酶解北芪菇蛋白抗氧化肽制备及其抗氧化活性研究

目的研究制备北芪菇蛋白抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。方法以浓度为2%的北芪菇蛋白液作底物,通过测定抗氧化肽的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除率和北芪菇蛋白的水解度,确定复合酶的加酶方式与比例,然后进行单因素试验确定酶解时间、加酶量、酶解温度、pH值的最佳范围。在此基础上以DPPH·清除率为响应值进行响应面法优化分析。结果确定最佳工艺为:中性蛋白酶:碱性蛋白酶=1:1,酶解时间1.5 h,复合酶添加量5100 U/g,温度40℃,pH 7.5,在此工艺条件下,DPPH·清除率达到58.20%±0.23%,2,2’-联氨双(3-乙苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS·^(+))清除能力达到81.13%±1.09%,总还原能力达到0.3393±0.0023。结论酶解得到的北芪菇蛋白抗氧化肽具有一定的抗氧化活性。

南芪北芪抗应激与免疫调节作用的研究

目的观察南芪与北芪在抗应激、免疫调节及补血方面效果的差异。方法通过抗疲劳实验、耐常压缺氧实验、耐脑缺血缺氧实验及对失血性和环磷酰胺性贫血的保护作用等实验考察南、北芪抗应激及补血作用;通过巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素水平和皮肤迟发性过敏实验观察两者对免疫调节功能的影响。结果南、北芪均可延长小鼠负重游泳、耐常压缺氧及耐脑缺血缺氧的时间;升高贫血小鼠的红细胞和血红蛋白;提高巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素水平,增强皮肤迟发性过敏反应。两者药效强弱无统计学差异。结论南、北芪均具有提高小鼠抗应激的能力、增强免疫功能及补血作用,作用效果无显著性差异。

北芪对老龄机体细胞因子产生影响的实验研究

本文以１５月龄昆明鼠和６０～７２岁老龄人为对象，采用生物学活性检测法观察了北芪对老龄鼠脾细胞受ＣｏｎＡ刺激后产生ＩＬ－２，ＴＮＦ及ＩＦＮ－γ水平的影响，采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测了老龄鼠脾细胞上清中ｓＩＬ－２Ｒ含量。实验结果证明老龄机体ＩＬ－２，ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ分泌功能下降，ｓＩＬ－２Ｒ水平增高。服用北芪后明显地提高了老龄机体的ＩＬ－２，ＴＮＦ和ｒＩＦ－γ水平，降低了ｓＩＬ－２Ｒ水平，进而证明北芪是一种良好的免疫增强剂，能增强老龄机体抗肿瘤、抗感染，预防自身免疫病的发生及抗衰老等作用。

复方北芪液对局灶性脑缺血大鼠脑组织保护作用的实验研究

本研究采用大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）的脑缺血模型，随机将大鼠分为复方北芪液低剂量组、复方北芪液高剂量组、华佗再造丸对照组和病理组，从观察脑病理组织学以及超微结构等方面的变化入手，观察复方北芪液对MCAO大鼠恢复期脑组织病理改变的影响。结果显示：复方北芪液组与华佗再造丸组均能减少脑缺血后神经元的脱失，减轻脑组织超微结构的损害，减少梗塞软化灶，改善微循环，促进胶质细胞增生和脑组织修复；复方北芪液高剂量组优于低剂量组，有一定的量效关系。本研究为临床调整治疗剂量，提高疗效提供了实验依据。

复方北芪液对局灶性脑缺血大鼠的脑组织病理及超微结构的影响

复方北芪液是我院自制的临床用于治疗中风恢复期病人的制剂，临床疗效显著，本研究采用大鼠大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）的脑缺血模型，从脑病理组织学以及超微结构等方面的变化，观察了该药对（ＭＣＡＯ）大鼠脑组织病理改变的影响，现将结果报告如下：１材料与方法１．１...

复方北芪口服液治疗中风恢复期的临床研究

为客观评价补气血、养肝肾中药复方北芪口服液治疗中风恢复期的疗效， 采用随机双盲对照试验，将１０３ 例中风恢复期患者随机分为两组。两组均采用统一安慰剂， 一组用复方北芪口服液加安慰丸剂， 另一组用华佗再造丸加安慰剂口服液， 治疗１ 月并资料统计分析完毕后揭盲， Ⅰ组为华佗再造丸对照组（ 简称对照组） ， Ⅱ组为复方北芪口服液治疗组（ 简称治疗组） 。结果显示， 治疗组的总有效率为９４．１２ ％ ，与对照组相仿（ Ｐ＞０ ．０５） ； 治疗组在改善咽干口苦、心烦易怒等伴随症状方面优于对照组（ Ｐ＜０ ．０５） ； 在改善患者的血液流变学指标及血中红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 、血浆丙二醛（ＭＤＡ） 含量方面， 两组疗效相仿（ 均Ｐ＞ ０ ．０５）； 两组均未发现有心、肝、肾等脏器的损害， 但对照组治疗后一些患者出现咽干口苦、心烦易怒、多梦失眠、便秘、纳差等症状， 而治疗组无１ 例出现上述症状。提示复方北芪口服液治疗中风恢复期患者与华佗再造丸疗效相仿， 而对阴虚有热的患者比华佗再造丸更为合适。

复方北芪口服液对大鼠大脑中动脉阻塞/缺血再灌流模型细胞凋亡的影响

目的 采用流式细胞仪检测复方北芪口服液对大鼠大脑中动脉阻塞 /缺血再灌流(MCAO/IR)模型细胞凋亡的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨该药作用于脑缺血损伤的可能机制。方法 清洁级雄性SD大鼠 18只 ,随机分为模型组、假手术组、治疗组。取新鲜缺血侧脑海马制成单细胞悬液 ,进行凋亡的定量分析。结果 假手术组即可测得凋亡峰 ,模型组、治疗组细胞凋亡百分率明显高于假手术组 ,均有显著性差异 (P <0 .0 1) ;治疗组的百分率较模型组明显降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 复方北芪口服液有明显抗凋亡的作用 。

复方北芪口服液质量标准的研究

对复方北芪口服液组方中的黄芪、何首乌、鸡血藤进行了薄层鉴别。用薄层扫描法测定了黄芪甲甙的含量，平均回收率为１００．５７％，ＲＳＤ＝１．２０％。本法简便、快速、准确。

单味北芪对老龄鼠及模型鼠免疫功能的影响

本文实验结果表明,北芪能增强老龄鼠及氢化可的松致免疲功能低下模型鼠的免疫功能,提高细胞免疫、体液免疫、补体水平、CMSC活性,使老龄鼠免疫器官和组织超微结构恢复正常。从而证实,AMB能调节老龄鼠的免疫功能,是一种良好的免疫调节剂。

北芪菇化学成分的初步研究

采用试管预试法和圆形滤纸层析法对北芪菇的化学成分进行检测,结果表明北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸、多糖、生物碱、黄酮及其苷类、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、挥发油成分。

人参北芪片质量标准的研究

目的:建立人参北芪片的质量控制方法。方法:采用TLC法同时鉴别制剂中的人参及黄芪膏粉,采用HPLC-ELSD方法测定制剂中黄芪甲苷的含量。结果:鉴别方法专属性强,含量测定方法黄芪甲苷在1.060 8～10.608μg之间呈良好的线性关系;人参北芪片中黄芪甲苷的平均回收率为96.4%(RSD 1.3%);结论:该方法简便、准确、分离效果好,可用于人参北芪片的质量评价。

HPLC法测定灵芝北芪片中腺苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定灵芝北芪片中腺苷的含量,以便更有效的控制其内在质量。方法:采用高效液相色谱法VP-ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);磷酸盐缓冲液(PH6.5)-甲醇(17:3),检测波长260nm,流速1.0ml·min-1,柱温为室温。结果:腺苷在3.93～39.28mg·L-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率为99.5%,RSD=0.89%。结论:本法简便,灵敏,重复性好,可用于灵芝北芪片中腺苷的含量测定。

应用TLC-CMS-IR技术检测北芪菇中的L-硒代蛋氨酸

采用薄层层析结合酶解法,从北芪菇中提取、制备硒代蛋氨酸,并对其进行表征分析。结果表明,经酶解展开(正丁醇∶乙酸∶水(7∶1∶2,V/V))和显色后,北芪菇浸提液出现紫色斑点数为4个,其中有1个与硒代蛋氨酸标准品斑点位置一致,其Rf值为0.368;质谱检测显示,北芪菇样液和硒代蛋氨酸标准品基峰质荷比(m/z)均为196 m/z;红外光谱分析显示,北芪菇样液和硒代蛋氨酸标准品均含有N-H,O-H,C-O,C-N,C-Se等功能团;北芪菇中硒代蛋氨酸含量为0.24%。

北芪五加颗粒对雏鸡免疫功能及生长发育的影响

7日龄海塞克斯粉蛋公雏300只随机分5组,北芪五加组（A、B、C组）于7~14日龄分别按1.0 g/L、2.0 g/L、4.0 g/L兑水饮用北芪五加颗粒;黄芪多糖对照组（D组）同时段饮水添加黄芪多糖粉（200 mg/L饮水）;空白对照组（E组）不添加任何药物。各组于7 d、21 d用La Sota活苗免疫,然后于7、14、21、28 d测定血液中HI抗体水平,并检测＂北芪五加颗粒＂对免疫器官和生长发育的影响。结果表明,＂北芪五加颗粒＂按2.0 g/L、4.0 g/L饮水能显著提高La Sota活苗接种雏鸡的特异性HI抗体水平,促进雏鸡及免疫器官的生长发育。

北芪茶对心血管患者血中LPO及GSH—PX的影响

本文观察北芪茶对心血管患者的脂质过氧化物(LPO)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响,为北芪茶防治心血管疾病提供科学依据。对象与方法一、对象:受试者为年龄50～65岁心血管患者,本组男18例、女12例,平均年龄57.2岁,均根据病史、体征和辅助检查而确诊的病例,其中冠心病12例,高血压10例,动脉硬化9例。共30例。健康人(对照组)

薄层扫描法测定复方北芪口服液中黄芪甲苷的含量

本文研究双波长薄层扫描法，λs=530nm，λg=700nm，测量复方北芪口服液中黄芪甲苷含量的测定方法。结果表明该法操作简便，结果准确，黄芪甲苷在1．01～5．05mg线性关系良好，回归方程Y=155．67＋724．58X，r=0．9990。

北芪五加颗粒长期毒性试验研究

为考察北芪五加颗粒对动物的安全性,采用大鼠进行长期毒性试验。设北芪五加颗粒原料(5、2.5、1.25g/kg)剂量组及空白对照组,给药量分别相当于猪每日临床用量的100、50、25倍;给药28d后停药,各组抽取腹主动脉血进行血液学检测和血液生化指标测定,对心、肝、脾、肺、肾等脏器进行组织病理学检查。结果显示,北芪五加颗粒原料高、中、低剂量组与对照组相比除个别指标外,其余指标差异均无统计学意义(P>0.05),未见与药物有关的病理变化。说明北芪五加颗粒临床应用安全。

用HPLC法测定人参北芪片中人参皂苷Rg_1的含量

人参北芪片由人参、黄芪两味药材组成,可扶正固本、补气升阳和补虚生津,用于肢体倦怠、神疲乏力及多梦健忘等,该药收载于《中华人民共和国卫生部药品标准.中药成方制剂（第四册）》,但质量标准中仅有两味药的鉴别和片剂的常规检查,并无含量控制方法。作者查阅相关文献亦未见测定其含量的报道。处方中人参是名贵药材,

HPLC法测定不同厂家人参北芪片中人参皂苷Rg1的含量

目的建立用高效液相色谱法同时测定不同厂家人参北芪片中人参皂苷Rg1的含量。方法 LC-2010A高效液相色谱仪,Soultion色谱工作站。色谱柱：YMC-Pack ODS-AC18柱（150×4.6mm ID,5μm）,流动相：乙腈–0.02%磷酸（20.2：79.8）;检测波长：203nm;柱温为40℃;进样量为10μl;流速为1.0ml/min。结果结果表明人参皂苷Rg1在0.166~1.192μ范围内线性关系良好。人参皂苷Rg1回收率为97.60%（RSD1.78%）。结论该方法快捷、可靠、灵敏度高,可用于人参北芪片的含量测定。