大健康背景下医药高职院校“生物化学”课程的教学探究

在大健康产业兴起的背景下,为适应医药高职院校人才培养目标,符合医药专业岗位需求,针对学生情况及生物化学课程内容特点,从培养学生的学习兴趣、医药专业岗位需求、多元化教学方法等方面进行了探讨,为找到提高教学质量的有效路径提供参考。

基于中医药化学生物信息学探讨归芪白术方抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的物质基础

目的利用药效团模型-分子对接-结合自由能计算的虚拟筛选策略结合细胞生物学实验的中医药化学生物信息学方法,挖掘归芪白术方中靶向磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositide 3-kinases,PI3K)抑制葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)细胞增殖的成分。方法构建PI3K抑制剂药效团模型,并对归芪白术方化合物进行虚拟筛选,对符合药效团模型的成分进行分子对接和结合自由能计算,选择潜在抑制成分进行生物学实验评价。利用CCK-8和克隆形成试验检测潜在抑制成分对UM细胞增殖的影响;流式细胞术检测UM细胞周期和凋亡情况;JC-10染色法检测UM细胞线粒体膜电位;Western blotting检测PI3K及下游通路蛋白表达。结果药效团模型包括2个氢键受体、2个芳环中心以及排除体积。CCK-8结果显示10、20、40、80μmol·L^(-1)槲皮素、川陈皮素、桔皮素,20、40、80μmol·L^(-1)桑辛素可抑制UM细胞的增殖。克隆形成试验显示不同浓度的槲皮素、川陈皮素、桔皮素、桑辛素均可明显抑制细胞的克隆增殖。流式细胞术结果显示桔皮素、槲皮素将细胞阻滞在G0/G1期,川陈皮素、桑辛素将UM细胞阻滞在G2/M期。JC-10染色法结果显示槲皮素、川陈皮素、桔皮素、桑辛素均可使UM细胞的线粒体膜电位降低,Western blotting结果显示4种化合物均可靶向PI3K发挥作用,但其影响的下游通路不同。结论本研究基于中医药化学生物信息学的方法挖掘了归芪白术方抑制UM细胞增殖的物质基础,为中药复方的现代化开发提供参考。