLIA仍处于发展阶段。CLIA大致分为直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。近年来,CLIA与新技术的联合以及纳米颗粒等新型材料的使用,显著推动了此检测技术在动物疫病上的应用。本文主要对CLIA的原理、分类、发展,以及该方法在动物病毒性、细菌性和寄生虫性疫病检测方面的研究进行综述,以期为CLIA在动物疫病检测中更深入的应用和发展提供参考。

用于小分子有机污染物现场快速检测的化学发光免疫分析技术

基于融合化学发光原理、生物亲和反应原理和光纤生物传感原理,设计了一种化学发光光纤免疫传感分析仪,建立了小分子有机污染物的现场快速灵敏检测技术。以双酚A(BPA)为例,结合间接竞争免疫反应原理,通过研发惰性蛋白卵清蛋白偶联的包被抗原(BPA-OVA)功能化的光纤探头,建立了BPA现场快速检测的化学发光免疫分析新方法。结果表明,其线性检测范围为0.95~100.9μg/L,检测限为0.15μg/L。实际水样加标回收实验表明,该方法回收率为94.5%~116.0%,标准偏差<10%。该方法具有很好的精密度和准确度,能够用于实际水样中BPA的检测。利用其他小分子有机污染物包被抗原功能化的光纤探头和相应的荧光标记抗体,化学发光光纤免疫传感分析仪即可用于其他小分子有机污染物的现场快速检测。

化学发光免疫检测在生化检验中的应用

化学发光免疫检测技术以放射免疫分析为基本原理,属于一种应用便捷并且灵敏度较高的测定方法,并且重复性良好,不产生放射性污染,具有较高的应用和推广价值。为了提升化学发光免疫检测在生化检验中的应用效果,需要针对化学发光免疫技术进行更加深入的研究,例如:快速化学发光免疫分析方法可以提升生化检验的效率、电化学发光免疫分析方法稳定性良好、多组分化学发光免疫分析方法使用成本较低等,同时各检测方法的准确性均能得到保障,由此,明确其基本情况和使用价值,再探讨其使用方法,以供参考。

电化学发光免疫法定量检测乙肝病毒的临床应用

目的对乙肝病毒标志物应用电化学发光免疫法检测的价值进行探讨。方法选取本院2016年1月～2016年12月期间29 239例疑似乙型肝炎患者进行研究,采用电化学发光免疫法检测,对该检测方法对乙肝病毒五项标志物阳性检出率及不同浓度HBsAg定值参比血清最低检出浓度进行观察。结果阳性检出率方面,电化学发光免疫法检出HBsAg、抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc为61.33%、24.02%、50.00%、44.04%、64.67%。结论对乙肝病毒标志物应用电化学发光免疫法检测,阳性检出率较高,可为临床诊断提供更准确的依据。