我国近代化学组织团体的创立及思考

受近代西方国家化学组织团体的影响，中国留学生于20世纪初期开始创建我国的化学组织团体，促进了中国化学学科的体制化发展。介绍了我国近代化学组织团体创立的背景既有外部因素又有内部因素、我国近代化学组织团体的创立及影响以及对此的一些思考。

光化学组织黏附技术修复兔眼睑创口的实验研究

目的探讨光化学组织黏附技术(PTB)在修复兔眼睑创口中的应用价值。方法在兔眼上睑皮肤做横行、纵行和斜行(45°)皮肤全层切口,分别采用PTB技术(PTB组)和缝合(缝合组)封闭创口。PTB组照射剂量分别为25、50和100 J/cm2,辐射度均为0.25 W/cm2。以非处理和激光照射(100 J/cm2)创口作为对照组。分别测定泄露压和皮肤抗张力,观察术后第1、3和7日创口周围真皮内炎症细胞浸润情况。结果 PTB组各亚组(25、50和100 J/cm2,0.25 W/cm2)泄露压与缝合组的差异均无统计学意义(P>0.05),其各亚组间的差异亦无统计学意义(P>0.05);术后1周内,PTB组创口皮肤抗张力明显高于对照组,而在1周后,各组间皮肤抗张力的差异均无统计学意义(P>0.05)。与缝合组比较,PTB组操作时间明显缩短(P<0.05);术后第1日,PTB组创口周围真皮内炎症细胞浸润程度较轻(P<0.05)。结论 PTB技术在修复眼睑创口的应用中可达到与缝合相当的抗张力效果,且具有操作更简便和术后炎症反应轻微的优点。

全自动免疫组织化学染色与手工染色在胃肠道肿瘤患者中的应用价值比较

目的比较全自动免疫组织化学染色与手工染色在胃肠道肿瘤患者中的应用价值。方法选取2022年1月至12月宝鸡市中医医院收治的300例胃肠道肿瘤患者为研究对象。所有患者各采集病灶组织2份,分别采用全自动免疫组化仪染色(自动组)和手工染色(手工组)。比较不同染色方式的染色质量、切片背景着色、边缘着色发生率、阳性细胞检出率、染色时间及染色方式满意度。结果自动组的染色质量优良率高于手工组,差异具有统计学意义(P<0.05)。自动组的切片背景着色、边缘着色发生率低于手工组,阳性细胞检出率高于手工组,差异具有统计学意义(P<0.05)。自动组的人力工作时间、步骤完成时间短于手工组,差异具有统计学意义(P<0.05)。自动组的显色情况、染色结果、诊断结果及应用价值满意度评分高于手工组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论全自动免疫组织化学染色在胃肠道肿瘤患者中应用的价值优于手工染色,其可提高染色质量、阳性细胞检出率、染色效率与染色满意度。

犬髓外浆细胞瘤的组织病理学诊断和免疫组织化学分析

髓外浆细胞瘤(EMP)在犬中属于相对罕见的肿瘤,为了明确犬EMP的组织病理学和免疫标志物表达特征,本试验采用苏木精-伊红(H. E.)染色和刚果红染色法对患犬的皮肤肿物进行组织病理学诊断,进一步使用EMP免疫标志物配对盒基因5(PAX5)、白细胞分化抗原20(CD20)、白细胞分化抗原79a(CD79a)、多发性骨髓瘤基因1(MUM1)和犬免疫球蛋白G(Canine IgG)进行免疫组织化学(IHC)染色,并总结免疫标志物表达特征。结果显示,2例病例的肿物均无包膜结构,并与周围组织边界清晰,肿瘤细胞呈浆细胞样或浆母细胞样特征,病例2肿物内见淀粉样沉积。病例1肿瘤细胞免疫标志物PAX5、CD20和MUM1呈阴性,CD79a和Canine IgG呈阳性;病例2肿瘤细胞免疫标志物PAX5呈阴性,CD20、CD79a、MUM1和Canine IgG呈阳性。结果表明,通过组织病理学检查结合IHC染色结果,确诊2例病例均为犬皮肤型EMP。本试验为犬EMP的精确诊断提供重要的病理学依据,具有重要的参考价值。

4例犬恶性黑色素瘤病理学和PNL-2免疫组织化学染色检查

为了对4例疑似犬肿瘤的临床病例进行确诊,本文对临床送检的4例疑似犬肿瘤的肿物样本进行组织切片制作,经苏木精-伊红(H.E.)染色后,镜下可见增生的细胞排列呈束状、片状、巢状和螺纹状等,细胞呈梭形或多角形,部分细胞胞浆内含有黑色素颗粒,符合黑色素细胞肿瘤的特征;为了进一步观察细胞形态并对肿物进行确诊,使用黑色素瘤相关抗原(PNL-2)对肿瘤细胞进行免疫组织化学(IHC)染色,并用二氨基联苯胺(DAB)和3-氨基-9-乙基卡唑(AEC)显色液对其显色,结果均为恶性黑色素瘤(MM)。本试验通过对肿物的细胞形态学特征和IHC染色结果综合分析,将4例病例诊断为MM。试验结果不仅为犬MM的病理诊断提供参考,还为比较医学中MM的确诊提供参考依据。

淋巴瘤免疫组织化学标志物的合理应用

对多数病理医生尤其是初学者而言,淋巴瘤病理诊断较为困难。主要有两方面原因:(1)淋巴瘤发病率低,在所有恶性肿瘤中排名第10位[1],世界范围内我国淋巴瘤发病率远低于美国和其他发达国家[2],因此在一般非肿瘤专科医院的病理医生的日常工作中并不常见。(2)与多数实体肿瘤单纯形态观察即可诊断不同,淋巴瘤诊断需结合形态与免疫表型且淋巴瘤分类复杂[3],初学者难于掌握。

US-FNAC结合CT、CgA和TG免疫组织化学染色在甲状腺髓样癌诊断中的应用

目的探讨超声引导下细针穿刺细胞学(ultrasound-guided fine-needle aspiration cytology,US-FNAC)联合降钙素(calcitonin,CT)、嗜铬素A(chromogranin A,Cg A)、甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)诊断甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)的应用价值。方法对7例US-FNAC诊断且术后组织病理学确诊的MTC临床资料和超声特点、细胞病理学特征进行综合分析。细针穿刺标本采用常规涂片1~2张自然风干后刘氏染色液快速染色,现场进行细胞病理学评判,确保取得满意的细胞量,同时将剩余标本注入液基细胞保存液中保存,采用液基薄层制片,HE染色及CT、CgA和Tg免疫组织化学染色。结果7例MTC细胞均中等量到大量,均有散在突出的大细胞、双核细胞、浆样细胞或核偏位不规则细胞;6例伴梭形细胞,细胞病理学表现与MTC细胞学诊断标准基本相符,CT、CgA胞质均弥漫强阳性表达,Tg阴性,细胞病理学诊断为MTC。结论US-FNAC技术可提高甲状腺结节细针穿刺标本满意度,结合液基薄层制片与CT、CgA免疫组织化学染色可提高MTC术前诊断准确性,对MTC治疗具有重大的临床意义。

基于数据挖掘及免疫组织化学技术分析EPHA5在肺腺癌中的表达

目的探索促红细胞生成素产生型人肝细胞受体A5(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A5,EPHA5)在肺腺癌中的表达。方法通过网络数据库获得EPHA5在不同肿瘤中的变异情况,构建EPHA5蛋白互作网络图,分析EPHA5在肺腺癌中的预后情况。收集肺腺癌患者的手术标本及临床资料,采用免疫组织化学方法检测EPHA5的表达情况,分析肺腺癌中EPHA5表达与患者临床特征的相关性。结果EPHA5在肺腺癌中的突变频率最高,以错义突变为主。除EPH家族的配体之外,EPHA5与RhoA、ADAM10蛋白密切相关。EPHA5的高表达与肺腺癌患者的总生存时间和首次进展时间相关。EPHA5在肺腺癌组织中表达上调,与患者淋巴结转移、分化程度、TNM分期显著相关。结论EPHA5在肺腺癌组织中高表达,可以作为预测肺腺癌预后的一个因素。

术中快速与术后常规免疫组织化学染色效果比较

目的:探讨术中冷冻切片快速免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术在术中快速病理诊断中的应用效果。方法:对17例术中常见送检的乳腺、肺、甲状腺病变标本应用术中冷冻切片快速免疫组织化学技术检测广谱细胞角蛋白(Cytokeratin Pan,CKpan)、细胞角蛋白5/6(Cytokeratin 5/6,CK5/6)、细胞角蛋白19(Cytokeratin 19,CK19)、甲状腺转录因子-1(thyriod transcription factor-1,TTF-1)和P63蛋白的表达,并与术后常规免疫组织化学染色效果进行比较。结果:术中冷冻切片快速IHC与术后常规IHC对CKpan、CK5/6、CK19和TTF-1蛋白的染色部位一致,染色强度相似。结论:术中快速免疫组织化学技术对常见阳性标志物的染色效果与常规免疫组织化学技术接近。

“免疫组织化学与技术”课程教学改革研究

随着科技的进步,药学研究的深入发展,免疫组织化学与技术作为揭示生物体内蛋白质、酶及其他生物分子分布、定位与功能的重要手段,其重要性日益凸显。然而,传统的免疫组织化学与技术课程教学往往侧重于理论知识的传授,忽视了对学生实践能力、创新思维和思想政治觉悟的培养,难以满足当前科研和药学工作的需求。因此,对免疫组织化学与技术课程进行教学改革研究,是一个具有深远意义的课题,旨在提升教学质量,培养具有扎实理论基础和卓越实践技能的高素质药学专业人才。本文就免疫组织化学与技术课程教学改革研究内容进行几点阐述。

联合p16、Ki-67免疫组织化学染色在宫颈上皮内瘤变分级诊断中的应用效果观察

[目的]探究与分析联合应用p16、Ki-67免疫组织化学染色对宫颈上皮内瘤变(CIN)分级诊断的影响.[方法]回顾性分析自2019年3月至2021年11月间收治的接受宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)且检查结果异常的60例患者的临床资料.全部患者按照苏木精-伊红染色法(HE)结果分为慢性宫颈炎组(n=19)、CINⅠ组(n=15)、CINⅡ组(n=12)、CINⅢ组(n=10)、宫颈癌组(n=4),全部患者均进行了宫颈阴道镜活检、人乳头瘤病毒(HPV)分型检测,并配合采用P16、Ki-67免疫组织化学染色的半定量评分,以判断患者宫颈病变程度.[结果]随着宫颈CIN病变程度的升高,CINⅢ组分别与CINⅠ组、CINⅡ组相比,CINⅡ组与CINⅠ组相比,P16表达阳性程度及Ki-67表达阳性程度升高,差异有统计学意义(P<0.05).慢性宫颈炎组P16、Ki-67免疫组织化学结合半定量评分与HE染色CIN分级诊断结果相符,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组诊断结果相符率为94.59%,差异具有统计学意义(P<0.05).P16呈阳性表达时与HPV感染呈正相关(P<0.05).HPV-16、HPV-18、HPV-35、HPV-39、HPV-51在P16表达阳性与阴性方面差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]CIN分级与P16、Ki-67的表达呈正相关,且P16与患者HPV感染有密切的关系.

两栖植物香附子的解剖结构和组织化学研究

以分布在三峡水库消落区和江汉平原河漫滩香附子营养器官为试验材料,采用解剖镜下切片法、组织化学研究方法、光学和荧光显微镜下观察拍照记录试验结果,研究其叶、直立茎、根状茎、块茎和不定根适应两栖环境的解剖结构与组织化学特征。结果表明:1)香附子具有适应两栖环境的气腔和质外体屏障等典型结构特征,其中气腔包含根、根状茎及叶的溶生性通气组织和茎的裂生性通气组织;质外体屏障包括内皮层、外皮层、栓质化中柱和维管束鞘细胞等。2)香附子的不定根和茎具有栓质化中柱和维管束;叶片和茎的花环结构由内侧维管束鞘、中间维管束鞘和薄壁细胞维管束鞘3层组成。3)香附子的质外体屏障可能有助于香附子在淹没缺氧下保持氧气流通,同时控制水、离子与环境交换,气腔有利于保存和输送有氧呼吸所必需的氧气。香附子适应淹没-陆生两栖转换环境的结构特征表明其是长江流域生态恢复的重要植物资源。

H3.3G34W、p63及SATB2免疫组织化学染色联合应用对骨巨细胞瘤的诊断价值

目的探讨H3.3G34W、p63及SATB2在骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCTB)中的表达情况及其联合应用对GCTB的诊断作用和价值。方法收集西安交通大学附属红会医院病理科2020年至2022年诊断的54例GCTB、83例非骨巨细胞瘤(non-giant cell tumor of bone,NGCTB)(包含14例动脉瘤样骨囊肿、16例软骨母细胞瘤和53例非骨化性纤维瘤)患者的样本和病历资料,采用免疫组织化学EliVision法检测H3.3G34W、p63及SATB2的表达情况。通过χ^(2)检验判断H3.3G34W、p63及SATB2的阳性率在各组间是否存在统计学差异;通过Logistic回归分析建立包括H3.3G34W、p63及SATB2的联合诊断模型,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析评价模型的诊断价值。结果H3.3G34W、p63及SATB2在GCTB组中阳性率分别为81.5%、90.7%、92.6%;在NGCTB组中阳性率分别为2.4%、28.9%、62.7%。与NGCTB组相比,GCTB组患者年龄显著较大[(41.222±14.849)vs.(16.566±9.439);P<0.001],女性比男性患病率更高(51.9%vs.48.1%,P<0.001)。与NGCTB组相比,GCTB组中H3.3G34W(81.5%vs.2.4%,P<0.001);p63(90.7%vs.28.9%,P<0.001)和SATB2(92.6%vs.62.7%,P<0.001)的阳性率更高。单因素Logistic回归分析构建单因素预测模型,同时行ROC曲线分析,表明年龄(AUC=92.9%,P<0.001)、性别(AUC=64.5%,P=0.004)、H3.3G34W阳性率(AUC=89.5%,P<0.001)、p63阳性率(AUC=80.9%,P<0.001)、SATB2阳性率(AUC=65.0%,P=0.003)是GCTB诊断的独立预测因素。进一步的多因素Logistic回归分析构建混合预测模型,并行ROC曲线分析,发现混合模型展现出比单因素模型更好的预测价值(AUC=98.4%,P<0.001)。结论H3.3G34W、p63及SATB2是有效诊断GCTB的分子标记物,且三者联合应用更能提高GCTB的诊断预测效能。

非小细胞肺癌BRAF V600E突变免疫组织化学检测中国专家共识

我国肺癌的发病率和病死率均位居恶性肿瘤的首位[1],其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占85%[2]。BRAF是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulated kinases,ERK)信号通路的关键调节因子[3]。NSCLC中BRAF基因突变率为1.5%~5.5%,其中以BRAF V600E突变(Ⅰ类突变)为主,占所有BRAF基因突变的30%~50%[3-5]。BRAF突变NSCLC患者预后不良,且常规的化疗或免疫治疗临床获益有限[6]。国内外临床研究显示:BRAF抑制剂(达拉非尼)与丝裂原活化细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK)抑制剂(曲美替尼)联用,在初治和经治的BRAF V600E突变的晚期NSCLC患者中均显示良好的疗效及生存获益[7-8]。基于此,该联合疗法已获得中国、美国、欧洲、日本等多个国家和地区的批准,用于治疗BRAF V600E突变的转移性NSCLC,并纳入国内外权威指南推荐。

宫颈鳞癌中PD-L1不同抗体免疫组织化学染色的一致性分析

目的探讨宫颈鳞癌中程序性死亡配体1(PD-L1)表达情况及22C3、SP263、E1L3N 3种抗体免疫组化染色的一致性。方法收集解放军总医院两个医学中心89例复发或转移性宫颈鳞癌样本,用PD-L13种克隆号抗体22C3、SP263、E1L3N进行染色,并采用联合阳性评分(CPS)、肿瘤细胞比例评分(TPS)两种评分标准,在不同阈值下对抗体的一致性进行统计学分析。结果宫颈鳞癌在CPS阳性阈值为1时,PD-L1阳性率从高到低依次为22C3(98.31%)、E1L3N(97.75%)、SP263(93.90%);CPS为10时,阳性率依次为E1L3N(76.40%)、22C3(72.88%)、SP263(69.51%);TPS阈值为1%时,阳性率依次为E1L3N(95.51%)、22C3(93.22%)、SP263(92.68%);TPS为10%时,阳性率依次E1L3N(65.17%)、22C3(64.41%)、SP263(60.98%)。当CPS为1或10时、TPS为1%或10%时,E1L3N与22C3、SP263与22C3、SP263与E1L3N均表现较好的一致性(Kappa=0.66~0.98)。无论使用CPS或TPS,组内相关系数检验显示3个克隆号抗体判读数据有高度一致性(ICC分别为0.987、0.984)。结论E1L3N、SP263与22C3之间具有较高的可互换性,为临床检测PD-L1在宫颈癌组织中的表达情况,提供了更多选择。

免疫组织化学室内质控对照组织的新型保存设置方法

目的研究一种新型免疫组织化学阳性对照组织保存和设置方法,将目前在用的免疫组织化学阳性对照设置方法化繁为简。方法以胸腔积液为例,将新鲜胸腔积液离心固定破除红细胞,制成细胞悬液,然后将细胞悬液进行脱水处理,保存在按比例混合的石蜡和液体石蜡制成的膏状物中,灌注在唇膏管中,旋出膏体,涂抹在黏附玻片上,膏体中保存的细胞即可被黏附于玻片上,进行后续的免疫组织化学染色。结果显微镜下观察涂抹的细胞分布均匀,细胞密度适宜,细胞形态完整,在苏木精-伊红(HE)染色中,细胞核与细胞质染色对比清晰,细胞核着苏木精的紫色,细胞质着伊红的淡粉红色,组织细胞,淋巴细胞,间皮细胞等清晰可辨。在免疫组织化学CD68染色中,组织细胞细胞质棕黄色着色。在免疫组织化学Ki-67染色中,增殖期的细胞细胞核棕黄色着色。免疫组织化学染色结果表达清晰,定位准确。结论免疫组织化学阳性组织对照棒涂抹的阳性对照细胞可以代替蜡块切成蜡片制备的阳性对照,免疫组织化学阳性组织对照棒可以应用于免疫组织化学制片过程中阳性对照设置这一步骤中。

多组织包埋在人表皮生长因子受体2免疫组织化学阳性对照制作中的应用

目的探讨多组织包埋在人表皮生长因子受体2(HER2)免疫组织化学阳性对照制作中的应用。方法收集2022年8月至2023年8月满足中山大学孙逸仙纪念医院病理科临床诊断后剩余的乳腺癌组织,通过免疫组织化学定位,选取HER2均一表达0、+、++、+++的组织,进行多组织包埋,制作成阳性对照蜡块。结果每张组织化学片中对照组织中均能HER2表达0、+、++、+++。结论多组织包埋可以很好地应用在HER2免疫组织化学阳性对照制作中。

不同生长年限滇重楼营养器官中皂苷的组织化学定位研究

目的了解滇重楼生长发育过程中结构特征与皂苷积累的关系,为滇重楼合理采收奠定理论基础。方法应用等量的5%香草醛-冰醋酸和高氯酸混合试剂显色的组织化学定位技术对两年生至七年生滇重楼叶和根状茎两个营养器官中的总皂苷进行研究。结果在滇重楼根状茎中,皂苷主要存在于基本组织的薄壁细胞中,而叶中的皂苷主要存在于叶肉组织中;不同生长年限的滇重楼根状茎皂苷含量与其生长年限呈正比关系,而不同年限滇重楼叶中的皂苷含量与生长年限之间的线性关系不明显。结论组织化学方法可作为重楼皂苷类成分高低的评价方法,研究结果符合传统的滇重楼采收选择年限,为滇重楼的正确采收提供提供了实验依据,也为滇重楼利用中选择合理使用部位提供了理论支持。

免疫组织化学特异性抗体诊断浆膜腔积液转移性腺癌与增生性间皮细胞的应用价值

目的探讨免疫组织化学特异性抗体诊断浆膜腔积液转移性腺癌(MA)与增生性间皮细胞的应用价值。方法选取2021年1月至2023年10月广西华银医学检验所病理科浆膜腔积液标本181例,其中,113例有转移性腺癌细胞,68例有增生性间皮细胞。制备细胞石蜡切片,采用免疫组织化学标记法检测抗体绒毛蛋白(Villin)、细胞角蛋白7(CK 7)、上皮特异抗原(Ber-Ep 4)、上皮细胞表面糖蛋白单克隆抗体(MOC-31)、癌胚抗原(CEA)水平,分析上述抗体诊断MA与增生性间皮细胞的应用价值。结果Villin、CK7、Ber-Ep4、MOC-31及CEA鉴别诊断转移性腺癌细胞与增生性间皮细胞的灵敏度分别为54.87%、69.91%、78.76%、93.81%、81.42%,特异度分别为94.12%、92.65%、88.24%、92.65%、92.65%。结论免疫组织化学特异性抗体鉴别诊断浆膜腔积液中转移性腺癌细胞与增生性间皮细胞的准确性高,在细胞病理学诊断中的应用价值较高。