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管式磁微粒非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法的建立
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作者 向国庆 宋帅 +5 位作者 温肖会 吕殿红 贾春玲 牛瑞辉 顾有方 罗胜军 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5614-5624,共11页
【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)作为高致病性传染病,给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失,因此建立快捷、灵敏的诊断方法至关重要。【目的】建立一种管式非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法。【方法】以重组pp62... 【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)作为高致病性传染病,给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失,因此建立快捷、灵敏的诊断方法至关重要。【目的】建立一种管式非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法。【方法】以重组pp62蛋白作为包被抗原,羧基磁珠(carboxylic magnetic beads)作为固相载体,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)标记的兔抗猪IgG作为酶标二抗,通过对反应条件进行优化,采用非洲猪瘟国家参考品作为溯源血清绘制出标准曲线,建立基于ASFV pp62蛋白的化学发光抗体检测方法。【结果】用建立的化学发光方法检测277份临床样品血清,通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析确定阴性、阳性临界值,并确定判定标准:浓度值>140.02 U时为抗体阳性,浓度值<140.02 U时为抗体阴性。此方法对6种不同的病原血清抗体进行检测均无交叉反应,且批内和批间变异系数均在10%以内,与商品化非洲猪瘟抗体检测试剂盒的符合率达96.7%。【结论】本研究建立的管式非洲猪瘟病毒化学发光抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为非洲猪瘟早期监测及试剂盒研发提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组pp62蛋白 羧基磁珠 化学发光检测方法
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细胞角蛋白19片段抗原21-1含量化学发光微粒子定量免疫检测方法的建立 被引量:4
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作者 王英雪 郭小怡 +3 位作者 刘江武 翁祖星 葛胜祥 陈毅歆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期523-527,共5页
目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1)含量的化学发光微粒子免疫检测方法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)。方法原核表达制备重组CY21-1(r CY21-1),用其免疫BALB/... 目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1)含量的化学发光微粒子免疫检测方法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)。方法原核表达制备重组CY21-1(r CY21-1),用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融合,制备CY21-1单抗。间接ELISA法筛选可稳定分泌CY21-1抗体的杂交瘤细胞,分别标记微性磁珠(magnetic beads,MB)和吖啶酯(acridinium ester,AE),筛选可特异检测CY21-1的单抗配对,建立CY21-1 CMIA,同时验证方法的线性及灵敏度,并与同类试剂盒进行比较。结果经筛选获得了一组能特异检测CY21-1的单抗配对MB*26B5-3E4*AE,建立的CY21-1 CMIA对检测CY21-1校准品的线性范围为0.1~1 000 ng/m L,R^2=0.992 3,检测灵敏度为0.076 ng/m L。该方法与美国雅培公司生产的Abbott CY21-1 CMIA诊断试剂盒平行检测250份临床血清标本的结果具有良好的相关性(R^2=0.961 6)。结论成功建立了CY21-1 CMIA,且具有良好的线性及灵敏度,为我国肺癌的临床筛查和早期诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞角蛋白19片段抗原21-1 单克隆抗体 化学发光微粒子免疫检测方法 非小细胞肺癌
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Immunomagnetic assay combined with CdSe/ZnS amplification of chemiluminescence for the detection of abscisic acid 被引量:4
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作者 ZHOU GuoHua, WANG Ping, YUAN Ju, QIU Ting & HE ZhiKe Key Laboratory of Analytical Chemistry for Biology and Medicine, Ministry of Education College of Chemistry and Molecular Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2011年第8期1298-1303,共6页
Abscisic acid (ABA) is an important plant hormone. It plays a key role in regulating plant responses to abiotic stress and in controlling seed germination, growth, and stomatal aperture. A rapid, sensitive analytical ... Abscisic acid (ABA) is an important plant hormone. It plays a key role in regulating plant responses to abiotic stress and in controlling seed germination, growth, and stomatal aperture. A rapid, sensitive analytical method for the ABA detection is urgently required for further investigation of ABA signaling. In this work, an immunomagnetic assay combined with CdSe/ZnS amplification of chemiluminescence has been developed for the detection of ABA. The result could be read out in 30 min at least, with the simplified procedure of immunomagnetic assay. Under the optimized condition, a linear range from 1 pM to 10 nM was obtained. An unexpected result induced by the dose hook effect was discussed. This method provided the high selectivity for ABA over other components that might be contained in real samples. 展开更多
关键词 abscisic acid immunomagnetic assay CHEMILUMINESCENCE CDSE/ZNS
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