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二氟沙星光敏损伤溶菌酶的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究
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作者 李海霞 刘艳成 王文锋 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2021年第2期20-26,共7页
本文采用稳态光照的方法研究了二氟沙星药物对溶菌酶生物大分子的光敏损伤。研究发现,在315~375 nm波长的光照射下,二氟沙星药物能够光敏损伤溶菌酶类大分子物质。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析光照产物发现,生物大分子的... 本文采用稳态光照的方法研究了二氟沙星药物对溶菌酶生物大分子的光敏损伤。研究发现,在315~375 nm波长的光照射下,二氟沙星药物能够光敏损伤溶菌酶类大分子物质。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析光照产物发现,生物大分子的光敏损伤途径和损伤产物与二氟沙星药物的浓度、光照时间、光照气氛等条件密切相关。其他条件相同时,二氟沙星浓度越高,光照时间越长,光照对溶菌酶的损伤越严重;三种不同气氛(氮气、空气、氧气)条件下,氧气气氛对溶菌酶的损伤最严重。通过对不同气氛条件下损伤机理的研究发现,在氮气气氛条件下为Ⅰ型光敏损伤机制,在有氧气氛条件下是I型和Ⅱ型反应协同作用的结果,并以Ⅱ型反应为主。 展开更多
关键词 溶菌酶 二氟沙星 光敏损伤 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳
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SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳与液质联用技术分离和鉴定小鼠巨噬细胞膜蛋白
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作者 张领兵 伦艳妮 +4 位作者 于乐洋 闫东梅 马威 杜柏榕 朱迅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期77-82,共6页
用膜蛋白分离试剂盒提取巨噬细胞膜蛋白,然后用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳进行分离。将每个泳道平均切成8份,合并两个泳道同样位置的胶条,分别进行胶内酶解。酶解得到的多肽经脱盐后进入毛细管反相柱进行反相分离,分离后的肽段直接进入电... 用膜蛋白分离试剂盒提取巨噬细胞膜蛋白,然后用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳进行分离。将每个泳道平均切成8份,合并两个泳道同样位置的胶条,分别进行胶内酶解。酶解得到的多肽经脱盐后进入毛细管反相柱进行反相分离,分离后的肽段直接进入电喷离子源质谱仪进行一级和二级质谱分析。质谱数据用SEQUEST软件对小鼠IPI蛋白数据库进行检索,得到一个含有1000多种蛋白的名单,其中包括458种经GOA注释的膜蛋白。对膜蛋白部分进一步分析发现,其中包括CD11b、TNF-a、F4/80、CD14、CD18、CD86、CD44、CD16、Toll样受体等已知表达在巨噬细胞表面的蛋白分子,还包括另外13种CD分子和18种Ras相关GTPase,除了这些已知蛋白之外,还鉴定出若干新蛋白分子,为进一步深入研究巨噬细胞生物学功能提供了目标分子。 展开更多
关键词 巨噬细胞 膜蛋白 蛋白质组学 SDS-聚丙烯凝胶电泳 串联质谱
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采用聚丙烯酰氨凝胶电泳技术鉴别龟甲及其混伪品 被引量:9
3
作者 徐清 李梦 +5 位作者 罗雪梅 孟杰亲 张帆 陈秀芬 刘春生 杨瑶珺 《中国现代中药》 CAS 2019年第9期1251-1255,共5页
目的:从蛋白水平上对龟甲药材及其混伪品进行鉴别,分析龟甲及其混伪品的差异。方法:本研究采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对龟甲及其混伪品进行鉴别,并对龟甲的背甲与腹甲、不同批次正品龟甲药材进行对比分析。结果:对于同一品... 目的:从蛋白水平上对龟甲药材及其混伪品进行鉴别,分析龟甲及其混伪品的差异。方法:本研究采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对龟甲及其混伪品进行鉴别,并对龟甲的背甲与腹甲、不同批次正品龟甲药材进行对比分析。结果:对于同一品种的龟甲,其背甲与腹甲的蛋白质亚基相似,电泳得到的蛋白质条带几乎无明显差别;不同批次正品龟甲在一维电泳中显现出的蛋白亚基条带差异性很小,其电泳蛋白条带受产地、批次等因素影响较小;正品龟甲在14~19 kDa,有3条高丰度蛋白聚合在一起,这“二细一粗三聚合”的条带群,可以作为鉴别正品龟甲和其他龟甲混伪品的初步依据。结论:结果显示,SDS-PAGE电泳技术可以对龟甲及其混伪品药材进行初步的鉴别,利用蛋白条带的区别可对其进行区分。 展开更多
关键词 龟甲 混伪品 聚丙烯凝胶电泳 蛋白
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非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法临床应用探讨 被引量:6
4
作者 胡卫华 李铁臣 孙惠兰 《实用医学杂志》 CAS 2005年第4期425-427,共3页
目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即PCR-SSCP(PCR-Singlestrandconformationpolymorphism)银染分析技术。方法:应用改进的PCR-SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显... 目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即PCR-SSCP(PCR-Singlestrandconformationpolymorphism)银染分析技术。方法:应用改进的PCR-SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显子14的点突变情况。结果:非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳在有冷水循环装置控制下,结果稳定可靠,受环境温度影响小;但银染时,需根据室温调整染色时间及显影液的配制,当室温高于25℃时,碳酸钠需预冷,有利于控制背景色,得到更为满意的结果。结论:利用非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法筛查目的基因的点突情况,具有省时简便和灵敏可靠的特点,且重复性好,避免了盲目测序及资金浪费。 展开更多
关键词 非变性聚丙烯凝胶电泳 银染法 临床应用 聚合酶链反应 点突变
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毛细管电泳-激光诱导荧光检测法测定卡托普利和N-乙酰-L-半胱氨酸 被引量:4
5
作者 曹丽伟 石依卉 +2 位作者 魏甜 谭小芳 孟建新 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期217-221,共5页
建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中... 建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中,40℃下进行衍生反应10min。以荧光素为内标,25mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH=9.5)为电泳背景电解质,14min内达到基线分离。CAP和NAC的检出限分别为0.65nmol/L、0.76nmol/L。将该方法应用于人体尿液和血清中这两种物质的测定,回收率在97.0%~105.7%之间。 展开更多
关键词 毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测法 卡托普利 N--L-半胱 衍生
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聚丙烯酰胺凝胶DNA水平电泳检测多药耐药基因多态性 被引量:1
6
作者 徐建业 周琦 +1 位作者 马丽芳 吴立翔 《国际检验医学杂志》 CAS 2008年第12期1091-1092,1095,共3页
目的探讨聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)DNA水平电泳条件,分析多药耐药基因单核苷酸多态性(MDR1SNPs)。方法以DNA标准为标本探讨PAGE DNA水平电泳条件;PCR-限制性片段长度多态性作为健康人MDR1SNPs C3435T分析,PAGE DNA水平电泳作PCR产物酶切结... 目的探讨聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)DNA水平电泳条件,分析多药耐药基因单核苷酸多态性(MDR1SNPs)。方法以DNA标准为标本探讨PAGE DNA水平电泳条件;PCR-限制性片段长度多态性作为健康人MDR1SNPs C3435T分析,PAGE DNA水平电泳作PCR产物酶切结果分析。结果10 mL PAGE含40%过硫酸铵70μL,四甲基乙二胺20μL,隔绝空气在琼脂糖水平电泳槽制胶。交联度为29:1,凝胶浓度为7.5%时,效果最好。45例健康人MDR1C3435T中,20例为C/C型、T/C型17例、T/T型8例。结论PAGE DNA水平电泳简便易行,分离效果好,可用于MDR1SNPs分析,适合基层推广。 展开更多
关键词 基因 MDR 多态性 单核苷酸 电泳 聚丙烯凝胶
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薏苡仁蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 被引量:2
7
作者 崔雪莹 相美容 +2 位作者 武皓 容蓉 蒋海强 《山东中医杂志》 2017年第2期155-157,共3页
目的:比较酸沉前后蛋白种类的差异,获取薏苡仁蛋白分子量的信息。方法:采用碱溶酸沉法制备薏苡仁蛋白,SDS-PAGE电泳分离蛋白,标准曲线法计算分子量信息。结果:得到了6种薏苡仁水溶性蛋白条带,确定了其分子量分别是91.598,77.169,39.839,... 目的:比较酸沉前后蛋白种类的差异,获取薏苡仁蛋白分子量的信息。方法:采用碱溶酸沉法制备薏苡仁蛋白,SDS-PAGE电泳分离蛋白,标准曲线法计算分子量信息。结果:得到了6种薏苡仁水溶性蛋白条带,确定了其分子量分别是91.598,77.169,39.839,28.977,23.822,16.100 k Da,对比了薏苡仁蛋白酸沉前后的变化,即酸沉后缺失了23.822 k Da和16.1 k Da两个条带。结论:该方法得到的谱图清晰,重现性好,对薏苡仁蛋白分离与分析的研究有着重要的指导意义。 展开更多
关键词 薏苡仁蛋白 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳 分子量
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浅析聚丙烯酰氨凝胶电泳实验中常见问题及解决方法
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作者 毛秀荣 李雷 +5 位作者 朱俊 邓继武 石榴 朱勇强 祝陈英 郭丹蝶 《四川农业科技》 2022年第7期95-96,102,共3页
以四川省达州市主要农作物(水稻、玉米等)种子质量检测检验和园艺植物(果树、茶等)种质资源鉴定、性状分析时,基于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的PCR扩增产物检测试验中存在的常见问题,探索可操作性的解决方法,以期为同行提供一些帮助和启示。
关键词 聚丙烯凝胶电泳 电泳 种业提升 农作物
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丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸三肽吸附低密度脂蛋白的机理的探讨
9
作者 余喜讯 许映霞 +1 位作者 万昌秀 乐以伦 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期188-192,共5页
以聚丙烯酰胺(PAM)微球为载体,丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸(SDE)三肽为配体,通过两种方法将配体偶联到载体上制成吸附剂。采用体外静态吸附法检测吸附剂的吸附效果,考察SDE三肽仿生吸附剂对低密度脂蛋白(LDL)的吸附并探讨其机理。结果表明:... 以聚丙烯酰胺(PAM)微球为载体,丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸(SDE)三肽为配体,通过两种方法将配体偶联到载体上制成吸附剂。采用体外静态吸附法检测吸附剂的吸附效果,考察SDE三肽仿生吸附剂对低密度脂蛋白(LDL)的吸附并探讨其机理。结果表明:两种方法制备的吸附剂对LDL都有一定的亲和吸附能力,Ca2+可通过桥接LDL所含磷脂极性头部的磷酸基团和吸附微珠配体上的羧基及交联相邻LDL磷脂间的磷酸基团,增大LDL吸附到吸附微珠上的机率,进而提高其吸附率。用戊二醛固定化配体制成的吸附剂因表面含有更多能与LDL相互作用的基团(COOH),更有利于LDL的吸附。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 聚丙烯胺微球 -天冬-酸三肽
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N-乙酰半胱氨酸防治内毒素所致肝损伤的实验研究
10
作者 吴虎山 许瑞龄 《山西医药杂志》 CAS 2005年第1期27-28,共2页
目的 探讨N 乙酰半胱氨酸 (NAC)可否对内毒素性肝损伤进行抑制及相应的细胞、分子机制。方法 健康雄性昆明种小鼠 30只随机分为肝损伤组、NAC组和对照组 ,不同给药后检测肝匀浆肿瘤坏死因子(TNF) α、丙二醛 (MDA)和还原型谷胱甘肽 (... 目的 探讨N 乙酰半胱氨酸 (NAC)可否对内毒素性肝损伤进行抑制及相应的细胞、分子机制。方法 健康雄性昆明种小鼠 30只随机分为肝损伤组、NAC组和对照组 ,不同给药后检测肝匀浆肿瘤坏死因子(TNF) α、丙二醛 (MDA)和还原型谷胱甘肽 (GSH)含量变化 ,并行聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,分析NAC对核因子(NF) κBp6 5、IκBα的影响。 结果 NAC不但使肝组织TNF α、MDA含量降低 ,GSH含量升高 ,且抑制了内毒素诱导胞质IκBα降解和NF κBp6 5的表达。 结论 NAC可能通过调整库普弗细胞氧化还原平衡 ,影响NF κBp6 5活化 (核易位 ) ,从而抑制了TNF α等炎性因子基因的表达 ,减轻肝损伤。 展开更多
关键词 肝损伤 N-半胱 NAC IKBΑ NF-kB TNF-α 内毒素 雄性 细胞 聚丙烯胺凝胶电泳
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枣树叶片蛋白质提取及SDS-PAGE单向电泳条件优化 被引量:6
11
作者 杜绍华 卜志国 《安徽农业科学》 CAS 2012年第13期7631-7632,7655,共3页
[目的]对枣树叶片蛋白质提取方法及其SDS-PAGE单向电泳条件进行优化。[方法]对枣树5种蛋白质提取方法和影响SDS-PAGE单向电泳的因素进行比较研究。[结果]改良丙酮沉降法提取出的蛋白质杂质较少,条带数量多且清晰,同时通过研究确定了一... [目的]对枣树叶片蛋白质提取方法及其SDS-PAGE单向电泳条件进行优化。[方法]对枣树5种蛋白质提取方法和影响SDS-PAGE单向电泳的因素进行比较研究。[结果]改良丙酮沉降法提取出的蛋白质杂质较少,条带数量多且清晰,同时通过研究确定了一套适用于枣树蛋白检测的SDS-PAGE凝胶制备及电泳方法。[结论]该研究为进一步从分子生物学的角度研究枣树与枣疯病植原体的互作机制提供了技术的基础。 展开更多
关键词 枣树 蛋白提取 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳
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鳖甲炮制前后抗肝纤维化活性部位的SDS-PAGE凝胶电泳比较研究 被引量:1
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作者 高建蓉 胡祖良 +3 位作者 施静妮 唐尹萍 刘焱文 胡春玲 《中国药师》 CAS 2017年第9期1543-1544,1563,共3页
目的:探讨鳖甲炮制前后抗肝纤维化活性部位的差异,为鳖甲药材的临床用药提供依据。方法:运用SDS-PAGE技术,对生鳖甲与醋鳖甲活性部位进行分析比较;采用MTT比色法测定生鳖甲与醋鳖甲对HSC-T6增殖的影响。结果:炮制后的醋鳖甲所含成分增多... 目的:探讨鳖甲炮制前后抗肝纤维化活性部位的差异,为鳖甲药材的临床用药提供依据。方法:运用SDS-PAGE技术,对生鳖甲与醋鳖甲活性部位进行分析比较;采用MTT比色法测定生鳖甲与醋鳖甲对HSC-T6增殖的影响。结果:炮制后的醋鳖甲所含成分增多,一级谱带相对分子质量降低,导致小分子肽类物质产生;生鳖甲和醋鳖甲均具有抗肝纤维化的作用,但醋鳖甲的药效优于生鳖甲。结论:鳖甲炮制前后活性部位明显差异,为临床选择用药及进一步活性成分研究提供依据。 展开更多
关键词 鳖甲 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳 活性部位
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半胱氨酸合成酶与β-氰基丙氨酸合成酶活性检测 被引量:4
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作者 焦成瑾 赵菲佚 +2 位作者 谢尚强 袁毅君 杨玲娟 《氨基酸和生物资源》 CAS 2014年第4期66-72,共7页
植物半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CSase)和β-氰基丙氨酸合成酶(β-cyanoalanine synthase,β-CAS)分别催化合成半胱氨酸(Cysteine,Cys)和β-氰基丙氨酸(β-Cyanoalanine,β-CA),它们在功能上冗余。本研究以山黧豆、苜蓿和玉米为... 植物半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CSase)和β-氰基丙氨酸合成酶(β-cyanoalanine synthase,β-CAS)分别催化合成半胱氨酸(Cysteine,Cys)和β-氰基丙氨酸(β-Cyanoalanine,β-CA),它们在功能上冗余。本研究以山黧豆、苜蓿和玉米为主要材料,结合电泳对8种常见植物CSase和β-CAS粗酶活性进行了分析。结果表明,检测CSase活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为10min,最适pH均为8.0,底物O-乙酰-丝氨酸和Na2S最适浓度分别是10和5 mmol·L-1。检测β-CAS活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为30min,最适pH均在9~10范围内,底物Cys最适浓度均为3mmol·L-1,而底物KCN最适浓度前者为80mmol·L-1,后者为3mmol·L-1。8种植物中,CSase活性在种、种内组织间差别不是很大,但β-CAS活性则相反,尤其在茎叶和根中差别较大。 展开更多
关键词 L-半胱酸合成酶 β-氰基丙酸合成酶 酶活性 非变性聚丙烯胺凝胶电泳
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尿蛋白普通琼脂糖凝胶电泳与SDS-PAGE的比较
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作者 刘燕飞 陈筱菲 +1 位作者 刘存丽 袁谦 《检验医学教育》 2007年第3期45-48,共4页
目的:评价尿蛋白普通琼脂糖凝胶电泳(AGE)的临床价值。方法:采用普通AGE检测305例患者尿蛋白,其中112例做十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),两者进行比较,并结合患者的临床和病理诊断分析。结果:普通AGE图谱可分为五种类型... 目的:评价尿蛋白普通琼脂糖凝胶电泳(AGE)的临床价值。方法:采用普通AGE检测305例患者尿蛋白,其中112例做十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),两者进行比较,并结合患者的临床和病理诊断分析。结果:普通AGE图谱可分为五种类型,对应于SDS-PAGE的四种蛋白尿类型,分别为肾小管性蛋白尿、肾小球性蛋白尿、混合性蛋白尿和溢出性蛋白尿。结论:普通AGE能很好地判断肾小管性蛋白尿,较好地判断大部分肾小球性蛋白尿和混合性蛋白尿,很好地判断溢出性蛋白尿。 展开更多
关键词 蛋白尿 普通琼脂糖凝胶电泳 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳
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Glu-1和Glu-3等位变异对小麦加工品质的影响 被引量:54
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作者 刘丽 周阳 +3 位作者 何中虎 阎俊 张艳 Pea R J 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期959-968,共10页
Glu 1位点等位基因编码的高分子量麦谷蛋白亚基 (HMW GS)和Glu 3位点等位基因编码的低分子量麦谷蛋白亚基 (LMW GS)是决定小麦加工品质的重要因素。用优质面包小麦中优 95 0 7的两个杂交组合 ,即中优 95 0 7/鲁麦 5号和中优 95 0 7/晋麦... Glu 1位点等位基因编码的高分子量麦谷蛋白亚基 (HMW GS)和Glu 3位点等位基因编码的低分子量麦谷蛋白亚基 (LMW GS)是决定小麦加工品质的重要因素。用优质面包小麦中优 95 0 7的两个杂交组合 ,即中优 95 0 7/鲁麦 5号和中优 95 0 7/晋麦 4 5F5代 ,澳大利亚优质面包小麦Sunstate的两个杂交组合 ,即Sunstate/济南 16和Sunstate/鲁麦 2 1F2 代 ,研究了Glu 1和Glu 3位点等位变异对小麦加工品质的影响。结果表明 ,当材料为非 1BL/1RS易位系时 ,位点对小麦加工品质的贡献大小为Glu D1>Glu A3≥Glu B1;当材料为 1BL/1RS易位系时 ,位点对小麦加工品质的贡献大小为Glu B3>Glu D1>Glu A1。 1BL/1RS易位对SDS沉降值、和面时间和耐揉性均有显著负面影响。就单个亚基而言 ,Glu A1位点 1>N ,Glu B1位点 17+18>7+8>7+9,Glu D1位点 5 +10 >2 +12、3+12和 4 +12 ,Glu A3位点GluA3d和GluA3b >Glu A3a ,Glu B3位点GluB3d >GluB3b和GluB3h >GluB3j。亚基组合为 1、7+9、5 +10、GluA3d、GluB3b和 1、7+8、5 +10、Glu A3d、GluB3d的材料 ,加工品质优良 ,亚基组合为 1、7+8、2 +12、GluA3a、GluB3d和N、7+9、3+12、GluA3d、GluB3j的材料加工品质较差。 展开更多
关键词 普通小麦 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳 高分子量麦谷蛋白亚基 低分子量麦谷蛋白亚基 IBL/IRS易位 加工品质
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SDS-PAGE-薄层扫描联用法测定3种不同来源的乳铁蛋白 被引量:9
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作者 邢志恩 王军 +2 位作者 戴蕴青 陈燕卉 陈敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第16期274-278,共5页
目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel e... 目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100~2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。 展开更多
关键词 牛乳铁蛋白 重组人乳铁蛋白 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 薄层扫描
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不同地区板蓝根蛋白SDS-PAGE分析 被引量:3
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作者 杨欣 王秋红 +3 位作者 王悦 郭慧 邢娜 匡海学 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第7期86-88,共3页
目的采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术鉴别不同地区板蓝根,为板蓝根药材的鉴别和质量评价提供依据。方法采用SDS-PAGE技术,建立黑龙江和河北地区板蓝根蛋白图谱。结果黑龙江板蓝根蛋白约含13条亚基,主要为10.5 kD、... 目的采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术鉴别不同地区板蓝根,为板蓝根药材的鉴别和质量评价提供依据。方法采用SDS-PAGE技术,建立黑龙江和河北地区板蓝根蛋白图谱。结果黑龙江板蓝根蛋白约含13条亚基,主要为10.5 kD、23.0 kD、24.9 kD、44.1 kD 4种亚基,河北板蓝根蛋白约含12条亚基,主要为55.6 kD、45.9 kD、34.3 kD、18.9 kD、12.4 kD、10.5 kD 6种亚基。结论 SDS-PAGE技术可以用于鉴别不同地区的板蓝根。 展开更多
关键词 板蓝根 鉴别 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳
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SDS-PAGE制备凝胶纯化鼠疫菌Pla蛋白 被引量:3
18
作者 石丽媛 杨光璨 +1 位作者 董珊珊 于国林 《医学动物防制》 2008年第12期906-907,共2页
目的用制备电泳分离纯化鼠疫菌纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)。方法用距离测量的方式来定位Pla三条带的位置。结果制备电泳纯化的Pla主要由相对分子质量约31×103、35×103、37×103的三条带组成,未检测到... 目的用制备电泳分离纯化鼠疫菌纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)。方法用距离测量的方式来定位Pla三条带的位置。结果制备电泳纯化的Pla主要由相对分子质量约31×103、35×103、37×103的三条带组成,未检测到活性。结论Pla经制备电泳分离可以达到基本纯化。 展开更多
关键词 十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳 制备 纤溶酶原激活因子
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抗IL-4R单链抗体原核表达载体的构建与表达 被引量:1
19
作者 杨光勇 刘茜明 +2 位作者 刘莉莉 王文佳 何光志 《天津医药》 CAS 2017年第9期897-901,共5页
目的通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv)。方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表... 目的通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv)。方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表达菌进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析检测,对表达蛋白进行纯化和复性,通过SDS-PAGE分析抗IL-4R单链抗体的分子质量,运用Western blot检测融合蛋白的特异性。结果插入pET-32a载体的scFv序列长度761 bp,抗IL-4R单链抗体的分子质量在45 ku左右,重组蛋白具有较高的特异性。结论本实验成功构建pET32a-scFv原核表达系统,重组蛋白具有较高的免疫反应性,为进一步研究抗IL-4R单链抗体作为药物靶点提供了工作基础。 展开更多
关键词 受体 白细胞介素4 重组蛋白质类 电泳 聚丙烯凝胶 单链抗体 原核表达 INTERLEUKIN-4
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子宫肌瘤蛋白质组研究中二维电泳方法的建立
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作者 朱雪琼 石一复 +1 位作者 陈怀增 陈琪 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期550-553,564,共5页
目的 :建立并优化用于子宫肌瘤蛋白质组分析的二维电泳技术 ,提高其分辨率和重复性。方法 :以固相p H梯度等电聚焦为第一向 ,采用垂直十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向 ,并对关键步骤如样品的溶解、上样量、电泳参数和染色... 目的 :建立并优化用于子宫肌瘤蛋白质组分析的二维电泳技术 ,提高其分辨率和重复性。方法 :以固相p H梯度等电聚焦为第一向 ,采用垂直十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向 ,并对关键步骤如样品的溶解、上样量、电泳参数和染色方法进行一系列的优化。结果 :获得质量较好的子宫肌瘤和正常肌层的二维电泳图谱。结论 :采用蛋白溶解度增强的裂解液分步提取组织的蛋白质 ,有利于二维电泳图谱的完整性 ;RC DC蛋白定量方法是二维电泳较为理想的蛋白定量方法 ,直接关系到上样量 ;质谱兼容银染法并不降低蛋白斑点的分辨率 ;窄范围(p H 4~ 7)的 IPG胶条较宽范围 (p H 3~ 10 )的 IPG胶条具有较高的分辨率。 展开更多
关键词 子宫肿瘤 子宫肌瘤 肿瘤蛋白质类/分析 电泳 聚丙烯凝胶 二维电泳技术
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