化湿败毒散通过减少胶原交联改善肺纤维化的机制研究

目的:探讨中药化湿败毒散对小鼠肺纤维化的治疗作用及其潜在机制。方法:50只C57BL/6J小鼠随机分成正常组、假手术组、博来霉素组、化湿败毒散组(早干预)、化湿败毒散组(晚干预)5组。用博来霉素气管注射,建立小鼠特发性肺纤维化(IPF)模型。使用RNA-Seq筛选各组基因水平的异同,预测其涉及生物学过程和通路;记录小鼠的体质量变化;检测肺功能(呼吸频率和流量);拍摄肺部CT图像;用双光子荧光显微镜观测肺组织胶原形态;HE染色观察组织病理变化;qPCR检测肺组织中缺氧诱导因子1α(HIF1α)、赖氨酰氧化酶(LOX)、赖氨酰氧化酶样蛋白(LOXL)1~LOXL4以及赖氨酸羟化酶2(PLOD2)的mRNA水平;免疫组化染色评估HIF1α、LOXL2、LOXL3、PLOD2在肺组织中的蛋白表达水平。结果:转录组结果表明化湿败毒散主要影响了胶原蛋白合成、细胞外基质相互作用和炎症反应,其机制可能涉及HIF-1通路;化湿败毒散组(早干预)相比于化湿败毒散组(晚干预)可加速体质量恢复;改善肺部胶原交联,减缓纤维化进程;对呼吸频率和流量恢复具有正向调节作用;同时可降低小鼠肺组织中HIF1α、LOX、LOXL3的基因表达水平(P<0.05,P<0.01);下调HIF1α、LOXL2、LOXL3、PLOD2的蛋白表达水平(P<0.01)。结论:化湿败毒散可降低肺纤维化中的胶原交联水平,减缓肺纤维化进程。