化学发光酶免疫分析法诊断乙型肝炎病毒感染的价值分析

目的:分析化学发光酶免疫分析法(CLIA)诊断乙型肝炎病毒(HBV)感染的价值。方法:选取2022年10月—2023年8月金沙县中医医院收治的疑似乙型肝炎患者60例作为研究对象,均接受酶联免疫吸附法(ELISA)、CLIA及综合检查,以综合检查诊断结果为“金标准”,比较ELISA、CLIA诊断HBV感染的效能。结果:综合诊断结果显示,HBV感染阳性50例,阴性10例。CLIA检测HBV核心抗体、HBV表面抗体、HBV e抗原、HBV e抗体、HBV表面抗原的阳性符合率高于ELISA,差异有统计学意义(P<0.05);CLIA的灵敏度、准确度、阴性预测值高于ELISA,差异有统计学意义(P<0.05);两种检测方法的特异度、阳性预测值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CLIA应用于HBV感染的诊断价值较高,能够稳定检出血清标志物,可为HBV感染的诊断及后续临床治疗工作提供重要依据,值得临床应用并予以推广。

化学发光酶免疫分析法检测黄瓜、青菜和水中的噻虫嗪残留

为实现黄瓜、青菜和水样品中噻虫嗪残留的灵敏、快速检测,本文开展了噻虫嗪残留化学发光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)研究。通过优化抗原和抗体工作浓度,分析体系中封闭物种类、甲醇含量、钠离子浓度及pH值,建立了噻虫嗪化学发光酶免疫分析方法。在最优分析条件下,该方法的线性范围为0.125~12.5 ng/mL,定量限(LOQ)为0.125 ng/mL,IC50值为1.01 ng/mL。7种噻虫嗪类似物的交叉反应率均不高于0.3%,特异性较好。分别以黄瓜、青菜和池塘水为对象开展添加回收试验,添加回收率范围为86%~108%,相对标准偏差(RSD)为2.6%~9.1%,与超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLCMS/MS)分析结果一致。采用该方法对市场购买的黄瓜、青菜和池塘水中的噻虫嗪残留进行检测,最终3种样品中噻虫嗪残留均低于检出限。研究结果表明,该CLEIA方法灵敏度高,样品前处理简单,环境友好,能够满足黄瓜、青菜和水中的噻虫嗪残留检测。

化学发光酶免疫分析法及ELISA检测抗-HCV的结果比较

目的对比化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附试验(ELISA)用于丙型肝炎抗体检测的效果。方法选取丙型肝炎患者140例,抽取血液标本后分别进行丙型肝炎病毒(HCV)相关抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测。结果化学发光酶免疫分析法检出抗-HCV阳性的检出率为98.6%,高于ELISA法的检出率(94.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。化学发光酶免疫分析法对于抗AMA-M2抗体、抗3E抗体、抗SP100抗体、抗PML抗体、抗GP210抗体的检测阳性率分别为80.0%、73.6%、37.9%、55.7%和47.9%,而ELISA法检测结果分别为12.9%、12.9%、13.6%、10.7%和6.4%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论相对于ELISA法,化学发光酶免疫分析法在丙型肝炎中的应用有较高的检出阳性率,对于相关抗体检测有较高的敏感性,值得推广应用。

化学发光酶免疫分析法检测丙型肝炎抗体的临床评价

目的评价化学发光酶免疫分析法(CLEIA)检测丙型肝炎抗体在临床应用中的价值。方法用化学发光酶免试剂和ELISA试剂同时对我院2009年5月至8月124例输血病人的血清标本作丙肝抗体检测,以ELISA法为对照,对两种检测结果进行对比分析。结果 124例血清标本中,CLEIA法和ELISA法均检出阳性7例,阳性率都为5.65%(7/124),但有2例结果不一致,用同两种方法复检,得出ELISA法有1例假阴性、1例假阳性,CLEIA法结果无变化。结论对两种方法检测所得的数据进行统计学分析,采用χ2检验,χ2=0.5,P>0.1,两种方法差异无统计学意义。

呋喃它酮代谢物直接竞争化学发光酶免疫分析法的建立

采用以对碘苯酚为增强剂的鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢化学发光检测体系,建立检测动物组织中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-2-氨基-2-僫唑烷基酮（AMOZ）残留的直接竞争化学发光酶免疫分析法（dc-CLEIA）。结果表明：此方法IC50为0.62 ng/m L,检测限为15.52 pg/m L,线性范围0.038~9.78 ng/m L,变异系数均小于10%;该方法中抗体除了与呋喃它酮原药有一定交叉外,与其他结构类似物无交叉,表现了良好的特异性;鸡肉样品添加回收率为83%~94%,验证了该方法的准确性,为实际动物组织中AMOZ残留提供了便捷、准确、快速筛查的手段。

高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法测定茶碱的血药浓度

目的采用高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法对茶碱血药浓度进行测定,比较两种方法的差异。方法分别使用高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法对40例患者使用茶碱后的血药浓度进行检测,对两种方法的结果进行比较。结果高效液相色谱法的平均回收率为102.77%,日内RSD为0.8543%～7.5472%,日间RSD为1.4758%～4.6979%;化学发光酶免疫分析法的平均回收率为101.17%,日内RSD为2.2554%～7.4972%,日间RSD为0.789 8%～4.391 7%。结论两种方法的茶碱浓度测定值无显著性差异,测定结果无需互相校正。

磁微粒化学发光酶免疫分析法快速检测血栓4项性能评价

目的探讨磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)和组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)的临床价值。方法采用磁微粒化学发光酶免疫分析法分别检测TM、TAT、t-PAIC和PIC,分析其精密度、携带污染率、正确度、线性检测范围、临床可报告范围、生物参考区间,并按美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP 系列文件的要求,评价其检测结果。结果用磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓4项时,批内、批间精密度[变异系数(CV)]均<10%,携带污染率均<1.0%,线性检测中a值均在1±0.05 范围内,决定系数r^2均≥0.950 0,临床可报告范围、正确度和生物参考区间均符合要求。结论用磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓4项有较好的临床价值。

对比化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物的效果

目的对比化学发光酶免疫分析法(CLEIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎(乙肝)病毒标志物的效果。方法 200例疑似乙型肝炎患者,空腹静脉采血,分离血清。对200份血清分别进行化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法检测5种乙肝病毒标志物,比较两种方法乙肝病毒标志物检出率及灵敏度。结果化学发光酶免疫分析法对乙肝表面抗原(HBsAg)及乙肝e抗体(HBeAb)的检出率明显高于酶联免疫吸附法,差异有统计学意义(P<0.05);但两种方法对乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝核心抗体(HBcAb)、乙肝表面抗体(HBsAb)的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。化学发光酶免疫分析法的检测灵敏度高于酶联免疫吸附法。结论相比于酶联免疫吸附法,化学发光酶免疫分析法灵敏度高,特异性强,用于乙肝病毒标志物的检测准确率高。

微板式磁化学发光酶免疫分析法对人绒毛膜促性腺激素(HCG)的灵敏快速测定

以磁性酶免疫测量分析为模型 ,建立了微板式磁化学发光酶免疫分析法 .利用 3 (2′ 螺旋金刚烷 ) 4 甲氧基 4 (3″ 磷酰氧基 )苯 1,2 二氧杂环丁烷 (AMPPD) 碱性磷酸酶 (ALP)化学发光体系对人绒毛膜促性腺激素 (HCG)进行测定 ,测量的灵敏度较分光光度法提高了 13倍 .测定的线性范围为 0 15～ 5 0 0mIU/mL ;批内变异系数 (C .V .% )和批间变异系数 (C .V .% )均在 18%之内 ;回收率在 80 %～ 116%之间 ;利用本法对血清样品进行了测定 ,并与其它化学发光免疫分析方法进行了比较 ,其相关系数为 0 965 .首次将酶免疫分析方法用于唾液中人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的测定 ,为建立非侵入式样品测定方法打下了基础 .

尿与血清中HCG的化学发光酶免疫分析法比较

目的测血HCG和尿HCG与妊娠及滋养细胞疾病辅助诊断的关系。方法用化学发光法检测30例妊娠或滋养细胞疾病妇女血HCG和尿HCG的浓度。结果妊娠及滋养细胞疾病妇女血HCG和尿HCG的检测值均升高。结论血和尿HCG显著增高对妊娠及滋养细胞疾病妇女诊断有一致性,并且血HCG比尿HCG更准确更有临床意义。

一种化学发光酶免疫分析法检测梅毒特异性抗体结果的正确解读

目的研究如何对化学发光酶免疫分析法梅毒抗体检测(TP-CLEIA)筛查梅毒特异性抗体为阳性的检测结果进行正确的解读。方法对100例使用TP-CLEIA筛查阳性的标本,在用免疫印迹法梅毒抗体检测(TP-WB)确认的同时,采用梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、微粒子化学发光法梅毒抗体检测(TP-CMIA)及ELISA法梅毒抗体检测(TP-ELISA)同时测定,对试验结果作了进一步分析。结果 (1)以TP-WB法为准,TP-CLEIA法筛查为阳性的标本中,真阳性的比例为48.0%。(2)受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析显示,最佳临界值为25.92,此时的阳性预测值为97.7%,阴性预测值89.5%,此时具有最大的ROC曲线下面积;当TP-CLEIA法S/CO<7.84时,经梅毒确认试验被证实为阴性的概率为100.0%;当S/CO>49.77时,梅毒确认试验被证实为阴性的概率为100.0%。(3)对以TP-CLEIA法筛查为阳性,再用TP-CMIA复核为阳性的标本中,其真阳性的比例为81.3%,而无漏检的情况发生。结论 TP-CLEIA作为梅毒的筛查方法,存在较高的筛查假阳性率,尤其是S/CO水平较低时。对TP-CLEIA法筛查为阳性的标本,TP-CMIA法是较为理想的复核方法。

微板式化学发光酶免疫分析法临床测定人血清中孕酮

将抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔板上作为通用固相,通过免疫反应制备固相抗体。采用辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种高通量、简便、快速的化学发光酶免疫分析方法用于临床测定人血清中的孕酮。对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、发光底物选择、发光反应时间及温育条件等进行了考察和优化,最终选定的实验条件:孕酮抗体和HRP标记物的最佳稀释度分别为1∶100000和1∶15000;选用Ⅱ号发光底物,发光反应10min后测定;37℃水浴条件下温育1h。对建立的方法进行了评价。该方法的灵敏度为0.08μg/L;批内和批间相对标准偏差均在15%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为101%、101%和94.4%(在87.8%～108%之间)。使用本方法和经典的放射免疫法同时对36份人血清样品进行测定,结果显示,本方法与放射免疫分析方法相关性良好,其相关系数为0.9502。

微板式化学发光酶免疫分析法测定人血清中癌胚抗原

采用辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺(luminol)-H2O2化学发光体系,建立了一种测定人血清中癌胚抗原(CEA)的高灵敏度、高特异性、简便快速的微板式化学发光酶免疫分析方法。对免疫反应条件、酶结合物稀释度、发光反应时间、封闭液等进行了考察和优化。采用双抗体夹心法,室温静置1h,洗涤后加入100μL发光底物液,10min后检测。该方法的线性相关系数为0.9998;最低检出限为0.57μg/L;批内和批间变异均在10%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为107.4%、93.3%和104.5%。使用本方法与进口发光试剂盒对40份人血清样品进行测定,结果表明,本方法显示了良好的相关性,其相关系数为0.9115。表明本分析体系稳定可靠,可用于商品化诊断试剂盒的开发和应用。

微孔板化学发光酶免疫分析法分析人血清中游离前列腺特异性抗原

建立了一种定量分析人血清中游离前列腺特异性抗原（f-PSA）的高灵敏度微孑L板化学发光酶免疫分析方法，以碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）为标记酶，4-甲氧基-4-（3″-磷酰氧基苯）-螺旋-（1，2-二氧杂环丁烷-3，2′-金刚烷）（4-methoxy-4-（3″-phosphate-phenyl）-spiro-（1，2-dioxetane-3，2′-adamantane），AMPPD）-ALP高灵敏的化学发光反应为检测体系，通过检测发光强度对人血清中f-PSA进行定量。对几种物理化学参数如温育时间、免疫反应步骤以及检测时间等进行了优化，采用了一步双抗体夹心法，37％恒温静置温育2h，洗涤后加入50μL AMPPD，30～80min内检测。该方法线性范围为0．15～20μg/L，相关系数大于0．998；检出限可达0．01μd/L，批内和批间相对标准偏差（C．V．）均小于7％；回收率在88％～108％之间。对人体血清中共存的6种常见肿瘤标志物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶联反应进行考察，特异性良好。为了验证该方法用于商业试剂盒的可行性，在4℃和37％条件下分别进行了3d，5d，7d的稳定性考察，其线性相关系数仍均大于0．998，相对标准偏差小于6％。对98例实际血样进行测定，并与进口试剂盒（Monobind．USA）作临床比对，相关性良好。这些结果均表明，该分析体系稳定，可靠，可以用于商业化试剂盒的开发，在临床分析人血清中f-PsA的辅助诊断前列腺癌方面具有很高的应用价值。

化学发光酶免疫分析法检测食品中赭曲霉毒素

目的:建立检测食品中赭曲霉毒素(OA)快速灵敏化学发光酶免疫方法。方法:采用棋盘滴定法确定OA-BSA抗原的包被质量浓度、包被量以及一抗和二抗的工作稀释度,建立间接竞争抑制曲线,确定线性范围、检出限和回收率。结果:确定的检测工作条件为:OA-BSA最佳包被质量浓度60ng/mL,抗OA单克隆抗体的最佳工作稀释度1:400,校正曲线线性范围6～400ng/mL,赭曲霉毒素的检出限为0.02ng/mL,50%抑制质量浓度145ng/mL,在100～2000ng/g添加水平的回收率范围为83.6%～105.8%。用所建方法对质控样品进行了分析,检测结果符合率达到100%。结论:所建方法准确、灵敏,适用于食品中OA的筛选。

谷物中赭曲霉毒素A化学发光酶免疫分析法的建立

建立了间接竞争化学发光酶免疫法检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA),该方法IC50为112 pg/mL,检出限是2.47 pg/mL,平均批内和批间变异系数分别为7.03%和14.7%。在大米和小麦样本中添加浓度1.5～6μg/kg的OTA标品,平均回收率在66.97%～97.96%之间,与其他常见真菌毒素未见交叉反应。将该方法应用于30份谷物样本(包括20份大米样本和10份小麦样本)中OTA的检测,检测结果与商品化ELISA试剂盒的相关系数R2=0.942 4。该方法简单、灵敏、快速、准确适用于谷物中OTA的检测。

化学发光酶免疫分析法检测水产品中残留的麻醉剂丁香酚

将丁香酚(Eul)与4-溴丁酸叔丁酯进行衍生化反应,合成了半抗原4-(4-烯丙基-2-甲氧基-苯氧基)-丁酸(Eul-4-Tbl)。通过偶联载体蛋白并免疫动物后获取丁香酚多克隆抗体,建立了丁香酚的间接竞争化学发光酶免疫分析方法(ic-CLEIA)。水产样品经乙腈提取,Oasis PRiME HLB固相萃取小柱净化后用于测定。结果表明,ic-CLEIA的最佳反应条件为:包被原质量浓度为0.125μg/mL,抗体稀释40000倍,抗体反应时间为30 min,药物稀释液为PBS。该方法的半抑制浓度(IC_(50))为1.28μg/L,检测线性范围为0.25~6.43μg/L,检出限(LOD,IC_(10))为0.11μg/L。样品中丁香酚的加标回收率为76.6%~108%,相对标准偏差(RSD)为5.9%~12%,测定结果与液相色谱-串联质谱法具有良好的相关性(r=0.9904),可用于水产品中麻醉剂丁香酚残留的快速测定。

化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附法检测抗-丙型肝炎病毒的对比研究

目的探讨化学发光酶免疫分析法和酶联免疫吸附法（ELISA）检测丙型肝炎病毒（HCV）抗体的效果。方法选取2015年1-12月于该院治疗的150例丙型肝炎患者,空腹抽取血液标本,分离血清后,采用2种方法检测HCV相关抗体的5种丙型肝炎病毒标志物,并对检出率及敏感性进行比较。结果化学发光酶免疫分析法检出阳性率（96.0%）高于ELISA法（91.3%）,差异有统计学意义（P〈0.05）,2种方法的总符合率达94.0%。化学发光酶免疫分析法对AMA-M2抗体检测阳性率为83.3%,3E抗体为81.9%,SP100抗体为43.8%,PML抗体为59.7%,GP210抗体为38.2%;ELISA法检测AMA-M2抗体阳性率为64.2%,3E抗体为44.5%,SP100抗体为24.8%,PML抗体为35.0%,抗GP210抗体为26.3%。2种方法比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 2种方法均能有效检出丙型肝炎患者,化学发光酶免疫分析法检出率更高,但仍存在漏检,应加强实验室管理,尽可能提高诊断率。

用化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法检测丙型肝炎病毒抗体的效果对比

目的:比较用化学发光酶免疫分析法(CLIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的效果。方法:选取2018年4月至2019年4月期间灌南县人民医院收治的70例疑似丙型病毒性肝炎(简称丙型肝炎)患者作为研究对象。在这些患者入院后,均采用CLIA与ELISA检测其血液标本中抗-HCV的浓度。然后比较用这两种方法对这些患者进行血清抗-HCV检测的结果。结果:用CLIA对这些患者的血清标本进行抗-HCV检测的阳性率高于用ELISA对其血清标本进行抗-HCV检测的阳性率,P<0.05。用CLIA对这些患者的血清标本进行抗-HCV检测的准确率、灵敏度及特异度均高于用ELISA对其血清标本进行抗-HCV检测的准确率、灵敏度及特异度,P<0.05。结论:与用ELISA检测抗-HCV相比,用CLIA检测抗-HCV的准确率、灵敏度、特异度均更高。