一种改进的基因合成方法

[目的]建立一种简便、廉价、准确的基因合成方法。[方法]对现有的重叠延伸合成方法进行了改进,提出一种IOEP(Improvedoverlap extension PCR method)法。[结果]拆分的单链寡核苷酸长度为60 nt左右,重叠区碱基数13～17 bp,Tm值为40～50℃。IOEP法具体步骤如下:把拆分的寡核苷酸组装成500 bp左右的中间片段,再将中间片段拼接成全长基因。利用IOEP法合成了10条基因,其平均化学合成成本率为1.291,平均错误率为1.031‰,优于其他合成方法。[结论]IOEP法是一种具有高准确率、低成本、重复性好的基因合成方法。