酶解北芪菇蛋白抗氧化肽制备及其抗氧化活性研究

目的研究制备北芪菇蛋白抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。方法以浓度为2%的北芪菇蛋白液作底物,通过测定抗氧化肽的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除率和北芪菇蛋白的水解度,确定复合酶的加酶方式与比例,然后进行单因素试验确定酶解时间、加酶量、酶解温度、pH值的最佳范围。在此基础上以DPPH·清除率为响应值进行响应面法优化分析。结果确定最佳工艺为:中性蛋白酶:碱性蛋白酶=1:1,酶解时间1.5 h,复合酶添加量5100 U/g,温度40℃,pH 7.5,在此工艺条件下,DPPH·清除率达到58.20%±0.23%,2,2’-联氨双(3-乙苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS·^(+))清除能力达到81.13%±1.09%,总还原能力达到0.3393±0.0023。结论酶解得到的北芪菇蛋白抗氧化肽具有一定的抗氧化活性。

北芪菇化学成分的初步研究

采用试管预试法和圆形滤纸层析法对北芪菇的化学成分进行检测,结果表明北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸、多糖、生物碱、黄酮及其苷类、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、挥发油成分。

应用TLC-CMS-IR技术检测北芪菇中的L-硒代蛋氨酸

采用薄层层析结合酶解法,从北芪菇中提取、制备硒代蛋氨酸,并对其进行表征分析。结果表明,经酶解展开(正丁醇∶乙酸∶水(7∶1∶2,V/V))和显色后,北芪菇浸提液出现紫色斑点数为4个,其中有1个与硒代蛋氨酸标准品斑点位置一致,其Rf值为0.368;质谱检测显示,北芪菇样液和硒代蛋氨酸标准品基峰质荷比(m/z)均为196 m/z;红外光谱分析显示,北芪菇样液和硒代蛋氨酸标准品均含有N-H,O-H,C-O,C-N,C-Se等功能团;北芪菇中硒代蛋氨酸含量为0.24%。

响应面优化超声辅助酶法提取北芪菇多糖及其抑菌活性研究

优化酶法辅助超声提取北芪菇多糖工艺并研究其抑菌活性。以多糖提取率为指标,采用单因素试验和响应面法对提工艺条件进行优化。并采用最低抑制浓度法考察北芪菇多糖对大肠杆菌等5种试验菌的抑制效果。结果表明,最佳提取工艺条件为:料液比1∶45,酶添加量1%,超声温度70℃,超声时间50min,超声功率200W,北芪菇多糖提取率最大为9.59%±0.16。抑菌结果表明,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用,最小抑制浓度MIC是25~50mg/mL之间,对禾谷镰刀菌有一定抑制作用,最小抑制浓度MIC是75~100mg/mL之间,对青霉和酿酒酵母无抑制作用。

应用TLC-CMS-IR技术检测北芪菇中黄芪甲苷

以乙醇水溶液为提取剂,从北芪菇中提取黄芪甲苷,薄层层析(TLC)分离和制备黄芪甲苷;通过对比质荷比(m/z)和官能团等对黄芪甲苷进行表征与分析。结果表明,乙醇-水=7∶3(V/V)作为提取剂,微波超声波处理后,多级萃取后得到正丁醇相;氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶水=13∶7∶2∶2(V/V)展开后,经显色获得的色谱斑点与黄芪甲苷标准品斑点位置比对一致,Rf值为0.31;黄芪甲苷样品和标准品质谱波谱图和红外波谱图确定提取物为黄芪甲苷。样品中黄芪甲苷的熔点是295℃;旋光度是+56.4;比旋光度是+24.4。结果表明,TLC-MS-IR联用是一种具有独特优势的色谱波谱技术,能实现从微克量级的分离分析到克量级的分离制备,可用于天然产物粗提物的去除杂质和单个产物的精制,适用于从北芪菇中进行物质的制备分离。

北芪菇对银屑病疗效的初步研究

北芪菇系将侧耳属平菇用我国北岳恒山的著名野生中药材“正北芪”为主料培育而成,因它具有特异性功能而得的商品名。据中科院药物所对“正北芪”的分析,含有B-谷甾醇、亚油酸、亚麻酸、21种氨基酸、D-B-天冬素、胡萝卜甙、二十九烷、胆碱、多糖、微量元素硒等。其中亚油酸又称“美容酸”,亚麻酸也称维生素F,是维生素家族的新成员,是一种人体内自身不能合成而又必需的不饱和脂肪酸,由于在自然界存在稀少,人体会出现不同程度的亚麻酸缺乏症而引起皮肤老化及病变。关于硒近年报道甚多,其防癌抗癌、抗衰老及提高人体免疫功能作用也是公认的。此外,北芪多糖也能够显著提高人体的免疫功能,具有调节免疫的广泛作用.那么选用“正北芪”为主料培育而成的北芪菇成分与功能如何?现把近年来的研究结果报告如下。 一、材料与方法 (一)材料 菌种为从侧耳属平菇中经分离驯化筛选出的晋平18号菌株。培养料为“正北芪”加辅料。 (二)方法

超声波辅助酶法制备北芪菇抽提物及其抗氧化能力研究

为探究北芪菇抽提物制备工艺及抗氧化活性,以氨基态氮含量和可溶性固形物含量为指标,采用单因素实验和响应面法对超声波辅助酶法制取北芪菇抽提物的条件进行优化。结果表明,最佳条件为:纤维素酶用量0.5%、水料比12∶1 mL/g、超声时间40 min、超声温度40℃、pH4.0,抽提物氨基态氮含量(0.765±0.12)mg/mL,总黄酮含量6.5%±0.25%,可溶性固形物含量为2.0%。以VC为阳性对照,抗氧化性结果表明酶法抽提物(EE)具有体外抗氧化活性,清除DPPH自由基的能力最强,当质量浓度为600μg/mL时与同质量浓度的VC标准品相比,清除能力明显高于对照。本研究可为北芪菇的进一步开发应用提供理论依据。

干制北芪菇成分测定及其营养价值评估

【目的】探明干制北芪菇的营养价值,为新型食用菌北芪菇的开发利用和产业发展提供依据。【方法】根据GB/T 5009.5-2016《食品中蛋白质的测定》等对北芪菇干制品的各营养成分进行测定,评估其营养价值。【结果】干制北芪菇中水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维和粗多糖的含量分别为5.23%、8.46%、22.09%、0.88%、3.33%和8.38%,硒元素含量为2.03 mg/kg;氨基酸总量为39.68 mg/g,其中必需氨基酸总量为11.07 mg/g,非必需氨基酸总量为28.61 mg/g;支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值为0.66,鲜味氨基酸总量占氨基酸总含量为46.88%。【结论】干制北芪菇中蛋白质含量较高,脂肪含量较低,碳水化合物、氨基酸和硒元素含量较丰富,营养均衡,具有良好的经济价值和开发前景。

超声波提取北芪菇多糖工艺的优化及含量测定

研究超声波辅助提取法从北芪菇中提取粗多糖的工艺。通过单因素试验确定了影响多糖类化合物的主要因素及较优水平,用正交试验优化提取工艺条件。结果表明:在超声波功率350 W、提取温度80℃、料液比1 g∶60 mL、提取时间50 min的工艺条件下,北芪菇粗多糖最大提取率为8.71 g/100g。用分光光度法测定其含量,以葡萄糖为标准品,苯酚-硫酸体系显色,在波长490 nm处对样品中的粗多糖进行含量测定。结果表明,粗多糖在0.1 mg/mL^2.0 mg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.999 1,平均回收率为97.38%,RSD=1.29%。该方法测定北芪菇中粗多糖含量,操作简便、准确,具有良好的稳定性和重现性。

苯酚-硫酸法测定北芪菇多糖的含量

采用水提醇沉法从北芪菇中提取水溶性多糖,用Sevage法除蛋白,通过苯酚-硫酸比色法在490nm波长处测定多糖含量。在10—80Lg·mL-1范围内,葡萄糖质量浓度与吸光度线性关系良好,相关系数r=0.9985,平均回收率为97.74%,相对标准偏差为2.36%(n=6),北芪菇中多糖含量为5.45%。方法快速、简单,稳定性好,可作为北芪菇多糖的常规检测方法。

响应面分析法优化北芪菇多糖提取工艺研究

研究北芪菇多糖提取工艺和最佳提取条件,为有效开发利用北芪菇奠定试验方法学基础。主要采用水回流提取多糖,并用苯酚-硫酸法测定北芪菇的多糖含量,对温度、时间和液料比进行单因素试验,根据Box-Benhnken的中心组合试验原理,确定响应面试验方案,做出响应面试验结果。通过Design-Expert软件程序进行分析,从而确定最佳提取条件。液料比是影响北芪菇多糖提取的重要因素。水回流提取多糖最佳工艺条件为:温度90.28℃,时间2.06 h,液料比32.19∶1(m L/g)。在该条件下,北芪菇多糖提取率预测值为6.160 78%,验证值为6.71%。该方法测定多糖含量操作简单、省时、高效,可为今后北芪菇多糖的更深入研究与开发利用奠定理论基础。

益生菌复合发酵酸奶的工艺优化及其抗氧化性研究

以北芪菇、红枣、纯牛奶为原料,接种益生菌双歧杆菌与传统乳酸菌(德氏乳杆菌保加利亚亚种加嗜热链球菌)复合发酵,通过单因素、响应面实验优化了北芪菇红枣酸奶的工艺条件,考察了酸奶品质及体外抗氧化活性。抗氧化结果表明,益生菌酸奶对DPPH和ABTS+均有较强的抗氧化性。优化后的益生菌酸奶蛋白质质量分数为4.38%,酸度为74.2°T,口感细腻,色泽均匀,且有浓郁红枣味和淡淡的北芪菇复合风味。

开发新型食用菌有前途

鸡腿菇因形如鸡腿而得名。它味道鲜美可口，肉质细嫩，营养丰富，含有人体所必需的多种氨基酸，经常食用有助于消化、增强食欲，还可治疗痔疮。其人工栽培技术和产量与平菇、凤尾菇相同，但价格却比它们高3～4倍。