化瘀软肝胶囊对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的作用

目的探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的作用以及对肝组织Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将60只大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(50只),造模组以CCl_(4)复合因素造模6周后,随机分为模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)和化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(0.27、0.54、1.08 g/kg),各组以相应的药物或生理盐水灌胃6周,每天2次。HE和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变,生化法和化学发光法分别检测大鼠血清肝功能(ALT、AST、TG、TBIL)和肝纤维化指标(HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C),RT-qPCR和Western blot法检测大鼠肝组织Wnt1、Wnt3a、Wnt10、GSK-3β、β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测大鼠肝组织β-catenin和α-SMA蛋白表达。结果与正常组比较,模型组肝组织病理损伤,血清ALT、AST、TG、TBIL、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平升高(P<0.01),肝组织Wnt1、Wnt3a、Wnt10、β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达升高(P<0.01),GSK-3βmRNA和蛋白表达降低(P<0.01),免疫荧光显示肝组织α-SMA和β-catenin蛋白表达增强(P<0.01);与模型组比较,化瘀软肝胶囊各剂量组可不同程度地改善肝组织病理变化,减弱α-SMA荧光强度,恢复血清肝功能和肝纤维化指标(P<0.05,P<0.01),降低Wnt1、Wnt3a、Wnt10、β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高GSK-3βmRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论化瘀软肝胶囊可减轻大鼠肝纤维化程度,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路中相关基因和蛋白的表达有关。

基于网络药理学探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的肝脏保护作用

目的基于网络药理学与实验动物模型验证探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的肝脏保护作用。方法通过网络药理学预测化瘀软肝胶囊治疗肝纤维化的作用靶点与信号途径。采用复合因素诱导8周建立肝纤维化大鼠模型,模型复制成功后随机分为模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)及化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(0.0315、0.0630、0.0945 g/mL),另设空白组,药物干预6周后处死,HE染色与天狼猩红染色观察肝组织形态学变化及胶原纤维沉积状况,Western blot法检测肝组织PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子及LC3-B、Beclin-1蛋白表达,免疫荧光染色法检测肝组织α-SMA蛋白表达。结果共筛选出化瘀软肝胶囊活性成分128种;预测药物与疾病共有靶点367个;蛋白相互作用PPI网络筛选出23个核心节点;富集分析结果表明,化瘀软肝胶囊主要通过调控PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等途径发挥抗肝纤维化作用。动物实验验证结果表明,与空白组比较,模型组大鼠肝组织纤维桥接形成,且伴有明显的纤维化现象,LC3-B、Beclin-1、α-SMA蛋白表达升高(P<0.01),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肝组织纤维化程度减轻,LC3-B、Beclin-1、α-SMA蛋白表达降低(P<0.01),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达升高(P<0.01)。结论化瘀软肝胶囊治疗肝纤维化具有多成分、多靶点、多通路的特点,其作用机制主要与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制细胞自噬和阻碍肝星状细胞活化有关。

基于“亢害承制”理论探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠细胞自噬的影响

目的基于“亢害承制”理论探讨化瘀软肝胶囊干预肝纤维化模型大鼠细胞自噬的作用机制。方法以SD雄性大鼠为研究对象,采用复合多因素方法(40%CCl_(4)花生油溶液皮下注射+高脂饲料+5%乙醇溶液饮水)复制肝纤维化大鼠模型8周,模型评价成功后依据随机数字表法分为正常组(NC)、模型组(Model)、秋水仙碱组(Col)、化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(HYRG-L、HYRG-M、HYRG-H),药物干预6周后处死,取血浆和肝组织,检测各组大鼠血清中ALT、AST,计算Liver Index水平,ELISA法检测IL-6含量的表达,天狼猩红染色观察肝组织胶原纤维沉积状况,Western Blot与免疫组织化学染色法检测α-SMA、LC3-B、Beclin-1的蛋白表达情况,RT-qPCR观察LC3-B、Beclin-1、α-SMA的基因水平变化。结果与NC组比较,Model组大鼠肝脏组织中央静脉周围大量肝细胞脂肪变性、结缔组织增生、胶原纤维沉积,不同静脉间互相连接,形成纤维桥接,并可见炎性细胞浸润;Model组大鼠血清中ALT、AST及Liver Index水平增高(P<0.05),IL-6水平升高(P<0.05),肝脏组织中LC3-B、Beclin-1、α-SMA的蛋白与mRNA水平上升(P<0.05),与Model组相比较,Col组与化瘀软肝胶囊不同剂量组可不同程度调节ALT、AST及Liver Index水平(P<0.05,P<0.01),降低IL-6细胞因子水平,改善肝纤维化大鼠的纤维化程度,下调LC3-B、Beclin-1、α-SMA的蛋白与mRNA表达水平(P<0.05)。结论中医学“亢害承制”理论指导下化瘀软肝胶囊抗肝纤维化的作用机制与其抑制炎症反应、阻碍HSC的过度增殖与活化、下调细胞自噬等途径有关。

化瘀软肝胶囊治疗肝硬化腹水31例

化瘀软肝胶囊治疗肝硬化腹水３１例２１５６００江苏省张家港市第一人民医院徐伯伦肝硬化腹水是一种严重影响患者健康的全身性慢性疾病。对其治疗，临诊医者多感棘手。笔者以自拟化瘀软肝胶囊治此３１例，疗效尚满意，现报告如下。一般资料３１例中，男２７例，女４例；年...