十二节杆菌胞外脂肪酶的纯化和性质研究

十二节杆菌发酵得到的胞外脂肪酶,在5L发酵罐经过34h培养,最高酶活可达75 U/mL。通过硫酸铵梯度沉淀和疏水层析纯化,脂肪酶纯化26倍,总得率24.3%。SDS-PAGE显示脂肪酶分子量为33 kD,脂肪酶在40℃和pH 7.0时酶活力最高,同时在24℃经过48h仍保持一半左右的活力。该脂肪酶的酶活受K+,Mg2+激活,而受Zn2+与Co2+的抑制。

第十二节:简易妙杀法

在古谱中,有一些十分简单的棋局,却能永世不衰,长期流传。比如《适情雅趣》谱中的“一虎下山”与“停车问路”等。虽然着法浅显,却因其主题鲜明,给人留下深刻的印象。 古人给予我们的启示是无论保存整理实战棋局。

广东蚊东南亚十二节段病毒属芒市病毒的分离与鉴定

为了解广东蚊携带虫媒病毒的情况,2014年6月在汕头市濠江区采集蚊标本,用细胞培养法分离病毒,对病毒分离物进行形态学、基因组带型和分子生物学鉴定,测定S1、S2、S3片段序列,并对序列进行同源性和系统进化分析。从采集到的蚊中分离到2株致C6/36细胞产生病变的分离物(编号为GD1和GD7)。电镜观察显示,完整病毒颗粒呈球形,直径约66 nm,无包膜。琼脂糖凝胶电泳结果显示,GD1和GD7两株新分离病毒基因组为12节段,其带型与2015年仅在云南新分离出的东南亚十二节段病毒属芒市病毒相似。新分离的2株病毒GD1和GD7的S1、S2、S3片段核苷酸序列同源性均为100%,与芒市病毒DH13M041核苷酸序列同源性最高,均为98.2%、99.2%、98.5%,而与十二节段病毒属中其他病毒如版纳病毒、辽宁病毒、卡皮罗病毒和Balaton病毒核苷酸序列同源性分别低于69.1%、62.7%、57.6%。GD1和GD7两株病毒S1、S2、S3片段核苷酸序列系统进化分析结果均显示,2株新分离病毒的亲缘关系最近,且与芒市病毒DH13M041位于同一分支上,亲缘关系较近,而与东南亚十二节段病毒属其他病毒具有明显差异。提示这2株广东新分离病毒为芒市病毒,这是除云南以外地区首次分离到该病毒,此次在广东分离到芒市病毒扩大了对东南亚十二节段病毒属病毒地域分布的了解。

东南亚十二节段双链RNA病毒的分子进化及基因组结构特征分析

目的了解东南亚十二节段双链RNA病毒(South-East Asian dodeca RNA viruses,Seadornavirus)的分子进化规律及遗传差异。方法基于Seadornavirus衣壳蛋白基因组序列进行同源性、系统进化、理化性质、抗原表位预测以及三级结构和表面电荷分布的分析。结果Seadornavirus的最近共同祖先大约于2359年前,分为3个进化簇,其进化时间分别为约距今1338、499、253年前,其平均核苷酸替换率为3.6×10-4n/s/y。Seadornavirus 3种病毒之间的核苷酸与氨基酸同源性分别是31.3%~100%(μ=68.0%)和11.9%~100%(μ=56.0%)。理化性质和抗原表位分析显示,版纳病毒(Banna virus,BAV)衣壳蛋白为酸性疏水性蛋白质,存在6个B细胞表位和2个Th抗原表位,而辽宁病毒(Liaoning virus,LNV)和卡迪皮诺病毒(Kadipiro virus,KDV)为碱性亲水性蛋白质,分别存在3和5个B细胞抗原表位,其中LNV仅有1个Th抗原表位,KDV病毒则不存在。三级结构以及蛋白表面电荷分析显示,Seadornavirus的α螺旋和β折叠各不相同,并且BAV有2个明显的带正电荷区域和2个带负电荷的区域,LNV只有1个带正电荷区域,KDV则有2个带正电荷区域。结论Seadornavirus进化速率快,并且其基因组、衣壳蛋白抗原表位、理化性质、三级结构等具有较大的差异。

议程设置理论应用研究--以“双十二”购物节为例

继2019年"双十一"线上交易成交额达到2648亿新高后,"双十二"的营销额并没有因为刚刚过去的"双十一"疯狂输出而降低分毫,"博主直播带货""平台购物津贴""微博发布话题"等双十二营销手段层出不穷,本文将从议程设置理论对电商们"双十二"的成功营销策略进行探讨。

一孔之见——试评郭老所译葛雷《墓园挽歌》第一节

The curfew tolls the knell of parting day, The lowing herd wind slowly o’er the lea. The ploughman homeward plods his weary way, And leaves the world to darkness, and to me. 这四句诗,语言和谐,节奏明快,韵脚刚健、低沉;它把读者的思维引进了薄暮溟溟之中。

康熙十七年《南书房记注》

南书房为清代内廷机构之一。原为康熙帝读书处,康熙十六年(1677),侍讲学士张英、内阁学士衔高士奇被选入乾清门内南书房当值,为南书房入值之始。入值者或与皇帝讲求学业,讨论政事,或秉承皇帝旨意拟写谕旨,故而,南书房成为内廷清要之地。 《南书房记注》以日记的形式记录了君臣对学术、政治、经济等多个侧面的讨论,于康熙帝为政治世之道多有涉及。本组史料选自馆藏宫中档案,现予发表,以供研究者参考。

康熙十八年《南书房记注》

本刊1995年第三期登载康熙十七年《南书房记注》后,受到许多读者的关注。这里续发康熙十八年《南书房记注》,供研究参考。

康熙十九年南书房记注(一)

康熙十七年,十八年、十九年三年的南书房记注为馆藏宫中档案,亦为南书房记注中较为完整的部分,这里续发康熙十九年南书房记注,以飨读者。——编选者

《灵枢·官针》论“输刺”的临床应用

众所周知,在<灵枢·官针>有"九刺""十二刺""五刺"之言,三者均有"输刺"一法,其字相同,但其意各异.它们在针刺手法和配伍治病上不同,在临床上各自发挥其特殊的作用.……

“五虎擒羊”针法治疗体会

“五虎擒羊”针法治疗体会口锁堂甘肃中医学院附院“五虎擒羊”针法就是《灵枢官针》篇所述“十二节刺”中的“扬刺”。文中云“扬刺者，直入一傍入二，以治寒气小深者。”或曰“三刺，三刺者，治寒气小深者。”具体针法就是中间先刺一针，然后再向四周各浅刺一针，刺的部...

浅析《药品经营质量管理规范》(2012版)药品批发的质量管理

1浅析2012版GSP药品批发的质量管理1.1架构药品批发的质量管理共分十四节：第一节质量管理体系;第二节组织机构与质量管理职责;第三节人员与培训;第四节质量管理体系文件;第五节设施与设备;第六节校准与验证;第七节计算机系统;第八节采购;第九节收货与验收;第十节储存与养护;第十一节销售;第十二节出库;第十三节运输与配送;第十四节售后管理。

农业系统工程基础系列讲座第十讲

第十二节 线性规划的对偶原理每一个线性规划问题,都伴随着另一线性规划问题,二者互为对偶。其中的一个称为原问题,另一个问题称为其对偶问题。如果得到了一个问题的解,也就得到了另一问题的解。对偶这种现象相当普遍。例如,我们可以问当四边形的周长一定时,什么形状的面积最大?这当然是正方形。我们也可以这样来问:四边形的面积一定时。

短刺的历史演绎运用

针刺方法是针刺过程中的一个重要环节,短刺源于秦汉时期针灸理论奠基之作《灵枢经》。短刺法是"十二节刺"中的一种针法,主治骨痹等邪聚深处的疾患操作时应深刺,包含摇法及提插捻转的行针手法,既有针至病所之用,也有气至病所之意,经过历史沉淀,至今仍被当代医家在临床使用并发展,但短刺法也有其不足之处。本研究通过梳理短刺法的起源、主治疾患、操作手法、作用原理和发展应用,探究短刺的历史演绎运用,对规范短刺标准化操作:进一步探究短刺作用机制、精进短刺新型针具和拓展短刺疾病谱起着重要作用,以期提高针刺疗效。

会计常见的职业病(二)

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《鼠》——田间一首被遗志的长诗

在抗战前期火炽的斗争中,田间的创作力特别旺盛,但仅结集出版过《呈在大风砂里奔走的岗卫们》(丁玲序),《给战斗者》(胡风编)及长诗《她也要杀人》,还有很多篇失散见于当时大后方及抗日民主根据地的一些报刊上。这首注明“42年秋于晋察冀”的长达一千四百多行的叙事诗《鼠》即为其中重要的篇。这里介绍的稿本见于47年3月出版《呼吸》第三期。全诗凡七章八十二节。诗前有《序》,《本事》,《人民之格言》。