氯霉素化学发光酶联免疫检测方法的建立

在常规酶联免疫法(ELISA)的基础上,用辣根过氧化物酶标记氯霉素与牛血清白蛋白偶联后免疫小鼠制得的单克隆抗体,并优化抗体工作浓度、反应时间等试验参数,建立了一种简便、快速、准确的氯霉素(CAP)残留一步式化学发光酶联免疫检测方法。结果表明:该方法最佳检测范围为20～1620 pg/mL,IC50值达59.911 pg/mL,检测限为9.3 pg/g,可检出国际规定的CAP残留标准限量值以下的残留量。与常规ELISA检测方法相比,不仅提高了检测限和灵敏度,而且反应时间缩短了60 min。采用一步式化学发光酶联免疫检测氯霉素残留,可以大幅度缩减检测时间,更符合快速检测的要求。

食品中磺胺类药物化学发光酶联免疫检测试剂盒的初步研究

在常规酶联免疫法的基础上,将磺胺类母核与牛血清白蛋白合成免疫抗原后免疫小鼠制得磺胺类单克隆抗体,并进一步优化抗体工作浓度、反应时间等实验参数,建立了一种简便、快速、精确的磺胺类残留一步式化学发光酶联免疫检测方法.结果表明该方法最佳检测范围为1.0～81.0 ng/mL,检测IC50达3.047 ng/mL,对猪肉的最低检测限为0.74 ng/g,可检出国际规定的SAs残留标准底限值以下的残留量.与常规ELISA方法相比,检测限和灵敏度基本一致,但反应时间缩短了60 min.证明采用一步式化学发光酶联免疫检测磺胺类残留可以大幅度缩减检测时间,符合快速检测的要求.

全自动磁微粒化学发光法快速筛查呋喃类药物残留

文章通过开发硝基呋喃类药物磁微粒化学发光试剂盒,建立了以磁微粒作为固相载体、化学发光作为检测信号的硝基呋喃类药物残留快速检测方法。结合全自动化学发光仪,用磁微粒化学发光酶联免疫法(MCLIA)同时对4种硝基呋喃类药物(呋喃西林代谢物(SEM)、呋喃唑酮代谢物(AOZ)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)和呋喃妥因代谢物(AHD))在不同来源的鸡肉样、鱼样中的残留量进行定量检测,并与基于超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱联用仪的国家标准方法的检测结果进行了对比。共检测鱼肉、猪肉、鸡肉和贝类样品等共计78个样本,与国家标准方法检测结果的符合率在98%以上。结果表明全自动微粒化学发光酶联免疫法具备有自动化程度高,多项目同时检测,检测效率高,检测结果准确可靠等优势,可用于硝基呋喃类药物残留的快速筛查。

两种免疫分析方法检测乙肝病毒血清标志物的差异分析

目的:比较酶联免疫吸附试验分析方法(ELISA)和化学发光免疫法(CLIA)检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb)的差异。方法:采用ELISA法和CLIA法对2011年1～12月在我院传染病门诊首次就诊300例患者的血清样本进行平行检测乙型肝炎病毒血清标志物,分析两种免疫分析方法灵敏度和阳性结果符合性。结果:CLIA法检测血清HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb检测的灵敏度分别为0.2ng/ml、10mIU/ml、0.1Ncu/ml、1Ncu/ml和0.5Ncu/ml,均高于ELISA法。CLIA法和ELISA法测定300份血样HB-sAg、HBsAb、HBeAg和HBcAb结果差异无统计学意义(P>0.05),CLIA法测定HBeAb差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法相对于CLIA法测定HBsAg、HBsAb、HBeAg和HBcAb的阳性符合率分别为94.17%、96.23%、97.20%和92.42%,而HBeAb阳性符合率仅为65.52%。结论:采用CLIA检测乙型肝炎血清标志物的灵敏度和符合率优于ELISA法,并且可以直接对血清标志物表达进行定量,值得临床推广应用。

检测牛奶中肠出血性大肠杆菌O157:H7的双抗夹心化学酶联免疫方法的建立

为了检测牛奶中肠出血性大肠杆菌(enterohemrrhagic Escherichia coil, EHEC)O157:H7污染,采用兔多抗作为捕捉抗体与一株O157:H7单克隆抗体作为检测抗体进行配对,构建了针对EHEC O157:H7的双抗夹心化学发光酶联免疫检测方法。该方法最低检测限可达到2.5×10~4 CFU/mL,优于ELISA检测方法,且特异性良好,与其他大肠杆菌、沙门菌、李斯特菌、阪崎肠杆菌等均无交叉反应。在用于牛奶样本的模拟添加检测中,较ELISA方法可缩短前增菌处理时间。本研究为牛奶中O157:H7污染检测提供了一种准确度高、特异性强的检测手段。

Grave's病患者血清中IFN-γ、TNF-α和IL-6的变化

目的研究细胞因子在Grave's病发病机制的作用。方法Grave's病未治疗组、临床缓解组各40例,健康体检者39例,用酶联免疫试验法测定血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平,用化学发光免疫分析法测定各组的FT3、FT4和TSH的水平。结果Grave's病未治疗组患者血清中TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平均明显高于健康对照组(P<0.01)。缓解组患者血清中TNF-a、IFN-γ的水平与未治疗组的相比降低均不明显(P>0.05),且均明显高于对照组(P<0.01);缓解组患者血清中IL-6的水平与未治疗组的相比明显降低(P<0.01),且与对照组相比无明显变化(P>0.05)。结论Grave's病患者血清TNF-α、IFN-γ和IL-6发生变化,这些因子可能共同参与Grave's病的发病过程,但是TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平不能很好地反映Grave's病病情的严重程度。

False Human Immunodeficiency Virus Test Results Associated with Rheumatoid Factors in Rheumatoid Arthritis

Objective To investigate if immunological factors associated with rheumatoid arthritis(RA) affect the result of human immunodeficiency virus(HIV) screening by electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA) and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Methods 100 RA cases were enrolled from January 2012 to February 2013 into this study. HIV screening was conducted with ECLIA detecting both HIV-1 p24 antigen, HIV-1 and HIV-2 antibodies, with ELISA and colloidal gold method detecting HIV-1 and HIV-2 antibodies. The samples producing positive results were submitted to the Center for Disease Control for confirmation using Western blotting method. The antibody titers of rheumatoid factors(RF) including RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG were analyzed by ELISA. Results The HIV positive-rate determined by ECLIA was significantly higher than that by ELISA and colloidal gold method(P<0.01). The false-positive rate of HIV screening was associated with antibody titers of RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG in RA(P<0.01). Conclusion Immunological factors, including RF and anti-CCP antibody, may influence the screening of HIV by ECLIA, producing false-positive result.

两种梅毒检验方法检测梅毒螺旋体准确率比较

目的：比较两种梅毒检测方法检测梅毒螺旋体的准确率。方法：8953例体检者均应用化学发光法（CLIA）与酶联免疫吸附试验；：k（ELISA）检测梅毒螺旋体，以苍白密螺旋体颗粒凝集试验（TPPA法）为判断标准。结果：ELISA法检出梅毒螺旋体阳性率为1．20％，CLIA法检出梅毒螺旋体阳性率为1．61％，TPPA法检出梅毒螺旋体阳性率为1．14％；ELISA法检出梅毒螺旋体阳性率高于TPPAfL-（P〈0．05），CLIA法检出梅毒螺旋体阳性率与TPPA法比较无显著性差异（P〉0．05），CLIA法检出梅毒螺旋体阳性率高于ELISA法（P〈0．05）。结论：应用CLIA法检出梅毒螺旋体的准确率较ELISA法高，适用于临床。