化瘀止痛贴膏调节IL-6/STAT3信号通路对急性软组织损伤大鼠炎症反应的影响

目的探讨化瘀止痛贴膏调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对急性软组织损伤(ASTI)大鼠炎症反应的影响。方法将SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组、精制狗皮膏组。利用机械冲击挫伤法建立ASTI动物模型,建模成功后,各组贴敷相应药物,1次/d,每次给药8 h,连续7 d。对大鼠进行ASTI损伤评分;采用血液流变检测仪检测血液流变学指标;苏木精和伊红(HE)染色法观察大鼠损伤部位肌肉组织病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6、IL-β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测损伤部位肌肉组织中IL-6与STAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6/STAT3信号通路蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组和狗皮膏药组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平降低(均P<0.05);化瘀止痛贴膏高剂量组与精制狗皮膏组大鼠以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀止痛贴膏可能通过下调IL-6/STAT3信号通路缓解ASTI大鼠的炎症反应。

基于Wnt/β-catenin信号通路探究化瘀止痛贴膏对大鼠急性软组织损伤的改善作用

目的 基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路探究化瘀止痛贴膏对大鼠急性软组织损伤的改善作用。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、化瘀止痛贴膏低剂量组(0.16 g/贴)、化瘀止痛贴膏中剂量组(0.32 g/贴)、化瘀止痛贴膏高剂量组(0.64 g/贴)、精制狗皮膏组(1.05 g/贴)、LiCl(Wnt/β-catenin信号通路激活剂)组(15 mg/kg)、化瘀止痛贴膏高剂量+LiCl组(0.64 g/贴+15 mg/kg),每组12只。除对照组外,其他组大鼠均需构建急性软组织损伤模型,建模成功后,进行给药处理,给药1次/d,持续1周。评估大鼠软组织损伤评分变化;HE染色检测大鼠软组织损伤组织病理变化;ELISA法检测大鼠急性软组织损伤组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β含量;qRT-PCR、Western blot分别检测大鼠急性软组织损伤组织中Wnt-16、β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA、蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠软组织损伤组织病理损伤严重,软组织损伤评分、TNF-α、IL-1β含量、Wnt-16、β-catenin、MMP-3、MMP-13、BMP-2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,化瘀止痛贴膏低剂量组、化瘀止痛贴膏中剂量组、化瘀止痛贴膏高剂量组、精制狗皮膏组大鼠软组织损伤组织病理损伤减轻,软组织损伤评分、TNF-α、IL-1β含量、Wnt-16、β-catenin、MMP-3、MMP-13、BMP-2 mRNA及蛋白表达降低,LiCl组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);LiCl减弱了高剂量化瘀止痛贴膏对急性软组织损伤大鼠炎性反应及软组织病理损伤的改善作用。结论 化瘀止痛贴膏可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路改善大鼠急性软组织损伤。