化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗乙型肝炎肝硬化结节的临床观察

目的:观察化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗乙型肝炎肝硬化结节(脾虚血瘀兼湿热证)的有效性及安全性。方法:将82例符合脾虚血瘀兼湿热证的乙型肝炎肝硬化结节患者随机分为治疗组和对照组,每组41例。对照组患者采用基础治疗(保肝、抗病毒等);治疗组患者在对照组治疗的基础上加用中药(化瘀解毒健脾方)内服及外敷(穴位贴敷)治疗,疗程6个月。观察治疗前后患者肝脏结节的MR影像学表现、中医症状评分、肝功能、T细胞亚群等指标的变化。结果:治疗后,治疗组及对照组患者的有效加稳定率分别为88.6%、68.03%,差异有统计学意义(χ^2=4.471,P=0.034),两组患者肝硬化结节最大直径治疗后均无明显变化。治疗后两组患者的CD4^+及CD8^+T淋巴细胞水平均较前提高,且治疗组患者改善更明显(P<0.05)。治疗后两组患者的TBil、ALT及AST水平下降,Alb水平较前上升(P<0.05),除ALT、AST两项指标外,治疗组患者肝功能改善情况更佳(P<0.05)。两组患者治疗后4项中医症状均较前下降;除胁肋疼痛治疗组患者无明显优势外(P>0.05),余3项均优于对照组(P<0.05)。治疗组及对照组患者总有效率分别为85.70%、65.90%,治疗组患者疗效更显著(χ^2=3.972,P=0.045)。结论:化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗能延缓或部分逆转乙型肝炎肝硬化结节的进展,改善中医症状和肝功能,调节患者免疫功能,无明显不良反应。

健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗克罗恩病患者疗效及对肠道菌群的影响

目的探讨健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗对克罗恩病患者疗效及肠道菌群的影响。方法选取94例克罗恩病患者,使用随机数字表法分成观察组与对照组各47例。对照组给予英夫利昔单抗。在此基础上,观察组口服健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗。比较治疗前后两组患者主要中医证候评分、粪便中肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、肠杆菌)数量、血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平。结果所有患者均顺利完成该次研究,无脱落病例。观察组总有效率95.74%(45/47),高于对照组[82.98%(39/47)],差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组腹痛拒按、腹泻急迫、腹胀、神疲乏力等证候积分降低,而且观察组积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组血清TNF-α、CRP水平降低,而且观察组水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组双歧杆菌、乳酸杆菌数量升高,肠球菌、肠杆菌数量降低,而且观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量高于对照组,肠球菌、肠杆菌数量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗应用于克罗恩病整体疗效确切,促进腹痛等症状的缓解,减轻肠黏膜炎症状态,其作用可能与其显著纠正肠道菌群失衡、改善肠黏膜屏障功能有关。

健脾化瘀解毒方调控能量代谢抑制肺癌细胞侵袭转移的研究

目的:研究健脾化瘀解毒方的含药血清(JHJRMS)对人肺癌细胞能量代谢的影响。方法:TCGA数据库分析己糖激酶2(HK2)与肺癌患者预后之间的相关性;划痕实验用来检测JHJRMS对肺癌细胞侵袭转移的影响。RT-PCR检测JHJRMS对肺癌细胞中miR-143-3p表达水平的影响。数据库预测miR-143-3p与HK2蛋白的相关性。Western blot检测JHJRMS对肺癌细胞HK2、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白的影响。结果:TCGA数据库结果显示,HK2低表达,肺癌患者具有更好的预后。划痕实验结果显示JHJRMS能显著抑制肺癌细胞的侵袭转移。RT-PCR结果显示JHJRMS可明显增加肺癌细胞中miR-143-3p的表达水平。数据库结果提示,miR-143-3p和蛋白HK2的mRNA存在多处互补链,miR-143-3p可能靶向调控HK2。Western blot结果显示JHJRMS处理肺癌细胞后,细胞中的HK2、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低。结论:JHJRMS能明显抑制人肺癌A549细胞的侵袭转移,其机制可能是通过miR-143-3p调控HK2的表达水平直接影响细胞的能量代谢过程。

健脾化瘀解毒方治疗晚期大肠癌的临床研究

目的:观察健脾化瘀解毒方治疗晚期大肠癌的临床疗效。方法:晚期大肠癌患者80例,最终完成76例,其中试验组(健脾化瘀解毒方联合化疗)38例;对照组(单纯化疗)38例,评价健脾化瘀解毒方的临床综合疗效。结果:两组治疗后客观疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后症状总积分、Karnofsky评分、生活质量总分、miRNA-143、miRNA-145的表达倍数相比,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后骨髓抑制、肝功能损害、消化道不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾化瘀解毒方联合化疗治疗晚期大肠癌可稳定瘤体,改善临床症状,提高生活质量,能调节miRNA-143、miRNA-145的表达,且无明显毒副反应。

基于ERK/Cyclin E通路探讨健脾化瘀解毒方逆转CAG大鼠胃黏膜癌变效应机制

目的探讨健脾化瘀解毒方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠增殖、分化ERK/Cyclin E信号通路的影响。方法选用SPF级SD大鼠,运用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)复合造模法复制CAG大鼠模型,设立分组:正常组,模型组,叶酸组,健脾化瘀解毒方高、中、低组。HE染色观察大鼠胃黏膜组织病理学改变;采用qRT-PCR法检测胃黏膜组织ERK1、ERK2、Cyclin E mRNA转录水平;免疫组化法检测胃黏膜组织ERK1、ERK2、Cyclin E蛋白表达。结果健脾化瘀解毒方可显著改善CAG大鼠胃黏膜上皮腺体结构、形态紊乱及细胞异型性等病理表现。模型组CAG大鼠胃黏膜上皮的ERK1、ERK2、Cyclin E mRNA水平及蛋白表达评分均较正常组显著增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,健脾化瘀解毒方能显著下调CAG大鼠胃黏膜上皮的ERK1、Cyclin E mRNA水平及蛋白表达评分(P<0.05,P<0.01),以高剂量组疗效最佳;健脾化瘀解毒方对ERK2无显著调控作用。结论健脾化瘀解毒方能显著下调ERK1、Cyclin E的表达,抑制胃黏膜上皮细胞的过度增殖,进而阻断CAG恶性转变。

健脾化瘀解毒方调节NLRP3炎症小体活化的生物信息学研究

目的基于生物信息学方法分析健脾化瘀解毒方对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的作用机制。方法通过GEO数据库公开发表的基因芯片信息获取NLRP3炎症小体活化的相关基因,并进行差异基因表达分析。利用中药系统药理分析平台(TCMSP)筛选健脾化瘀解毒方的主要活性成分,并结合相关文献对其进行适当补充。借助Pubchem数据库和Swiss Target Prediction数据库查找主要活性成分的作用靶基因。绘制韦恩图得到活性成分靶点与差异基因的交集,即健脾化瘀解毒方调节NLRP3炎症小体活化的潜在作用靶点;构建健脾化瘀解毒方活性成分-靶点网络及靶蛋白相互作用(PPI)网络,并进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果共获得健脾化瘀解毒方9味中药的93个主要活性成分,798个作用靶点;得到NLRP3炎症小体活化相关靶点743个,交集靶基因62个;关键靶点包括IL-6、VEGFA、TNF、SRC、IL-1β、PTGS2、BCL2L1、CCND1、FGF2、ICAM1等;共涉及26条GO条目与25条相关信号通路。结论健脾化瘀解毒方可能主要通过槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇等活性成分,作用于IL-6、IL-1β、TNF等核心治疗靶点,通过PI3K-Akt、HIF-1及MAPK等信号通路,调节NLRP3炎症小体活化来影响细胞焦亡,发挥防治胃癌前病变的作用。

健脾化瘀解毒方调控AKT/p38蛋白磷酸化改善胃癌前病变小鼠脾虚证研究

目的 探讨健脾化瘀解毒方在体内改善胃癌前病变小鼠脾虚证的作用机制。方法 构建脾虚证胃癌前病变小鼠模型,使用健脾化瘀解毒方干预后,观察小鼠体质量增长及摄食情况、脾脏组织结构变化、脾/胸腺指数、并检测AKT/p38信号通路相关蛋白表达情况。结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量增长缓慢,摄食明显减少,脾脏指数减小,胃黏膜AKT/p38信号通路被激活;与模型组比较,健脾化瘀解毒方干预组小鼠脾虚症状得到改善,脾脏组织结构重塑,且AKT/p38信号通路受到一定程度抑制。结论 MNNG可诱导胃癌前病变小鼠出现脾虚症状,健脾化瘀解毒方可能在一定程度抑制AKT/p38信号通路进而改善胃癌前病变小鼠脾虚症状,与其以健脾法为基础的治法相符合,进而发挥抑制甚至逆转胃癌前病变的作用。

健脾化瘀解毒方调控PI3K/Akt/HIF-1α通路干预胃癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡

目的探讨健脾化瘀解毒方(JPHY)调控PI3K/Akt/HIF-1α通路干预胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡的机制。方法采用200μg·mL^(-1) N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)自由饮用+隔日禁食法造模28周复制GPL模型。将SD大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组(270 mg·kg^(-1))、JPHY高剂量组(9 g·kg^(-1))和JPHY低剂量组(4.5 g·kg^(-1)),每组18只。第15周起,各给药组大鼠每天灌胃给药(10 mL·kg^(-1))1次,连续25周。分别于第18、28和39周,每组随机取6只大鼠,采用HE染色法观察大鼠胃黏膜组织病理学形态变化;Western Blot法测定胃黏膜组织PI3K、Akt、HIF-1α、Beclin1、Bcl-2、BAX蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜组织固有腺变薄,非固有腺锯齿样变,弥漫性细胞空泡样变,固有腺细胞变为体积小、胞质少、核质比例大、深染的异型增生细胞,呈假复层、跨腺腔灶状分布,有炎性细胞浸润,表现为以肠上皮化生为主;第18周,大鼠胃黏膜组织的PI3K、Akt蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P<0.05,P<0.01);第28周,PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P<0.01);第39周,Akt蛋白表达明显下调(P<0.05),HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P<0.05,P<0.01),PI3K、BAX蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,JPHY高剂量组的胃黏膜改善作用最明显,异型增生细胞数量、分布范围和分布密度有明显减少,固有层厚度明显增加,腺腔结构趋于正常;第18周的PI3K、Akt蛋白表达明显上调(P<0.01),HIF-1α、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调(P<0.05);第28周的PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值表达明显下调(P<0.01);第39周Akt蛋白表达明显上调(P<0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论JPHY对GPL不同阶段的黏膜损伤均有明显保护作用,可能与其通过PI3K/Akt/HIF-1α通路调节肿瘤缺氧微环境以及调控细胞自噬、凋亡作用有关。

健脾化瘀解毒方调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1抑制ROS诱导GPL细胞自噬的机制研究

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制氧化应激所致胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞(GECs)自噬,保护胃黏膜、防治癌变的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、维酶素组及健脾化瘀解毒方高(9 g/kg)、低(4.5 g/kg)剂量组,复制GPL大鼠模型,于造模第12 w连续灌胃给药10 w,实验结束时麻醉大鼠后,取血分离血清检测ROS、SOD、MDA水平;取胃窦部胃黏膜,观察组织病理学(HE染色)和肠上皮化生(AB-PAS染色),检测GECs的PI3K、mTOR、AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA及miR182、miR30a、miR206和Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2、ATG2B蛋白表达。结果:正常对照组大鼠胃黏膜无异常;模型组大鼠胃黏膜萎缩,空泡样变、组织异型性变,异型增生灶占胃黏膜厚度的1/3,各给药组胃黏膜病理学改变不同程度减轻;与模型组比较,健脾化瘀解毒方组PI3K、mTOR mRNA及miR30a、miR206显著升高,AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA及miR182和Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:健脾化瘀解毒方可通过影响miR182、miR30a、miR206等miRNAs活化,调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1通路,从而抑制氧化应激诱导自噬,逆转GPL大鼠GECs的肠化和损伤,防止GPL癌变。

健脾化瘀解毒方对慢性萎缩性胃炎胃黏膜COX-2、Bcl-2表达的影响

环氧化酶2（COX-2）是环氧化酶的一种同工酶异构体,为诱导型酶,参与炎症、肿瘤等病理发展过程。COX-2的抑制可影响前列腺素的合成,影响其对胃组织的正常生理作用以及保护功能。而凋亡抑制基因Bcl-2是目前具有代表性的研究凋亡指标,可促进肿瘤的发生发展。本文以健脾化瘀解毒方治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）,检测患者治疗后胃黏膜COX-2及Bcl-2的表达。

健脾化瘀解毒方治疗慢性萎缩性胃炎的临床研究

目的探讨健脾化瘀解毒方治疗脾虚气滞、挟瘀毒内阻证型慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法将80例入选患者随机分为治疗组和对照组,每组40例。治疗组给予张氏"健脾化瘀解毒丸",对照组给予西药抗幽门螺杆菌及对症治疗。3个月后,比较临床综合疗效、中医证候积分、胃镜下黏膜评分、组织病理疗效、幽门螺杆菌根除率等指标变化情况。结果 2组患者中医证候积分比较,治疗组症状积分显著低于对照组,差异有统计意义(P<0.05);治疗前后胃镜下黏膜评分比较,治疗组治疗后胃镜下黏膜评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前后病理疗效比较,其中治疗组治疗后萎缩程度积分均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);但肠上皮化生评分和异型增生积分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者幽门螺杆菌根除率比较,治疗前治疗组幽门螺杆菌为28例(70.0%),对照组为25例(62.5%);治疗后治疗组幽门螺杆菌阳性7例,根除率75.0%;对照组幽门螺杆菌阳性16例,根除率36.0%,2组根除率比较差异有统计学意义(χ~2=6.42,P<0.05)。结论健脾化瘀解毒方治疗后可以明显缓解患者胃痛、胃胀以及嗳气、纳呆、疲倦和嘈杂等不适症状,并能改善胃镜下胃黏膜局部循环,还能促进萎缩腺体恢复,缓解胃黏膜炎症状态,并有效提高幽门螺杆菌清除率,但对于逆转肠上皮化生、异型不典型增生,此研究不能体现2组的差异。

健脾化瘀解毒方抑制巨噬细胞焦亡治疗胃癌前病变的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制巨噬细胞焦亡治疗胃癌前病变(GPL)的机制。方法:空白组小鼠常规饲养,造模组予以N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)自由饮用隔日禁食法构建GPL模型,随机分为模型组,健脾化瘀解毒方高、低剂量组和维酶素组,每组12只,分别进行干预后,HE染色、AB-PAS染色观察小鼠胃黏膜组织病理学变化,Western Blot、RT-qPCR检测细胞焦亡相关指标、免疫荧光染色观察CDX2、Ki67、F4/80表达情况及F4/80与NLRP3共定位情况。体外构建J774A.1焦亡模型,予健脾化瘀解毒方含药血清干预,观察细胞焦亡相关分子表达情况。结果:与空白组比较,GPL小鼠胃黏膜NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、CDX2、Ki67、F4/80表达显著升高(P<0.01),NLRP3与F4/80存在共定位现象,集中分布于黏膜层。经健脾化瘀解毒方干预后,上述分子表达下降(P<0.01,P<0.05),且NLRP3与F4/80共定位现象散在分布。体外实验中,与空白组比较,模型组NLRP3、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达升高(P<0.01),PI染色阳性细胞比例增加(P<0.01),健脾化瘀解毒方可减少上述分子表达(P<0.01,P<0.05),减少PI染色阳性细胞比例(P<0.01,P<0.05)。结论:健脾化瘀解毒方可通过抑制巨噬细胞焦亡治疗GPL。

健脾化瘀解毒方治疗慢性萎缩性胃炎临床疗效回顾性研究

目的:回顾性总结分析健脾化瘀解毒方(Jianpi Huayu Jiedu Decoction,SWF)对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的临床疗效,对比观察SWF与胃复春治疗CAG的疗效异同。方法:回顾性收集2017年10月—2023年12月在广东省第二中医院消化科门诊及住院的350例CAG患者的电子病历,分别随机选择符合标准的160例为治疗组(SWF),70例为对照组(胃复春),分析两组患者的萎缩、肠化和异型增生三大病理(分级、评分、疗效)情况、中医证候评分与疗效、临床疗效。结果:治疗后,治疗组患者的三大病理分级构成比、病理积分、病理积分差值、证侯评分和证侯评分差值均较对照组有显著改善(均P<0.05),且两组治疗后三大病理分级构成比、病理积分、病理积分差值均较治疗前有显著改善(均P<0.01),治疗组患者病理疗效、证侯疗效和临床疗效均优于对照组(均P<0.01),治疗后三大病理分级两组间的差异萎缩>肠化>异型增生;治疗组的病理疗效、证侯疗效、临床疗效总有效率分别为90.0%、91.9%、83.8%,高于对照组的64.3%、77.1%和48.6%(均P<0.01)。结论:SWF可提高CAG患者的病理疗效、证候疗效和临床疗效,作用优于胃复春;治疗后SWF组CAG患者的病理疗效和证侯疗效总有效率相当。

中西医结合治疗肝炎肝硬化肝脾两伤、热毒瘀结证

目的观察健脾柔肝化瘀解毒方治疗肝炎肝硬化肝脾两伤、热毒瘀结证的临床疗效。方法将确诊的56例肝炎肝硬化患者随机分为治疗组29例和对照组27例,2组均以抗病毒、保肝降酶为基础治疗,治疗组在此基础上加用健脾柔肝化瘀解毒方(药用炙鳖甲、生黄芪、白术、制黄精等)。结果治疗组总有效率79.3%,明显高于对照组的48.1%。2组均可改善症状体征、肝功能、肝纤维化指标等,且治疗组优于对照组。结论健脾柔肝化瘀解毒方联合西药治疗肝炎肝硬化患者疗效确定,在阻止病情进展、改善肝纤维化、延缓肝硬化进展方面优于单纯西药治疗。

健脾化瘀解毒方在体内外抑制胃癌前病变细胞早期迁移的作用机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方(JPHYJD)在体内外抑制胃癌前病变细胞早期迁移的作用机制。方法:在体内外分别构建胃癌前病变小鼠模型、细胞模型,使用JPHYJD干预后,观察小鼠胃黏膜组织结构变化及细胞存活情况、检测癌症标志物及细胞迁移相关蛋白表达情况。将小鼠随机分为5组:空白组,模型组(MNNG 150μg/mL),JPHYJD低剂量组(MNNG+JPHYJD 3.75g·kg^(-1)·d^(-1)),JPHYJD高剂量组(MNNG+JPHYJD 15g·kg^(-1)·d^(-1))和阳性药组(MNNG+VitB121mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只。细胞分组为空白组、模型组(MNNG 5μmol/L)、JPHYJD低剂量组(MNNG 5μmol/L+JPHYJD 1.25μg/mL)、JPHYJD中剂量组(MNNG 5μmol/L+JPHYJD 2.5μg/mL)、JPHYJD高剂量组(MNNG 5μmol/L+JPHYJD 5μg/mL)、阳性药组(MNNG 5μmol/L+VitB121μg/mL)。结果:与空白组比较,模型组小鼠胃黏膜组织炎性细胞浸润、细胞异型增生明显,胃黏膜上皮组织癌症标志物Ki67、p53表达增加,模型组细胞存活率明显下降(P<0.01),体内外模型均出现EMT及相关蛋白表达,MNNG可在体内外诱导出现EMT现象;与模型组比较,JPHYJD干预组胃黏膜组织结构重塑、异型增生减少、炎性浸润减少、癌症标记物Ki67及p53表达受到一定程度抑制,且相应蛋白表达减少,提示EMT环节被阻断。结论:JPHYJD可能在一定程度阻断EMT环节进而抑制细胞迁移,同时可能通过PARP/Snail抑制其级联反应,从而发挥抗胃癌前病变炎症效应的潜能。

健脾化瘀解毒方抑制PI3K/AKT/HIF-1α通路阻断胃癌前病变恶性进展的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路的影响,分析其治疗胃癌前病变(GPL)的机制。方法:以同窝野生型小鼠为空白组,将10周龄Atp4a^(-/-)小鼠随机均分为模型组,维酶素组,健脾化瘀解毒方高、低剂量组,连续灌胃给药10周后,观察胃黏膜病理改变,采用Western Blot检测PI3K、p-AKT、HIF-1α和乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白的表达,免疫组化检测MUC2和Ki-67蛋白的表达。结果:光镜下可见模型组小鼠胃黏膜萎缩、肠上皮化生、异型增生性改变,而健脾化瘀解毒方各剂量组小鼠胃黏膜萎缩、肠上皮化生、组织异型性病变程度与范围均较模型组明显改善。与空白组比较,模型组胃黏膜PI3K、p-AKT、HIF-1α和LDHA蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,健脾化瘀解毒方各剂量组PI3K、p-AKT、HIF-1α和LDHA蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05)。免疫组化结果显示,与空白组比较,模型组胃黏膜MUC2和Ki-67平均光密度和累积面积百分率均升高(P<0.01);与模型组比较,健脾化瘀解毒方高剂量组MUC2和Ki-67的平均光密度和累积面积百分率均降低(P<0.01),健脾化瘀解毒方低剂量组的MUC2累积面积百分率和Ki-67的平均光密度降低(P<0.01)。结论:健脾化瘀解毒方可抑制PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的激活,抑制有氧糖酵解代谢产物LDHA表达,阻断细胞的恶性增殖与肠上皮化生,改善局部缺氧微环境,延缓GPL恶变。

健脾化瘀解毒方抑制细胞焦亡防治胃癌前病变的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制细胞焦亡防治胃癌前病变的作用机制。方法:构建胃癌前病变小鼠模型和细胞焦亡模型,将小鼠随机分为空白组,模型组,健脾化瘀解毒方高剂量组(15 g/kg)、低剂量组(7.5 g/kg)和维酶素组(0.2 g/kg),每组10只。分别进行干预后,观察小鼠胃黏膜组织病理变化及焦亡相关分子表达情况。细胞分为空白组、模型组和中药组,空白组与模型组给予空白血清,中药组给予含药血清干预后,除空白组外先后予以LPS、ATP处理。观察焦亡相关分子表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠胃黏膜NLRP3、GSDMD、HMGB1表达显著升高(P<0.01),健脾化瘀解毒方高、低剂量组可显著降低其表达(P<0.01)。与空白组比较,模型组细胞焦亡关键分子NLRP3、GSDMD、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01,P<0.05),I L-1β、I L-18 m R NA表达水平显著升高(P<0.01),中药组可显著降低其表达水平(P<0.01,P<0.05)。结论:健脾化瘀解毒方可通过抑制细胞焦亡防治胃癌前病变。

健脾化瘀解毒方调控Wnt/β-catenin/GSK3β通路抑制胃癌前病变大鼠Lgr5^+癌干细胞早期转移机制研究

目的:探讨健脾化瘀解毒中药胃炎1号抑制胃癌前病变(GPL)大鼠Lgr5^+癌干细胞早期转移的分子学机制。方法:SD大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组和胃炎1号组。MNNG水溶液自由饮用+饥饱失常+耗气泻下法复制GPL大鼠模型。连续灌胃给药10周后检测GPL大鼠胃黏膜上皮细胞β-catenin、Lgr5^+、MMP-7、GSK3β的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜上皮的β-catenin与MMP-7蛋白累积面积、光密度、积分光密度显著升高(P<0.05),GSK3β蛋白面积、光密度、灰度及Lgr5^+累积面积、积分光密度显著升高(P<0.05),GPL大鼠Lgr5^+胃癌干细胞由基底侧向胃腔侧侵袭迁移。与模型组比较,胃炎1号GPL大鼠胃黏膜上皮细胞β-catenin蛋白累积面积、光密度、积分光密度,GSK3β蛋白面积、光密度、灰度,Lgr5^+表达累积面积、积分光密度,MMP-7积分光密度显著降低(P<0.05),胃炎1号组Lgr5^+表达面积和强度均减少,散在分布于胃黏膜的固有层和非固有层。结论:胃炎1号可通过下调Wnt信号通路β-catenin、GSK3β、MMP-7的表达,抑制GPL大鼠Lgr5^+胃癌干细胞增殖、侵袭迁移。