十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定饮料中红豆含量

目的建立十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)法定量分析植物蛋白饮料中红豆成分含量的方法。方法从8个主要蛋白条带中选取一个蛋白条带作为定量标记蛋白,配制红豆标准品进行SDS-PAGE实验,用Image J软件测量特征蛋白条带的灰度面积值,得到特征蛋白条带灰度面积与红豆含量关系的标准曲线。最后以市售红豆饮料为实际样品,检验该方法对于复杂样品的实用性。结果红豆含量在3~8 g/100 mL范围内,特征蛋白条带灰度面积与红豆含量呈良好的线性关系(r~2=0.9944)。向市售样品中添加2 g/100 mL标品,得到加标回收率为99.2%,相对标准偏差为1.68%(n=3)。结论该方法为红豆饮料中红豆含量的检测提供了一个可行的手段。日后,该方法可推广应用于其他以蛋白为标志物的饮料成分的定量测定。

燕窝的聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别

燕窝为雨燕科动物金丝燕ＣｏｌｏｃａｌｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａＬ．及同属多种动物用唾液与羽绒等混合凝结所筑成的干燥巢窝。随着需求量的日益增加，纯天然燕窝供不应求，用毛燕或用猪皮、白木耳、蛋清、动物骨胶以及海藻等伪制而成的加工品也不少。这些加工品已不是天...

免疫胶体金法与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测儿童腹泻A组轮状病毒

目的及早发现腹泻患儿中轮状病毒感染状况,为合理选用轮状病毒检测方法及其预防控制提供参考依据。方法采用胶体金法对武汉市儿童医院部分腹泻患儿进行轮状病毒检测,与聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)进行比较研究。结果对280份儿童腹泻患儿检测,胶体金法和PAGE法阳性检出率各为79.64%和48.93%,两者比较差异有显著性(P<0.05);以聚合酶链反应(PCR)为检测最终标准,胶体金法敏感性和PAGE特异性分别达95.2%和95.8%。结论胶体金法检测儿童腹泻轮状病毒敏感性高,在临床中可作为简便快速的重要筛检手段,PAGE能明显提高其鉴别诊断能力。

两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响

以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收。它们的灵敏度分别为500ng和5ng;蛋白质回收率分别为37.9％和74.4％。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法对猪皮水解胶原蛋白的分离

胶原由于其独特的结构、化学及生物学性质 ,被人们广泛用于食品、化妆品、医药等工业领域。因此 ,人们对胶原和胶原蛋白的水解产物进行了广泛深入的研究。其中胶原蛋白的水解产物的分离、分析 ,对进一步揭示水解作用机理、控制水解产物分子量的大小及对水解产物中不同分子量大小的各个组分的分离纯化具有重要意义。本文利用SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳法对猪皮水解胶原蛋白进行分离 ,在选择恰当的缓冲溶液体系、凝胶体系的基础上 ,对凝胶浓度、样品的浓度、进样量和染色的方法进行了大量的实验。结果表明采用SDS -聚丙烯酰胺电泳对胶原蛋白水解产物进行分离分析 ,在浓缩胶浓度3 % ,分离胶浓度 10 %的条件下 。

脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法的建立与应用

目的 :建立脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法用于测定脲酶分子量和纯度鉴定。方法 :建立十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PACE)梯度凝胶体系和电泳条件等 ,根据不同来源脲酶活性染色区带位置 ,鉴定出PAGE蛋白区带中脲酶区带位置 ,进一步测出脲酶的相对分子量。结果 :用新建立的SDS -PAGE脲酶活性区带染色方法 ,应用于不同来源的脲酶相对分子量测定和纯度鉴定 ,结果准确 ,重复性好 ,与凝胶过滤法测定分子量的结果相关性好。结论 :我们建立的SDS -PACE脲酶活性区带染色方法 ,应用效果良好 ,有推广价值。

高师生物化学实验个案教材设计及教法探讨——聚丙烯酰胺凝胶电泳法

用有关认知理论和教学理论,对高师生物化学实验———聚丙烯酰胺凝胶电泳法的实验教材进行了重新设计及教学实践。教材共设10个栏目,从多角度多方位激活原有知识,同化新知识,为过渡到智慧技能(应用技能)提供微环境,注重学生个性的发挥,注重培养学生自学能力及终身学习的习惯。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别牛蒡子及其伪品

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对牛蒡子及其伪品进行了鉴别,结果可靠,重复性强。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法快速检测植物源性食品中的蛋白成分

目的建立十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定核桃、杏仁、花生、大豆中的蛋白成分,并分析植物蛋白饮料中蛋白质的来源。方法采用一步法植物活性蛋白质提取试剂盒分别提取预处理后的核桃、杏仁、花生、大豆等样品中的蛋白质成分,计算蛋白质的相对分子量,之后分别进行SDS-PAGE检测得到这几种蛋白成分的特征条带,并对不同样品中蛋白成分的电泳图谱进行比对。结果每一物种都有相对应的蛋白指纹图谱,不同种类的核桃含有相同的蛋白质亚基,具有高同源性,但核桃与花生、黄豆和杏仁含有不同种类大小的蛋白,具有高特异性。结论本方法快速、准确、灵敏,可有效分析植物蛋白饮料中各类蛋白质的来源,对食品中植物源性成分的鉴定具有重要意义。

聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像法分离和检测血液红细胞中的HbA_0,HbA_1,HbA_2和HbF

建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像分离和检测蛋白质的新方法 .应用本方法分离和检测了新生儿脐带血和正常成年人血液红细胞中的不同血红蛋白HbA0 ,HbA1,HbA2 和HbF ,并与传统的考马斯亮兰染色法进行了比较 ,结果表明 ,本方法灵敏度高、背景低 ,步骤简单、快速 ,可以在 10min内得到检测结果 .此外 ,我们还以血红蛋白作为探针 ,检测了人血清蛋白 ,研究了人血清白蛋白对血红蛋白电泳结果的影响 ,并优化了发光成像的各种条件 .

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别哈蟆油药材及其伪品

目的建立哈蟆油与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油水溶性蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴别方法,并对2种电泳方法进行比较。方法采用Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳系统,分别对不同产地哈蟆油与其伪品的水溶性蛋白的组成及其分子量分布范围进行比较研究。结果 Native-PAGE实验结果显示:哈蟆油与桓仁林蛙油均具有6条特征谱带,黑龙江林蛙油具有5条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为2条、1条和1条。SDS-PAGE实验结果显示:哈蟆油、黑龙江林蛙油和桓仁林蛙油均具有11条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为5条、6条和6条。2种电泳图谱中,哈蟆油等正品药材与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油在特征谱带位置等特征上有明显区别。结论 Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳方法均可用于哈蟆油与类似品和伪品的鉴别,为哈蟆油质量评价和控制方法提供了一种简易的鉴别方法。

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别乌梅及其混杂品

利用ＰＡＧＥ聚丙烯酰胺凝胶电泳法对乌梅及其伪品山杏的种子，同属郁李仁进行了电泳鉴别研究。结果表明乌梅与苦李仁、郁李仁的电泳谱带数目、颜色、分布和泳动率均有明显的差别。苦杏仁与郁李仁也有种间差异。该方法为乌梅的鉴别和分类提供了新的依据与方法。

聚丙烯酰胺凝胶电泳及其在食品检测中的应用

聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷数量来进行分离。文中就其原理及在食品检测方面的应用做一简要概述。

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析切割海马伞大鼠海马组织蛋白

目的 :应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统研究切割海马伞后大鼠海马组织蛋白的生化改变 ,为分离、纯化海马中诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的信号物质奠定基础。方法 :取SD大鼠 ,行单侧切割海马伞术 ,于术后不同时期取切割侧海马和正常侧海马组织。进行 10 %的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。观察切割海马伞海马和正常海马的蛋白表达差异。结果 :两者在低分子量区存在一条差异性蛋白条带。其中正常海马组织的条带染色最浅 ,切割海马伞海马组织中 10天组和 2 0天组染色较深 ,14天组染色最深。结论 :结合我们过去实验 ,本研究中切割海马伞海马及正常海马组织蛋白出现的差异性条带中 。

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。

聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳中常见问题及克服方法

种子纯度是衡量杂交种子质量的主要指标．纯度低的种子给农业生产带来严重的损失。传统纯度鉴定多采用大田形态鉴定法，但它周期长、工作量大，有时无法及时满足经营工作的需要。近年来．生化标记和DNA分子标记技术得到日益广泛的应用．都是借助于聚丙烯酰胺凝胶电泳将具有品种特异性的谱带分离出来，进而判定纯度和真实性，具有速度快、时间短等优点．但电泳技术的熟练程度直接影响到电泳谱带的清晰度与分辨率。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法对导入后代重组个体的检测

组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,应用于验证和检测试材的DNA导入情况,通过观察导入后代与供体DNA的共同和差异谱带,来筛选含供体特异DNA谱带的导入后代。这项技术的研究是外源遗传物质导入育种技术不可缺少的一部分。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定种子纯度故障处理及预防办法

品种纯度在种子生产、加工、贮藏及经营贸易中具有重要意义和应用价值,纯度的高低在农业生产中对作物产量和品质都有很大影响。聚丙烯酰胺凝胶电泳法作为种子纯度检验方法之一,与田间纯度检验和田间小区种植鉴定相比具有方法简单易行、省时快速、成本低廉、测定准确等优点,但在使用过程中,经常会遇到一些故障或问题,影响实验的正常进行,甚至会严重影响鉴定结果,笔者经过多年实践,对其总结、分析和研究,现以杂交玉米种子纯度鉴定为例。

发光探针-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测人血清蛋白质

人血液组成复杂，其中所含蛋白质种类繁多且在临床检验中具有重要意义。聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前为止普遍使用的分析分离血液蛋白的方法，在血清蛋白质组学研究中是一个非常重要的分离手段。电泳后血清蛋白的检测方法很多，有考染法、银染法、有机荧光探针法、免疫方法等，但这些方法中，有的灵敏度低、选择性差、费时费力，有的设备复杂而且昂贵、步骤繁杂，