化瘀消癥杀胚中药复方给药血浆的药物成分检测

目的以人工饲养的大鼠为介质,探讨治疗异位妊娠的化瘀消癥杀胚中药复方给药血清的药物成分。方法通过高效液相-质谱联合分析方法(HPLC-MS)对灌服宫外孕复方的SD大鼠血清及空白SD大鼠血清、甲氨喋呤SD大鼠血清、混合标准品溶液进行检测,并进行定性差比分析。结果在灌服化瘀消癥杀胚中药复方后的SD大鼠血清中找到瓜氨酸、ββ’-二甲基丙烯酰阿卡宁、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、苦杏仁苷、芍药苷。而甲氨喋呤组和生理盐水组的含药血清中不含有上述任何一种药物成分。结论 HPLC-MS/MS法检测化瘀消癥杀胚中药复方含药血浆药物成分的实验证实,中药含药血清中含有上述化瘀消癥杀胚的中药成分。这些成分可能是化瘀消癥杀胚中药治疗输卵管妊娠的药效基础。

化瘀消癥杀胚复方含药血清对体外培养输卵管妊娠滋养细胞凋亡的影响

目的:探讨化瘀消癥杀胚复方含药血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:取化瘀消癥杀胚复方含药血清及甲氨喋呤、生理盐水组血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞进行培养,通过蛋白质印迹法(Western Blot)检测与含药血清作用72h后,滋养细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:滋养细胞与含药血清共同作用72h后,可降低Bcl-2蛋白表达量,与对照组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。而Bax蛋白表达量未见有明显变化,两组含药血清与对照组比较,差异均无统计学意义。结论:化瘀消癥杀胚复方可能通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,降低Bcl-2/Bax比值,从而促进凋亡的途径起到治疗输卵管妊娠的作用。

化瘀消癥杀胚复方含药血清对输卵管妊娠滋养细胞ER、PR、MMPs2的影响

目的:以体外培养的输卵管妊娠滋养细胞为载体,探讨化瘀消癥杀胚复方含药血清对输卵管妊娠着床的相关调节因子雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、基质金属蛋白酶2(MMPs2)表达的影响。方法:以化瘀消癥杀胚复方含药血清、甲氨喋呤血清、0.9%氯化钠溶液血清,对培养的人输卵管妊娠滋养细胞进行干预,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测,观察3组含药血清对培养的人输卵管妊娠滋养细胞作用72h后,滋养细胞中ER、PR、MMPs2的表达。结果:化瘀消癥杀胚中药复方组能降低ER、PR的表达,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),能上调MMPs2的表达,与对照组比较,差异无统计学意义;西药组能降低ER、PR的表达,上调MMPs2的表达,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:化瘀消癥杀胚中药复方能从受体水平拮抗雌孕激素,能加速输卵管蜕膜的溶解,导致绒毛组织变性、坏死,从而起到治疗输卵管妊娠的作用。

化瘀消癥杀胚中药对输卵管妊娠滋养细胞凋亡及凋亡通路的影响

目的:探讨化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞凋亡及凋亡通路的影响。方法:(1)Hoechst染色法观察中药复方对输卵管妊娠滋养细胞形态学的影响;(2)透射电镜观察中药复方对输卵管妊娠滋养细胞超微结构的影响;(3)流式细胞术检测药物干预后输卵管妊娠滋养细胞的凋亡率;(4)采用Wester blot法及QT-PCR法检测Bax、Fasl、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9凋亡相关蛋白及基因的表达。结果:与阴性对照组比较,中药中、高剂量组凋亡率明显增加(P<0.01);中药高剂量组和中药+甲氨蝶呤组Bax、Fasl、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达增加(P<0.01,P<0.05),中药中剂量组FasL、Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05),中药低剂量组Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达增加(P<0.01,P<0.05),且中药高剂量组、中药+甲氨蝶呤组还可增加FasL、Caspase-3、Caspase-8基因表达(P<0.01,P<0.05)。结论:化瘀消癥杀胚中药复方可能通过诱导Caspase介导的死亡受体及线粒体凋亡通路而促进滋养细胞凋亡。