医用重组人源胶原蛋白功能敷料体外免疫原性评价

目的对一种医用重组人源胶原蛋白功能敷料的体外免疫原性进行评价。方法以细胞培养液为浸提介质,按0.2 g/ml的比例浸提制备试验液,进行体外淋巴细胞增殖试验、人细胞系激活试验(h-CLAT)、细胞炎症因子含量检测。结果体外淋巴细胞增殖试验中,100%,50%,25%3种浓度试验液的淋巴细胞增殖率分别为105%,111%,86.3%,与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。h-CLAT结果显示,试验组THP-1细胞表面分子CD54 RFI值<200,CD86 RFI值<150,判定为阴性结果。试验组细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素8(IL-8)的含量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论医用重组人源胶原蛋白功能敷料有良好的生物相容性。

LED红黄光照射联合医用重组人源胶原蛋白功能敷料贴治疗面部皮炎效果观察

目的:研究LED红黄光照射联合医用重组人源胶原蛋白功能敷料贴治疗面部皮炎的疗效。方法:将入选患者随机分为两组。对照组予以LED红黄光照射治疗;观察组联合医用重组人源胶原蛋白功能敷料贴治疗。比较两组的皮损严重程度积分、临床疗效、皮肤检测指标。结果:101例患者完成临床治疗观察。观察组患者治疗后的皮损严重程度积分明显低于对照组,临床有效率高于对照组,治疗后的TEWL、pH值异常率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:对面部皮炎患者采用LED红黄光照射联合医用重组人源胶原蛋白功能敷料贴治疗安全有效。

医用重组人源胶原蛋白功能敷料对二氧化碳激光术后创面修复的临床观察

CO2激光是治疗皮肤良性浅表赘生物的常用手段，如疣、脂溢性角化、汗管瘤、软纤维瘤等，临床应用十分广泛，但术后有的患者可能出现局部色素沉着，甚至感染及瘢痕形成等不良反应，严重影响患者的美容需求。自2013年10月以来，我科对CO2激光术后的患者应用医用重组人源胶原蛋白功能敷料进行创面治疗取得了满意的疗效，现报告如下。

微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白在皮肤屏障功能修复中的应用效果

目的探究微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白治疗因皮肤炎性衰老导致的皮肤屏障功能下降的有效性及安全性。方法选取2020年6月至2021年5月在本院接受面部皮肤治疗的30例患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(重组Ⅲ型人源化胶原蛋白)与治疗组(微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白),各15例。治疗后定期对患者进行随访,分别进行主观疗效评价及客观疗效评价。结果治疗后4、8、12周,治疗组的满意度显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组的皮肤皱纹、纹理、红区、毛孔、弹性、皮肤经皮失水及皮肤含水量改善明显(P<0.05);对照组治疗后油脂改善明显(P<0.05)。治疗后12周,治疗组的总症状评分显著低于对照组(P<0.05)。结论微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白对皮肤修复有较好的疗效,可增强皮肤屏障功能,为改善皮肤屏障功能、治疗因皮肤屏障受损引起的炎性衰老提供了新选择。

补充重组人源胶原蛋白对离心运动后小鼠骨骼肌细胞外基质重塑的影响

背景:胶原蛋白是含量最为丰富的胞外基质成分,与骨骼肌细胞外基质的结构、功能密切相关,但补充由生物工程技术生产的重组人源胶原蛋白(recombinant human collagen,rhC)对骨骼肌细胞外基质的影响及机制尚不清楚。目的:探讨补充rhC对离心运动后骨骼肌细胞外基质重塑的影响及作用机制。方法:将104只8周龄健康雄性C57小鼠随机分为对照组(生理盐水)、rhC低剂量组(0.2 g/kg)、中剂量组(1.0 g/kg)和高剂量组(2.0 g/kg),连续7 d灌胃干预后每组选取2只小鼠,解剖各脏器进行苏木精-伊红染色判断炎性浸润情况,其余小鼠于第8天进行离心运动,分别在离心运动后即刻(0),24,48,96 h观察细胞外基质结构变化,检测小鼠抓握力、血清肌酸激酶活性、骨骼肌组织基质金属蛋白酶2,9,14和基质金属蛋白酶抑制剂2的蛋白水平。结果与结论:①苏木精-伊红染色观察短期补充rhC对心脏、肝脏、脾、肾无显著影响;②一次性离心运动后,rhC中、高剂量组小鼠抓握力恢复率显著升高(P<0.01);③各组肌酸激酶变化趋势一致,组间无显著性差异;④rhC低剂量组细胞外基质恢复进程快于对照组,rhC中、高剂量组肌束膜较为完整;⑤rhC高剂量组基质金属蛋白酶9蛋白水平显著降低(P<0.05);⑥rhC中、高剂量组基质金属蛋白酶14蛋白水平显著降低(P<0.05);⑦rhC中、高剂量组基质金属蛋白酶2蛋白水平显著降低(P<0.05);⑧rhC中、高剂量组基质金属蛋白酶抑制剂2蛋白水平显著升高(P<0.05);⑨rhC各剂量组基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶抑制剂2比值显著降低(P<0.05)。该研究发现连续7 d预补充1.0,2.0 g/kg rhC可通过调节基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶抑制剂来抑制运动后骨骼肌细胞外基质降解,从而促进小鼠骨骼肌力量恢复。

重组Ⅰ型人源化胶原蛋白“福活因子”的生物合成及其结构表征研究

目的:筛选获得含胶原蛋白保守序列hCol.1基因的重组人源化Ⅰ型胶原蛋白高效表达基因工程菌和高产创新融合蛋白,并通过检测其理化特征验证表达产物。方法:将His6-SUMO-hCol.1重组基因大肠杆菌高密度发酵后经镍亲和层析和离子交换层析两步纯化浓缩获得重组蛋白,检测理化测试特征。结果:测序证明克隆基因与hCol.1序列高度一致,Blast比对蛋白序列与人Ⅰ型胶原蛋白高度同源,折叠结构与人Ⅲ型胶原蛋白高度类似。表观分子量55~60kD,产量36.4mg/L,纯度>95%。等电点检测、氨基酸组成和圆二色谱等实验结合高级结构预测分析,证明其理化性状与蛋白结构符合胶原蛋白特征。结论:成功将人Ⅰ型胶原蛋白保守功能结构域hCol.1与SUMO等肽段重组融合表达并命名为福活因子(FHTFF),筛选出基因工程菌pET21a(+)-FHTFF/BL21,纯化产物“福活因子”的理化特性、序列和结构与人Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白肽段高度相似,属于重组人源化胶原蛋白新生物材料。

重组人源Ⅲ型胶原蛋白对豚鼠紫外线辐射损伤皮肤的修复效果探究

由于大气臭氧层逐渐被破坏,紫外线辐射量大大增加,导致皮肤中的核酸、蛋白质等大分子物质发生化学反应,引起皮肤红斑、色素沉积、晒伤、光老化甚至癌变的发生。以重组人源Ⅲ型胶原蛋白(recombinant human typeⅢcollagen,rhColⅢ)为研究对象,探究其对成纤维细胞(L929)的细胞毒性及对豚鼠紫外线辐射光毒性损伤皮肤的修复作用。结果发现,在体外细胞实验中rhColⅢ对L929细胞无潜在的细胞毒性;体内动物实验中rhColⅢ对豚鼠紫外线辐射光毒性损伤皮肤具有明显的修复作用,其可以减少豚鼠皮肤损伤后的皮肤皱纹,改善损伤皮肤组织的表皮增生和真皮层炎症反应,降低波形蛋白(Vimentin)和黑色素瘤单克隆抗体45(human melanoma black 45,HMB45)在损伤皮肤组织中的表达。结果表明,rhColⅢ的安全性良好,在豚鼠紫外线辐射损伤皮肤的修复治疗中,可以明显改善紫外辐射豚鼠皮肤的表皮层增厚和角质化程度,降低真皮层处的炎症反应,有效调节成纤维细胞纤维化程度与黑色素瘤的发病风险。结果表明,rhColⅢ对紫外线辐射造成的光损伤皮肤具有明显的治疗效果。

重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶在老年萎缩性阴道炎患者中的效果观察

研究对老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后的效果。方法 摘取我院皮肤科收治的老年萎缩性阴道炎患者60例进行研究,摘取时间范围2022年11月至2023年5月,以电脑随机数字表法将摘取的患者分成参考组和凝胶组,两组均有患者30例,参考组患者采取局部抗炎治疗。凝胶组在参考组的基础上实施重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗,将两组的治疗效果、阴道pH值、阴道症状和体征评分相比较。结果 ①就治疗效果而言,参考组稍差,凝胶组更高,差异体现统计学差异(P<0.05)。②对比患者阴道pH值可知参考组更差,组间差异体现统计学(P<0.05)。③比较组间患者的体征以及相关症状,可知参考组更差,组间数据差异体现出统计学意义(P<0.05)。结论 老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后,患者的阴道pH值、阴道症状和体征评分均明显改善,治疗效果比较明显,可在临床上加大力度推广。

重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效观察

分析重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效。方法 选取我院在2022年6月~2023年8月期间实施激光术治疗的78例患者,随机分为两组,即对照组和实验组。对照组仅接受激光术治疗、实验组在激光术治疗后外用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料,对其应用情况进行比较分析。结果 实验组治疗总有效率和对照组相比较高(P <0.05);干预后的面部症状评分低于对照组(P <0.05);创面愈合时间短于对照组(P <0.05)。结论 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料对激光术后创面修复的效果较好,能减轻患者的不适症状,促进其创面更快愈合,患者的认可度较高,所以值得应用。

重组人源化胶原蛋白促进创面修复研究及其医用敷料应用

目的:探究重组人源化胶原蛋白促进创面修复及其医用敷料应用价值。方法:通过细胞、动物试验研究重组人源化胶原蛋白对创面的修复作用,对贴敷料开展性能、生物学评价,收集文献概述重组胶原蛋白临床应用。结果:重组人源化胶原蛋白可显著促进表皮和成纤维细胞的增殖和迁移速率,显著改善豚鼠皮炎损伤后的病理学变化(P <0.01);敷料表皮应用无透皮吸收,性能、生物学评价良好(细胞活性73.99%,无刺激,无致敏反应),临床使用广泛,疗效显著,无不良反应。结论:重组人源化胶原蛋白可有效促进创面修复,医用敷料产品应用安全、有效,可大力开发。

动物源副产物胶原蛋白肽的制备及其在食品工业中的应用研究进展

在动物加工过程中会产生大量的副产品和废弃物,这些产品中富含生物活性蛋白质,可以通过化学处理或酶水解等方式转化为具有特殊生理功能的胶原蛋白肽。胶原蛋白具有一定的营养价值,但由于其分子质量较大,难以被人体消化吸收。而胶原蛋白肽分子质量较小,更容易被人体消化吸收,并且发现动物源副产物胶原蛋白肽具有许多特殊的生理功能,因此将胶原蛋白肽作为新型食品原材料成为近些年来的研究热点之一。本文综述动物源副产物胶原蛋白肽制备方式的优缺点,及胶原蛋白肽在人体中的消化吸收,同时介绍胶原蛋白肽在食品加工中的应用,为将来开发胶原蛋白肽新产品提供新思路。

表达元件优化促进重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达

重组胶原蛋白是一种具有广泛应用潜力的生物材料,近年来引起了生物医学、组织工程等众多领域的关注。胶原蛋白的3股螺旋结构赋予其独特的生物学功能和生物相容性,但也增加了其在微生物系统中表达的复杂性。该研究以细菌胶原蛋白V-B作为模式蛋白,通过对表达元件的优化,促进重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达。首先通过启动子筛选和发酵时长优化,获得介导V-B表达的最优启动子tac-R0。接着利用RBS calculator设计核糖体结合位点(ribosomal binding site,RBS)和间隔序列(aligned spacing,AS)的突变文库,得到与tac-R0启动子搭配组合的最优RBS和AS,使V-B的产量提高至514 mg/L。此外,通过多基因表达盒的串联组合策略,将多个目的基因串联,最终V-B的产量较初始水平提高了8.4倍,达697 mg/L,该研究为重组胶原蛋白的工业化生产提供了基础。

院内制剂消风口服液联合苗特医用重组III型人源化胶原蛋白敷料治疗特应性皮炎对患者症状的改善评价

探究院内制剂消风口服液联合苗特医用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷料治疗特应性皮炎患者的应用价值。方法 选取2021年12月至2023年6月我院收治的特应性皮炎患者作为研究对象,共计60例,采用电脑抽号法作为分组方式将其分为两组,以研究组、常规组作为两组的命名,各30例,对研究组患者应用院内制剂消风口服液联合苗特医用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷料治疗,对常规组应用院内制剂消风口服液治疗,对比两组患者接受不同治疗措施后的差异性。结果 研究组患者的症状评分低于常规组,差异存在统计学意义(p<0.05);研究组患者的不良反应发生率低于常规组,差异存在统计学意义(p<0.05);研究组患者的皮损面积评分、皮损瘙痒评分、靶皮损面积低于常规组,差异存在统计学意义(p<0.05)。结论 为特应性皮炎患者提供院内制剂消风口服液联合苗特医用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷料治疗,这种方式的应用效果十分确切,值得临床推广应用。

苗特医用重组III型人源化胶原蛋白敷料在皮肤屏障受损引起的湿疹辅助治疗的疗效观察

分析苗特医用重组Ⅲ型人源化胶蛋白敷料在皮肤屏障受损引起的湿疹辅助治疗的应用价值。方法 将50例皮肤屏障受损引起湿疹患者分为各含有25例湿疹患者的观察组、对照组(时间:2022年2月至2023年5月;方式:电脑抽号法);前组应用苗特医用重组Ⅲ型人源化胶蛋白敷料联合蓝光治疗,后组应用蓝光治疗,对比两组不同。结果 观察组患者的皮损控制情况、炎性因子水平控制情况、治疗效果、生活质量等均高于对照组(p均<0.05)。结论 为皮肤屏障受损引起的湿疹提供苗特医用重组Ⅲ型人源化胶蛋白敷料辅助治疗,这种方式的治疗效果十分显著。

EDC/NHS交联重组胶原蛋白水凝胶修复关节软骨缺损

关节软骨损伤、缺损是一种常见且严峻的临床挑战,没有有效的治疗方法,基于胶原蛋白的水凝胶是软骨组织工程的研究热点之一,但在开发具有良好生物相容性且可安全交联的胶原蛋白产品,并提高软骨修复有效性方面仍然存在巨大挑战。将重组Ⅰ型胶原蛋白和重组Ⅲ型胶原蛋白通过EDC/NHS交联,制备了2种水凝胶,均表现出良好的三维孔隙结构以及优异的力学性能和可降解性。研究发现,重组Ⅰ型胶原蛋白水凝胶(Gel-Ⅰ)和重组Ⅲ型胶原蛋白水凝胶(Gel-Ⅲ)能促进人骨髓间充质干细胞(human bone-marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)糖胺聚糖的分泌,Gel-Ⅰ可以显著上调HBMSCs表达COLⅡ基因和SOX9基因,Gel-Ⅲ可以显著上调SOX9基因表达。在兔子膝关节软骨修复模型中,与对照组和Gel-Ⅲ组相比,Gel-Ⅰ组在骨体积大小方面表现出明显优势,软骨下骨已形成并有效恢复,小梁的数量和厚度最高,小梁分布更均匀,并且缺损处新软骨厚度与相邻软骨厚度相同。因此,Gel-Ⅰ在软骨修复有效性以及安全性方面具有极大的临床应用潜力。

超声骨刀微创拔牙法联合医用胶原蛋白海绵在下颌阻生牙拔除中的应用效果

目的 探究超声骨刀微创拔牙法联合医用胶原蛋白海绵应用于下颌阻生牙拔除的效果。方法 选取2020年12月至2022年12月四川省南充市中心医院收治的150例下颌阻生牙患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为两组,各75例。患者均采用超声骨刀微创拔牙法拔除患牙,对照组术中予以常规治疗,试验组术中联合医用胶原蛋白海绵治疗。术后30 min比较两组口腔出血情况;术后24、72 h,评估患者的口腔疼痛程度[视觉模拟评分法(VAS)];术后72 h评估两组开口受限程度;记录术后并发症。结果 试验组术后出血情况优于对照组(P<0.05)。两组不同时间点VAS评分比较,差异有统计学意义(P<0.05);术后24、72 h,试验组VAS评分低于对照组(P<0.05)。试验组术后开口受限严重程度优于对照组(P<0.05)。试验组术后并发症发生率均低于对照组(P<0.05)。结论 超声骨刀微创拔牙法联合医用胶原蛋白海绵应用于下颌阻生牙拔除的治疗中,更有助于降低患者术后的疼痛程度、出血率及并发症发生风险。

重组胶原蛋白妇科凝胶对大鼠宫颈炎的治疗作用

宫颈炎是一种多发的妇科疾病,给越来越多的女性带来困扰。临床上多采用抗生素治疗宫颈炎,该方式的不良反应较大。将重组胶原蛋白开发成局部外用的妇科凝胶剂,用于大鼠宫颈炎的治疗。实验利用25%苯酚胶浆诱导SD大鼠宫颈炎动物模型,再将重组胶原蛋白妇科凝胶以局部给药的方式注入阴道进行治疗,观察宫颈炎模型鼠外阴红肿情况及脓性分泌物的变化。采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)及马松(masson)染色检查大鼠组织病理变化和胶原沉积情况,通过免疫组化实验检测组织中IL-6、Ki-67蛋白的表达水平,以评价各治疗组对阴道和宫颈组织中炎症反应的调节及促细胞增殖作用。结果发现,与正常组相比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),阴道口红肿、有脓性分泌物流出(P<0.05),宫颈组织出现细胞变性、坏死脱落,大量炎性细胞浸润,IL-6蛋白表达水平显著上调(P<0.05),Ki-67表达水平降低(P<0.05)。与模型组相比,治疗后阳性对照组、GG01组、GG02组大鼠体重显著增加(P<0.05),阴道口红肿及分泌物量显著减轻(P<0.05),炎性细胞浸润明显减少,无明显水肿和充血现象,组织中显示胶原沉积及有序排列,且GG02组治疗效果更显著;GG02组和阳性对照组中IL-6和Ki-67表达水平与正常组接近,炎症反应降低,组织受损细胞增殖水平恢复。研究结果表明重组胶原蛋白妇科凝胶对大鼠急性宫颈炎有良好的治疗作用,为其临床应用提供了数据支持。

强脉冲光联合酵母重组胶原蛋白凝胶治疗面部糖皮质激素依赖性皮炎疗效观察

目的:探讨强脉冲光(Intense pulsed light,LPL)联合酵母重组胶原蛋白凝胶治疗面部糖皮质激素依赖性皮炎(Facial hormone dependent dermatitis,FHDD)的效果。方法:将2021年1月-2022年3月笔者医院收治的100例FHDD患者随机均分为观察组和对照组,每组50例。两组均采用IPL及其他常规措施治疗,观察组加涂酵母重组胶原蛋白凝胶治疗,对照组加涂安慰剂(酵母重组胶原蛋白模拟状凝胶)。比较治疗前后两组疗效、皮肤生理参数、血清炎症因子和免疫球蛋白水平、皮肤病生活质量指数(Dermatology life quality index,DLQI)。结果:观察组治疗总有效率80.00%高于对照组52.00%(P<0.05)。治疗后,两组经皮水分散失(Transepidermal water loss,TEWL)水平、血清白细胞介素(IL-4)、干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白(IgE、IgA、IgM)水平、DLQI量表评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。两组患者表皮皮脂含量和角质层含水量较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。随访6个月,观察组复发率5.00%低于对照组25.00%(P<0.05)。结论:IPL联合酵母重组胶原蛋白凝胶治疗FHDD效果确切,能改善皮肤生理参数,调节血清炎症因子和免疫球蛋白水平,提高患者生活质量。

浅谈Ⅱ类重组胶原蛋白创面敷料产品注册监管的思考

重组胶原蛋白为原料的Ⅱ类重组胶原蛋白创面敷料被广泛用于医疗领域。目前国家药监局及国家医疗器械技术审评中心颁布的关于重组胶原蛋白原料及Ⅱ类重组胶原蛋白创面敷料的相关标准及指导原则远不能满足Ⅱ类重组胶原蛋白敷料注册审评、生产质量控制及监管的需求。文章针对Ⅱ类重组胶原蛋白创面敷料注册审评、质量控制及监管等一些问题进行了思考及分析,并提出了建议,以期为医疗器械监管部门的决策提供一定参考。

重组Ⅲ型胶原蛋白在护肤品和药械领域的应用综述

Ⅲ型胶原蛋白是一种重要的结构蛋白,广泛存在于人体的皮肤、肌腱和血管等弹性组织中,对于维持皮肤弹性、促进伤口愈合以及保持血管的完整性具有至关重要的作用。随着生物技术的发展,利用重组DNA技术在微生物或细胞中定向生产高纯度和高活性的Ⅲ型胶原蛋白的生产模式已经得到应用,不仅提高了胶原蛋白的可用性和品质,还避免了潜在的动物源传染性疾病的风险。在护肤领域,基于其优越的生物相容性和促进皮肤再生的特性,重组Ⅲ型胶原蛋白成分被广泛添加到抗衰老、保湿和修复损伤皮肤等护肤品中。在医疗器械领域,重组Ⅲ型胶原蛋白被用作生物医用材料,凭借独特的生物活性和细胞吸附特性,在促进组织再生和愈合方面展现出了巨大的应用潜力。未来,随着研究的深入和技术的进步,重组Ⅲ型胶原蛋白将在美容和医疗领域得到更广泛的应用。