北虫草刺五加组合物抗疲劳活性及机理研究

为探讨北虫草刺五加组合物(Cordyceps militaris Acanthopanax senticosus composition,CAC)抗疲劳作用及机制,采用转棒和力竭动物模型,将小鼠分为空白对照组和低、中、高剂量给药组,各组连续灌胃蒸馏水或不同剂量CAC,灌胃第29天,进行连续3 d的转棒适应实验,灌胃第32天进行正式转棒实验,测定小鼠转棒停留时间;灌胃第35天,进行负重力竭游泳实验,测定力竭时间以及小鼠血乳酸(lactic acid,LA)、血乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肝糖原(liver cogen,LG)、肌糖原(muscle glycogen,MG)、肝组织中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及磷酸化-蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-AKT)、磷酸化-糖原合成酶激酶(phosphorylated-glycogen sythesis kinase-3,p-GSK3β)和葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)等疲劳相关生化指标和糖原代谢相关机制指标。研究发现:与空白对照组相比,给药各组均可显著延长小鼠转棒的停留时间和力竭游泳时间(P<0.01),中、高剂量CAC可显著提高力竭小鼠体内T-SOD活性,降低MDA和ROS水平(P<0.01);与空白对照组相比,中、高剂量CAC可极显著提高力竭小鼠LG、MG、LDH的含量和活性(P<0.001)、极显著降低LA、BUN的含量(P<0.001);与空白对照组相比,中、高剂量CAC可增加肝组织中p-AKT(Ser473)、p-GSK3β(Ser9)和GLUT4蛋白的表达,其中高剂量组作用显著(P<0.01)。结果表明:CAC能够通过提高小鼠机体抗氧化活力和糖原储备,减少机体无氧酵解及蛋白质分解供能而发挥抗疲劳作用,该作用可能与激活AKT/GSK3β/GLUT4信号通路有关。

中药组合物多糖的提取工艺及抗氧化活性研究

目的优化中药(北虫草-刺五加)抗疲劳组合物中多糖的提取工艺,并探讨其体外抗氧化活性.方法通过单因素试验、正交试验法优化北虫草-刺五加多糖(Cordyceps militaris-Acanthopanax senticosus polysaccharide,CAP)的提取工艺;通过体外1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)清除率、总超氧阴离子自由基(total superoxide anion free radical,SAFR)清除率和羟基自由基(hydroxyl free radical)清除率比较CAP与北虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharides,CMP)、刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)的抗氧化能力差异;利用H_(2)O_(2)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞(PC12细胞),构建体外氧化损伤模型,从而考察三者体外抗氧化作用差异.结果提取温度90℃、提取时间3 h、料液比m(样品,g)∶V(水,mL)=1∶40、提取次数3次为CAP的最佳提取工艺,多糖得率可达27.61%;CAP对DPPH的清除率最高可达到63.02%,对SARF的清除率最高达到67.52%,对HFR的清除率最高达到68.38%,均高于CMP和ASPS;100μg/mL的CAP可显著提高H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的存活率,并且可以显著提高PC12细胞中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活力,显著降低PC12细胞中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,作用均高于同等浓度的CMP和ASPS.结论该提取方法稳定可靠,获得的组合物多糖CAP具有明显的体外抗氧化活性,且能够通过减弱H_(2)O_(2)产生的活性氧而保护PC12细胞免受损伤,作用效果优于组合物中的各味中药多糖.