基于化学发光磁酶免疫技术建立粮食中铅的自动化检测方法

利用抗原抗体高特异性,建立一种自动化的化学发光磁酶免疫方法,快速定量检测粮食中铅元素的含量。通过优化前处理条件和化学发光磁酶免疫分析方法的反应条件,实现了大米、小麦、玉米等粮食样品中铅的自动测定。该方法的检测范围为0.05~0.71 mg/kg,大米和玉米中检出限为0.02 mg/kg,小麦中检出限为0.01 mg/kg,回收率范围89.2%~113.6%,相对标准偏差均小于10%。基于化学发光免疫平台,本方法可在30分钟内完成8个样品的同时自动化检测,有效减少人为误差,提高检测准确性和检测效率,在粮食中铅的快速定量检测方面具有良好的应用前景。

微粒子化学发光酶免疫法与放免法测定促甲状腺激素的临床价值比较

目的 为了比较微粒子化学发光酶免疫法 (chemiluminescentimmunoassay ,CLIA)及放射免疫法(radiomunoassay ,RIA)用于评价甲状腺功能的临床价值。 方法 分别采用这两种方法对 5 0例正常人 (对照组 )、5 0例甲状腺性甲亢患者 (甲亢组 )及 5 0例原发性甲减患者 (甲减组 )进行促甲状腺激素 (thyroidstimulatinghormone,TSH)、FT3 、FT4、TT3 、TT4等测定。结果 用CLIA测定sTSH甲亢患者与对照组比较具显著性差异 ,而用RIA测TSH则甲亢与对照组没有差别。对甲减患者 ,sTSH、TSH与对照组比较均具显著性差异。

A型肉毒神经毒素单克隆抗体的制备与化学发光酶免疫检测技术的应用

从A型肉毒神经毒素杂交瘤细胞中提取单抗基因并在哺乳动物系统中表达纯化,制备A型肉毒神经毒素单克隆抗体。应用化学发光酶免疫分析技术(CLEIA),建立A型肉毒神经毒素快速检测方法。通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)检测杂交瘤细胞序列,以含有单抗基因的质粒为模板进行亚克隆,分别构建轻重链的表达质粒并转到JM108克隆菌株中,后通过质粒大抽试剂盒提取转染级质粒,再将质粒转染到哺乳动物细胞CHO中进行表达,最后亲和层析Protein G柱纯化抗体。利用双抗体夹心原理,优化出CLEIA法最佳检测方案。建立A型肉毒神经毒素CLEIA检测方法,并对该分析方法的检测限、专属性、耐用性逐一进行验证。制备了A型肉毒神经毒素单克隆抗体且建立了A型肉毒神经毒素快速检出方法,检测限为0.156 ng/mL;A型肉毒神经毒素与其他型别无交叉反应且其在不同溶剂介质中检测限不受影响,显示出良好的特异性和耐用性。应用该方法证明了100 U衡力^(Ⓡ)注射用A型肉毒毒素成品在0.02 mol/L,pH=7.8磷酸缓冲液中复溶检测效果最佳。本研究制备的A型肉毒神经毒素单克隆抗体和建立的A型肉毒神经毒素CLEIA检测方法具有良好的实用性,为A型肉毒神经毒素的临床检测及质控分析提供另一种思路和方法。

化学发光法检测梅毒抗体的实验评价

目的探讨微粒子化学发光法检测梅毒抗体(TP-CMIA)的效果,以及同ELISA,TPHA和TPPA法的可比性。方法使用微粒子化学发光法、ELISA法、TPHA和TPPA法检测梅毒螺旋体抗体血清盘标本。结果CMIA,ELISA,TPPA和TPHA法检测梅毒抗体的敏感性分别为98.08%,96.15%,96.15%和92.31%,特异性均为100%。TP-CMIA法对弱阳性标本显示出较好的检出效果(8例弱阳性标本检出7例)。结论TP-CMIA法具有较高的敏感性和特异性,同其他方法具有较好的可比性,可用作梅毒抗体的筛查之用。

化学发光免疫分析方法检测粮食谷物中赭曲霉毒素A残留

目的建立粮食谷物中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)残留检测的化学发光免疫分析方法。方法人工改造OTA半抗原、制备包被原和多克隆抗体工作液,优化检测步骤,验证各项评价指标,比较化学发光免疫分析方法和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)的实际样本检测结果的一致性,以此来实现化学发光免疫分析方法的建立。结果 50%抑制浓度(IC_(50))为0.278μg/L;OTA的最低检出限为5.0μg/kg,样本添加回收率在65.4%到115.8%之间,批内、批间相对标准偏差<15%。同时,通过对实际样本检测,证明化学发光免疫分析方法具有显著的准确度和可靠性。结论基于化学发光免疫分析方法能够实现粮食作物中的OTA残留的快速检测,灵敏度高、成本低、时间短,为食品中霉菌毒素残留的快速检测提供了新的技术参考。

化学发光酶免疫分析技术与实时荧光PCR法检测肠道病毒71型感染的研究

手足口病（hand-foot-mouth disease,HFMD）是严重威胁儿童健康的全球性传染病,引起该病的病原主要是柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）和肠道病毒71型（EV71）。其中EV71感染致残及病死率较高。自1969年起全世界很多国家和地区相继出现了EV71的流行报道。1987年,中国大陆首次发现EV71感染,1995年国内首次分离出EV71病毒。

定量检测人甲状腺过氧化物酶抗体化学发光酶免疫分析法的临床应用

目的应用人甲状腺过氧化物酶抗体（hTPOAb）的化学发光酶免疫分析（CLEIA）试剂盒，检测正常人及各类甲状腺疾病患者，探讨该试剂盒在临床应用中的价值。方法用该试剂盒共测定333例样品血清中的hTPOAb，包括正常人133名，各类甲状腺疾病患者200例，其中桥本甲状腺炎（HT）94例，Graves病68例，结节性甲状腺肿19例，亚急性甲状腺炎10例，单纯性甲状腺肿9例。结果确立本试剂盒hTPOAb阳性切限值为3．22IU／ml，hTPOAb浓度以中位数表示，分别为HT5．48IU／ml，阳性率为91．50％；Graves病1．88IU／ml，阳性率为29．40％；结节性甲状腺肿1．83IU／ml，阳性率为10．50％，亚急性甲状腺炎2．54IU／ml，阳性率为20．00％；单纯性甲状腺肿2．21IU／ml，阳性率为0。HT患者血清hTPOAb阳性率高于其他患者（X2=67．22，60．13，35．49，49．89，P均〈0．01）。结论该定量检测hTPOAb的CLEIA试剂盒在HT中有很高的阳性率，可作为HT有效的诊断手段。

女性乳腺癌患者血清PSA含量测定

目的 :探讨女性性乳腺癌患者血清 PSA (前列腺特异性抗原 )的含量及其临床意义。方法 :应用微粒子化学发光酶免疫技术测定正常对照组、良性对照组及乳腺癌患者术前术后血清 PSA的含量。结果 :女性乳腺癌患者术前血清 PSA的含量明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,而术后明显下降 ,良性对照组比较差异无显著意义 (P>0 .0 5 )。结论 :检测女性乳腺肿瘤疾病患者血清 PSA的含量 ,有助于乳腺癌的诊断及治疗观察。

颅脑损伤后脑脊液和血清IL-8的变化及意义

目的 研究颅脑损伤后不同阶段脑脊液和血清中IL 8的变化 ,探讨IL 8水平与继发性颅脑损伤和预后的关系。方法 采用化学发光酶免疫技术测定 5 0例患者在第 1天、3天、7天、14天时脑脊液和血清中IL 8的含量。结果 重型颅脑损伤组中IL 8的含量组明显高于轻中型颅脑损伤组 ,而重型颅脑损伤中脑脊液IL 8的含量明显高于其血清中的含量。在各组患者脑脊液和血清中IL 8的含量在伤后 1天达到高峰 ,3天之后逐渐下降 ,7天后又开始有所回升。结论 急性颅脑损伤后脑脊液和血清中早期IL 8的水平与颅脑损伤的严重程度密切相关 ,后期IL 8的升高可能参与了颅脑损伤的修复过程。

麻醉与围术期对cTnI的影响

目的 :本文旨在观察静吸复合全身麻醉下手术对患者血清肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)浓度的影响。方法 :应用增强化学发光酶免疫分析技术 ,在麻醉前、麻醉后 3h、6h ,联合检测cTnI ,CK—MB和Mb。结果 :cTnI的浓度在 3次检测中均在正常范围 ;而CK—MB、Mb的浓度麻醉后 3h、6h均超过了正常范围 ,与麻醉前比较有非常显著差异 (P <0 0 1)。结论 :麻醉与围手术期 ,cTnI诊断心肌损伤更准确、更具有特异性、更有助于避免CK—MB。