小麦-十倍体长穗偃麦草双重异代换系的分子细胞遗传学及抗条锈病鉴定

十倍体长穗偃麦草[Thinopyrum ponticum(Popd.)Barkworth and Dewey]具有抗寒、抗旱、耐盐碱、茎秆粗壮、穗长花多等优异性状,是小麦遗传改良的重要基因资源。本课题组从小麦与十倍体长穗偃麦草的杂交后代中筛选出一份抗条锈病的衍生系CH18067,本研究对其进行形态学、细胞学、原位杂交、分子标记、抗条锈病性等综合鉴定。细胞学观察结果显示,CH18067的体细胞染色体数目为42条,在减数分裂中期Ⅰ的染色体构型为2n=21Ⅱ,在减数分裂后期Ⅰ同源染色体可均等分离,表明其细胞学遗传稳定。利用寡核苷酸探针Oligo-pTa535(红色)和Oligo-pSc119.2(绿色)对CH18067进行FISH鉴定,结果显示,CH18067缺失小麦2D和4D染色体,同时含有2对具有特殊带型的染色体;通过对CH18067进行FISH-GISH、mc-GISH、液相芯片以及染色体核型分析,发现2对具有特殊带型的染色体中,在长臂和短臂末端均呈现Oligo-pTa535探针红色带型的染色体为十倍体长穗偃麦草的2J染色体,在着丝粒位置和长臂末端均呈现Oligo-pTa535探针红色带型的染色体为十倍体长穗偃麦草的4J^(S)染色体,说明CH18067为小麦-十倍体长穗偃麦草2J(2D)+4J^(S)(4D)双重异代换系。在第二部分同源群和第四部分同源群分别筛选出3个特异性标记,可用于追踪小麦遗传背景中长穗偃麦草的2J和4J^(S)染色体。形态学和条锈病抗性鉴定结果显示,CH18067具有矮秆、长粒等特性,且在成株期高抗小麦条锈病。以上结果表明,CH18067可作为小麦条锈病抗性育种和遗传研究的候选种质。

中国十倍体割手密资源的表型相关性及遗传多样性

为有效评价和利用十倍体割手密资源,挖掘其优异性状,选取中国6个省9个地区的171份十倍体割手密资源,针对8个质量性状指标和8个数量性状指标,对其多样性指数、变异系数、数量性状间的相关性、数量性状与纬度和海拔的相关性进行研究。表型相关性分析结果表明:十倍体割手密资源质量性状的Shannon–Wiener多样性指数整体偏低,采自滇中地区的多样性指数(0.636 6)最高,而采自滇西北地区的多样性指数(0.335 8)最低;数量性状的遗传变异较丰富,变异系数最大的为滇西南地区的资源(33.06%),最小的为贵州的资源(22.12%);产量性状与海拔和纬度呈负相关,糖分性状与海拔呈负相关,与纬度呈正相关,纤维分仅与海拔呈正相关;产量性状之间和糖分性状之间均呈正相关。遗传结构分析结果表明:表型性状的遗传变异主要来自于采集地区内部,采集地区之间有明显的基因交流(基因流值Nm>3),遗传分化不明显。聚类分析结果表明:表型性状与采集地的地势有一定关系,高地势的滇东北地区和滇西北地区聚为一个小类群,低地势的滇东南、滇西南、川东南、广东地区聚为一个大类群。

普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种抗赤霉病基因的分子鉴别

【目的】赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是世界范围内严重危害小麦生产的病害之一。十倍体长穗偃麦草(Thinopyrum ponticum)具有优良的赤霉病抗性,普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种西农509、西农511和西农529在田间展现出较强的赤霉病抗性。本文旨在对这3个品种的赤霉病抗性基因进行分子鉴别,为它们在小麦赤霉病抗性遗传改良中的应用提供理论依据。【方法】通过赤霉病菌(Fusarium graminearum)人工接种鉴定,明确3个小麦新品种对赤霉病的抗性水平。利用偃麦草E组染色体(臂)第1—7同源群的特异引物对3个普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种及其主要亲本小偃693、小偃597和十倍体长穗偃麦草进行分子鉴定,确定其长穗偃麦草的遗传区段。利用与长穗偃麦草7EL染色体上抗赤霉病基因Fhb7紧密连锁的标记对实验材料进行分析,明确该抗性基因与Fhb7的关系。【结果】鉴定结果表明,西农509、西农529和西农511的赤霉病抗性与中抗对照品种扬麦158的抗性水平相当,表现为中抗。105个长穗偃麦草E基因组特异标记中有7个在3个新品种中均能扩增出长穗偃麦草的特异条带,其中5个标记定位于7EL染色体臂上,2个标记定位于7ES染色体臂上。利用97个定位于7E染色体的特异标记进一步对小偃693、小偃597和3个新品种的遗传片段进行鉴别,结果表明20个标记能在5个长穗偃麦草衍生品种(系)扩增出稳定的十倍体长穗偃麦草的特异条带,其中包括与Fhb7紧密连锁的Xsdau K8、Xsdau K144、Xsdau K27、Xsdau K99、Xcfa2040和Xsdau K116等6个标记(7EL 149.00—7EL 153.77),即表明该区段源自于十倍体长穗偃麦草,跨距约89 c M。然而,已报道的7EL染色体臂末端与Fhb7两侧紧密连锁的分子标记Xsdau K60(7EL 153.77)、Xmag1932(7EL 154.70)、Xcfa2240(7EL 156.27)、Xsdau K66(7EL 158.02)、Xsdau K71(7EL 158.97)和Xsews19(7EL 160.00)等在3个新品种及小偃597中均没检出长穗偃麦草的特异条带。【结论】普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种西农509、西农511和西农529具有较好的赤霉病抗性,携带来自于十倍体长穗偃麦草7E染色体的遗传区段,然而该抗赤霉病基因不同于Fhb7。

中国十倍体割手密资源抗逆功能标记的遗传多样性分析

整倍体割手密是现代甘蔗品种重要的野生亲本和抗逆性状基因源,为了明确其抗逆相关基因的遗传背景,该研究选用来自脱水绑定因子DREB、水通道蛋白AQP、热激蛋白HSP70、WRKY1转录因子和随机引物组成的5对抗旱和耐高温相关功能标记,以63份甘蔗常用亲本材料和8份甘蔗原种作为对照,对中国保育的50份十倍体割手密（Saccharum spontaneum L.）进行遗传多样性分析。结果显示：（1）5对引物共获得119个扩增片段,其中110个为多态性条带,平均多态性条带比例为92.44%,平均多态信息量为92.53%,十倍体割手密抗旱功能标记多态性最高,甘蔗常用亲本材料耐高温功能标记多态性最高。（2）十倍体割手密在抗旱功能标记上具有较低的平均相似性系数值（0.541）和最大的分布范围（0.347-0.800）,且主要集中在0.400-0.600之间,而在耐高温功能标记上甘蔗常用亲本材料虽拥有最大的分布范围（0.238-1.000）,但甘蔗原种具有最低的平均相似性系数值（0.481）,且相似性系数范围主要集中在0.400-0.600之间。（3）UPGMA聚类可将参试材料划分为较明显的两个大组,十倍体割手密与甘蔗常用亲本和甘蔗原种在聚类关系上表现出明显的不同。研究表明,十倍体割手密资源无论是在抗旱功能标记DBF、Aqua方面,还是在耐高温功能标记SCB174、SCB190方面都与甘蔗常用亲本和甘蔗原种具有较大的遗传差异,而且在抗旱功能标记方面表现出更为丰富的遗传变异,因此在后续甘蔗品种抗逆性状改良和亲本创新上应进一步加大十倍体割手密资源的利用。

无形损失、履行差错与十倍赔偿——对《食品安全法》第96条第2款的法经济分析

我国食品安全领域突出存在的无形损失和履行差错,是《食品安全法》规定十倍赔偿的原因。但十倍赔偿不是真正意义上的惩罚性赔偿,因为其赔偿的基数是消费者支付的价款,而不是消费者所受到的损失。因此,十倍赔偿仍不足以使食品经营者内部化其外部效应,也不会加重食品经营者的成本风险,更不会影响社会经济发展的大局。鉴于法律限制了十倍赔偿的适用范围和赔偿金的数量,加之不安全食品的判断标准及其证明责任增加了获得十倍赔偿的难度,消费者获得十倍赔偿之路并不平坦,十倍赔偿对食品消费者的激励不会导致滥诉行为。

《食品安全法》十倍赔偿条款司法适用的实证考察

以《食品安全法》为依据,通过对24个司法判决的分析,总结出关于十倍赔偿司法适用的四个焦点问题。在每个问题上,司法判决都存在着截然不同的处理方法。这种情况对于十倍赔偿立法目的的实现,似乎起到了负面的牵制作用。对这些问题加以研究改进,应当对当下食品安全问题会有正面促进。

小麦-十倍体长穗偃麦草广谱抗锈易位系的鉴定及分析

【目的】从普通小麦与十倍体长穗偃麦草的杂交、回交后代中,获得对小麦条锈病流行混合小种具有广谱抗性的新种质。【方法】对普通小麦与十倍体长穗偃麦草的杂交、回交后代材料进行条锈病鉴定、农艺性状调查、分子细胞学和品质相关性状分析。【结果】这批材料在苗期普遍表现为轻度感病,但成株后则完全高抗或免疫,对8份材料进行了连续三年的人工接种鉴定,抗性表现十分稳定。对多种致病小种具有很好的抗性,根尖细胞染色体条数均稳定在42条,农艺性状良好。原位杂交分析显示这些材料中含有同一个易位片段,即在4DS末端有一来自长穗偃麦草St基因组的小片段易位,其中一个品系(GDR3)还携带一个未能准确定位的小片段易位,该材料对混合小种的抗性优于其它材料。推测这2个小片段易位上均含有新的抗条锈病基因。高分子量麦谷蛋白分析表明,这批材料均含有优质亚基14+15。【结论】与小麦相比,其野生近缘物种中可能含有更多的广谱抗性基因,是其在恶劣自然环境下生存的遗传基础,也为小麦抗病育种提供了新抗源。

惩罚性赔偿制度分析——对《食品安全法》十倍赔偿条款的思考

惩罚性赔偿制度首次体现在《消法》中的双倍赔偿条款,《食品安全法》再次出现十倍赔偿条款,体现了这一制度对保护消费者的合法权益,惩处不法经营者,维护市场经济秩序有重要意义。

十倍体长穗偃麦草雄性育性基因ThMs1的克隆、表达及功能分析

【目的】从小麦隐性核雄性不育突变体ms1与十倍体长穗偃麦草异附加系中,克隆雄性育性恢复基因ThMs1,解析该基因的表达模式、编码蛋白的生物化学活性和生物学功能,鉴定新的小麦ms1育性恢复基因,从而更好地应用于小麦杂交育种。【方法】通过基因组原位杂交(genomic in situ hybridization,GISH),鉴定ms1与十倍体长穗偃麦草异附加系中小麦外源的染色体类型;通过同源克隆法在小麦-十倍体长穗偃麦草异附加系中克隆雄性育性基因ThMs1,并稳定转化小麦ms1进行基因功能互补验证;利用RT-PCR及实时荧光定量PCR分析检测基因的表达模式;进一步通过RNA原位杂交分析基因的组织细胞特异性表达特性;利用特异性抗体进行Western blot检测ThMs1蛋白在体内的表达情况;经SignalP软件分析预测蛋白结构;通过蛋白-脂质结合活性分析检测ThMs1蛋白是否具有脂类分子结合活性。【结果】证实小麦ms1与十倍体长穗偃麦草异附加系细胞中含有偃麦草4Ag染色体;从小麦-十倍体长穗偃麦草异附加系中克隆了雄性育性基因ThMs1,遗传转化功能互补试验证实ThMs1能够完全恢复小麦ms1突变体的雄性不育表型,基因的聚类分析表明MS1只存在于禾本科植物中;通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测发现ThMs1在减数分裂期的花药中特异表达,RNA原位杂交分析证实ThMs1在小麦小孢子发生过程中特异表达;Western blot检测发现ThMs1在小麦减数分裂期的花药中表达;对ThMs1蛋白氨基酸序列进行结构预测发现,该蛋白具有推测的脂类结合分子结构域,ThMs1蛋白脂类分子结合试验表明ThMs1蛋白特异结合磷脂酸和磷酸化的磷脂酰肌醇。【结论】克隆了一个新的来自十倍体长穗偃麦草、可恢复小麦隐性核雄性不育突变体ms1雄性育性的ThMs1,该基因与小麦Ms1具有相似的分子结构、时空表达模式和脂结合活性,导致2个蛋白在小麦中也具有相似的生物学功能,ThMs1可以替代普通小麦Ms1的功能调控小麦花粉育性,该结果为利用小麦ms1通过分子设计建立小麦杂交育种体系(新一代杂交育种体系)提供了一个新的育性恢复基因。

十倍体长穗偃麦草Ca^(2+)转运蛋白ThCAX1表达及生物信息学分析

CAX[Cation(Ca^(2+))/H^(+)exchanger]基因是重要的Ca^(2+)/H^(+)反向转运蛋白,负责细胞内Ca^(2+)浓度调节。为探讨十倍体长穗偃麦草(Thinopyrum ponticum,2 n=70)中ThCAX1编码基因的序列信息和蛋白结构,以十倍体长穗偃麦草与普通小麦品种百农AK 58远缘杂交后代5 ES易位系为研究材料,分析了ThCAX1序列信息、蛋白结构和互作网络。结果表明,ThCAX1基因全长编码序列1695 bp,编码565个氨基酸,蛋白分子量59.39 kDa;遗传进化分析表明,该基因来源于十倍体长穗偃麦草5 E染色体短臂;蛋白信息预测结果显示,该蛋白为亲水性跨膜蛋白,含5个跨膜结构域,无信号肽,为非分泌性蛋白;二级结构含有25个α螺旋(α-helix)、7个延伸链(extended strand)和26个无规卷曲(random coil);ThCAX1共有10个蛋白参与互作,其中6个蛋白参与离子交换。

单倍、三倍、十倍惩罚性赔偿责任浅析

所谓的单倍,也就是通常所说的"退一赔一";三倍赔偿,即"退一赔三";十倍赔偿就是"退一赔十"了。这些在法律上叫做惩罚性赔偿,并且是通过法院审理并最终判决的。法院在审理这类要求经营者承担惩罚性赔偿责任的消费者权益纠纷,通常适用的法律是《消费者权益保护法》和《食品安全法》。两部法律调整不同范围的消费者权益纠纷,对经营者应承担的惩罚性赔偿责任的规定也不一样,因为不同的案件适用的法律不同,所以会出现不同的赔偿责任。

食品安全法“十倍赔偿”制度折射的经济法理念

从实质公平、社会本位的经济法理念看,食品安全法第96条要求生产者或销售者承担"十倍赔偿"责任,有其合理性和必要性,对消费者维护自身合法权益确有一定的积极意义;由于食品安全监管问题积弊日久,要更好解决当前严峻的食品安全问题,真正体现以人为本的经济法理念,在现有基础上借鉴美国惩罚性赔偿责任的经验,使"十倍赔偿"制度得以进一步的完善,促进民众的社会监督,提升消费者权利意识,或许才是有效解决之道。

经济法理念下“十倍赔偿”制度的完善

我国《食品安全法》第96条第2款设置了"十倍赔偿"制度,对处理日益严峻的食品安全问题以及维护消费者自身合法权益都有积极的意义。文章从以人为本、平衡协调、社会本位的经济法理念为视角,分析"十倍赔偿"制度的由来,并针对"十倍赔偿"制度存在的问题提出相应的完善建议。

52%阿维·杀虫单(十倍性有机硅6%)防治水稻四代纵卷叶螟试验示范初报

52%阿维·杀虫单(十倍性有机硅6%)可湿性粉剂防治水稻纵卷叶螟小区试验效果较好,为进一步验证其防效,进行了大面积试验示范,示范结果表明,该药剂对水稻纵卷叶螟具有明显的防治效果,持效期长达11d,同时具有较强的速效性,且对水稻、周边环境及生物安全。

《食品安全法》第148条规定十倍赔偿为何不属于市场监管部门执法条款

去年底,有网友问道:“《食品安全法》规定经营明知是不符合食品安全标准的食品,消费者可以要求价款十倍的赔偿金,增加赔偿的金额不足1000元的按照1000元赔偿。在10倍价款未超过1000元的情况下,消费者不同意价款10倍的赔偿而直接要求1000赔偿合法吗?”。市场监管总局执法稽查局答复:“食法148条不属于市场监管部门执法条款,请向立法部门咨询。”

自助餐盘有油污,能否要求十倍赔偿

王某在某自助烤肉餐厅就餐,核销用餐券后,自取餐具时发现餐盘不洁,因此未就餐。经沟通,餐厅认可餐具不洁,遂将餐费退还。王某认为餐厅应给付十倍赔偿,遂诉至法院。法院经审理查明,王某购买自助烤肉餐厅238元套餐,并已经餐厅核销餐券。王某因发现餐盘上有油污未实际用餐,餐厅已退还餐费238元。庭审中,王某主张其发现第一个餐盘有油污后让服务员进行更换,而更换后的餐盘仍有油污。就餐盘污染情况,王某提交照片为证,显示餐具不洁的事实。该餐厅认可照片中餐盘系公司提供,但不认可是事发时王某取用的餐盘。王某未就请求更换餐盘的情况提交证据。

小儿大面积烧伤后急救复苏十倍法补液公式的创建与应用

目的探讨研究小儿大面积烧伤后急救复苏十倍法补液公式的科学性和可行性。方法采用回顾性观察性研究方法。收集2014年1月1日—12月31日国内72家三级甲等医院烧伤科收治的符合入选标准的433例大面积烧伤患儿(男250例、女183例,年龄3个月龄~14岁)的烧伤总面积[30%~100%体表总面积(TBSA)]和体重(6~50 kg)。将6~50 kg中的每一体重(编程步长为0.5 kg)与烧伤总面积为30%~100%TBSA中的每一面积(编程步长为1%TBSA)配对后的6319对模拟数据,代入3个公认小儿补液公式——国内常用的小儿烧伤补液公式(以下简称国内补液公式)、加尔维斯顿公式和辛辛那提公式与2个小儿急救补液公式——世界卫生组织烧伤技术工作小组(TWGB)提出的大面积烧伤患者急救简化复苏方案(以下简称TWGB公式)和该文作者提出的小儿十倍法补液公式:补液速度(mL/h)=体重(kg)×10(mL·kg^(-1)·h^(-1)),计算伤后8 h内补液速度(以下简称补液速度)。以3个公认小儿补液公式的计算结果±20%的范围为合理补液速度,计算并比较采用2个小儿急救补液公式计算的补液速度的准确率。利用体重分别为6、50 kg时采用小儿十倍法补液公式计算结果为合理补液速度时对应的最大烧伤面积(55%、85%TBSA),将烧伤总面积30%~100%TBSA分为3个段,比较各分段中采用2个小儿急救补液公式计算的补液速度的准确率。当2个小儿急救补液公式计算的补液速度均不合理时,比较2种补液速度的差异。统计433例患儿前述3个烧伤总面积分段分布情况,计算并比较2个小儿急救补液公式计算的补液速度的准确率。对数据行McNemar检验。结果将6319对模拟数据代入显示,小儿十倍法补液公式计算的补液速度准确率为73.92%(4671/6319),显著高于TWGB公式的4.02%(254/6319),χ^(2)=6490.88,P<0.05。当烧伤总面积为30%~55%TBSA、56%~85%TBSA时,采用小儿十倍法补液公式计算的补液速度的准确率分别为100%(2314/2314)、88.28%(2357/2670),均显著高于TWGB公式的10.98%(254/2314)、0(0/2670),χ^(2)值分别为3712.49、4227.97,P<0.05;当烧伤总面积在86%~100%TBSA时,小儿十倍法补液公式和TWGB公式计算的补液速度的准确率均为0(0/1335)。当2个小儿急救补液公式计算的补液速度均不合理时,采用小儿十倍法补液公式计算的补液速度均大于TWGB公式。433例患儿中,烧伤总面积在30%~55%、56%~85%、86%~100%TBSA者所占比例分别为93.07%(403/433)、5.77%(25/433)、1.15%(5/433),采用小儿十倍法补液公式计算的补液速度准确率为97.69%(423/433),明显高于TWGB公式的0(0/433),χ^(2)=826.90,P<0.05。结论应用小儿十倍法补液公式估算小儿大面积烧伤后补液速度相对准确、简便,优于TWGB公式,适合非烧伤专业的一线医护人员院前抢救大面积烧伤患儿时应用,值得推广。

食品安全案件十倍惩罚性赔偿制度研究

《食品安全法》十倍惩罚性赔偿制度在司法实践中仍有诸多争议,主要集中于消费者的范围、销售者“明知”的认定标准、标签和说明书瑕疵免责的理解等。结合典型案例中裁判者的观点认为:消费者应作广义的理解,涵盖非职业打假人;明知应包括重大过失的主观心理状态,并采事实自证原则,由消费者承担标示瑕疵的证明责任;标示瑕疵免责应限于不可能危害消费者身体健康的瑕疵。

我国食品安全法“十倍赔偿”规定之批判与完善

《中华人民共和国食品安全法》第96条规定了消费者可以要求"十倍赔偿"的权利,这被誉为中国版的惩罚性赔偿制度。然而,这种"十倍赔偿"只不过是徒有虚名而已,不仅无法起到应有的效果,而且实行起来也困难重重。如果想要名至实归,唯有借鉴美国的先进经验,把真正的惩罚性赔偿制度引入《中华人民共和国食品安全法》当中,才是我国食品安全问题的破解之道。