HPLC法测定不同防风炮制品中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的建立防风不同炮制品中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法并进行比较。方法采用高效液相色谱法(HPLC),使用Hitachi Lachrom-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水溶液(40:60)作为流动相,设定检测波长为254 nm、柱温为30℃、流速为1.0 m L/min,进样量3μL。同时,采用快速水分测定仪测定不同炮制品的水分含量。结果升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在14.75~118.00μg/mL和24.00~192.00μg/mL范围内有良好的线性关系。升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷精密度的相对标准偏差(RSD)分别为0.68%、1.13%,重现性的RSD分别为0.64%、1.74%,平均回收率分别为100.80%,95.65%。防风炮制后升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量均有不同程度的下降,虽然微波炮制炒防风的5-O-甲基维斯阿米醇苷含量要低于传统炮制品,但是微波炮制品含量整体高于传统炮制品,炮制后水分含量明显降低,微波炮制品水分含量整体略高于传统炮制品。结论HPLC法快捷、简便、准确、重复性好,可用于防风不同炮制品的质量控制;防风的微波炮制品有效成分含量较高,水分含量略低。

高速逆流色谱分离纯化防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷

建立了高速逆流色谱分离制备防风中有效成分升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。防风根的粉末经甲醇浸泡提取和减压蒸馏,得粗提浸膏。以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶7∶9为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0mL/min。从316mg防风粗提物中一步分离得到13.9mg升麻素苷和25mg5-O-甲基维斯阿米醇苷,纯度分别为98.1%和99.2%。采用ESI-MS,1H NMR和13C NMR对目标化合物的结构进行了鉴定。

HPLC测定辛夷鼻炎丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的总含量

目的:建立测定辛夷鼻炎丸(辛夷、薄荷、紫苏叶、甘草等)中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的高效液相色谱方法。方法:以Sunfire C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相采用甲醇(A)-水(B)梯度洗脱:0～20 min,72%B;20～50 min,72%～50%B。升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的检测波长为254 nm,流速为0.9 mL/min,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:用梯度洗脱得到了较好的分离效果,升麻素苷在0.020 16～0.806 4μg之间线性关系良好,r=0.999 9;5-O-甲基维斯阿米醇苷在0.020 96～0.838 4μg之间线性关系良好,r=0.999 9。结论:该方法专属性强,准确度高,可用于辛夷鼻炎丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定。

RP-HPLC法测定畅鼻通颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的:建立测定畅鼻通颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的反相高效液相色谱法。方法:采用 AgilentEclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-水-三乙胺(35:65:0.1)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254nm。结果:升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的线性范围分别为2.5～100.0 mg·L^(-1)(r=0.9993)和2.1～84.0mg·L^(-1)(r=0.9992);平均回收率(n=9)分别为99.2%和99.8%。结论:该方法简单,结果准确、可靠,可以作为该制剂质量控制的一项重要指标。

辛防通窍片中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定

目的建立同时测定辛防通窍片中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的高效液相色谱法。方法采用资生堂MG C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(16∶84)为流动相,检测波长为254 nm,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL,柱温为25℃。结果升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷进样量分别在0.151 2～6.048 0μg(r=0.999 99,n=8)和0.060 0～2.400 0μg(r=1.000 00,n=8)范围内与相应峰面积有良好线性关系,平均回收率分别为101.79%(RSD=1.44%)和101.32%(RSD=1.40%)。结论该法操作简便、结果准确、专属性强,可用于辛防通窍片的质量控制。

关节熏洗汤剂中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定

目的:测定关节熏洗汤剂中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈-水(12:10:78);检测波长:254 nm;流速:1 ml·min^(-1);柱温:30℃。结果:升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的线性范围分别为0.035~0.350μg和0.037~0.370μg(r分别为0.999 9和0.999 8),平均回收率分别为101.49%(RSD=2.5%)、98.77%(RSD=2.2%)。结论:升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定为关节熏洗汤剂的疗效提供了初步依据。

HPLC法同时测定复方苦黄方水提液中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量

目的建立HPLC法同时测定复方苦黄方水提取液中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。方法色谱柱:Hypersil C18;水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0 ml.min-1;检测波长:254 nm;柱温:30℃。结果升麻素苷在0.025～0.125μg、5-O-甲基维斯阿米醇苷在0.05～0.25μg范围内线性关系良好,r=0.9999;升麻素苷平均回收率为99.31%,5-O-甲基维斯阿米醇苷平均回收率为99.62%。结论本文所建立的方法操作简单,结果准确可靠。

HLPC梯度洗脱测定抗荨胶囊中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的总含量

目的：建立抗荨胶囊（防风蒺藜蝉蜕黄芪当归白鲜皮等）中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的高效液相色谱的方法。方法：以WondaSil C18-WR（4.6 mm×150mm,5μm PH 1-10）为色谱柱;流动相采用甲醇（A）-0.05%磷酸溶液（B）梯度洗脱：0-6min,40%B,6-17min,45%（B）,17-30min,75%（B）,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷检测波长为254nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：用梯度洗脱得到了较好的分离效果,升麻素苷18.4-92.0μg/mL之间线性关系良好,r=0.9999550（n=6）;5-O-甲基维斯阿米醇苷在22.0-110.0μg/mL之间线性关系良好,r=0.9996565（n=6）,平均回收率分别为100.28%和100.56%。结论：该研究同时进行升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的定量分析,方法专属性强,准确度高,可用于抗荨胶囊中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定。

HPLC法测定补虚颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的:建立补虚颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的测定方法。方法:采用HPLC法,以Kromasil C18色谱柱,甲醇-水-三乙胺(37∶63∶0.1)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果:升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的线性范围分别为2.8-224μg·mL-1(r=0.9995)和3.15-252μg·mL-1(r=0.9993);平均回收率分别为99.52%与100.6%。结论:该方法简单,结果准确、可靠,可以作为该制剂质量控制的一项重要指标。

高效液相色谱法同时测定川芎茶调丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的:建立HPLC法同时测定川芎茶调丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18;水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速为1 mL/min;检测波长为302 nm。结果:升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.0996~0.996 µg (r = 0.9999)和0.1428~1.428 µg (r = 0.9998)之间线性关系良好。升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷平均回收率分别为97.89% (RSD = 2.33%)和97.40% (RSD = 1.43)。结论:该法稳定、准确,重现性好,阴性对照无干扰,可用于川芎茶调丸中色原酮类成分的含量测定。

高效液相色谱法同时测定炒防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量

目的建立同时测定炒防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Rigol-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(40∶60),流速为1.0 mL/min,进样量为5μL,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果可在20 min内完成对升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的色谱分析,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的质量浓度线性范围分别为0.0116~0.2920 g/L(r=0.9994)和0.0114~0.2850 g/L(r=0.9994),平均回收率分别为95.82%和107.70%,RSD分别为2.92%和2.45(n=6)。结论该法方便、快捷、准确、简便、重复性好,可用于炒防风的质量控制。

HPLC法同时测定藿香清胃胶囊中栀子苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的 建立HPLC波长切换法测定藿香清胃胶囊中栀子苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量。方法 色谱柱为Agilent HC-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0m L·min-1,柱温：30℃,波长切换时间序列采样：0-12 min为238 nm;12-45 min为254 nm。结果 栀子苷进样量在0.382-3.819μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为99.66%,RSD为1.5%（n=9）;升麻素苷进样量在0.011-0.108μg范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为99.53%,RSD为1.6%（n=9）;5-O-甲基维斯阿米醇苷进样量在0.010-0.097μg范围内线性关系良好（r=0.9998）,平均回收率为100.12%,RSD为1.8%（n=9）。结论 该方法准确、快捷、可靠,为全面控制藿香清胃胶囊的质量提供参考。

HPLC法测定防风炭中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的建立同时测定防风炭中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法采用HPLC法,以Rigol-C18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;以甲醇-水(40∶60)为流动相;流速为1.0mL·min^(-1);进样量为5μL;检测波长为254nm;柱温为35℃。结果本方法可在20 min内完成对升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的色谱分析,测得升麻素苷的线性范围为0.011 6~0.292mg·mL^(-1),r=0.999 4,平均回收率为93.14%(RSD=2.51%);5-O-甲基维斯阿米醇苷的线性范围为0.011 4~0.285mg·mL^(-1),r=0.999 4,平均回收率为95.09%(RSD=2.26%)。结论所建立的HPLC法方便快捷、准确、简便、重复性好,可用于防风炭的质量控制。

SPE-UPLC法同时测定复方荆防颗粒中的升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的建立固相萃取-超高效液相色谱(SPE-UPLC)法同时测定复方荆防颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。方法采用固相萃取系统对复方荆防颗粒进行处理,色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,检测波长254 nm,柱温为35℃。结果升麻素苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷在5~80 mg/L范围内均有良好线性关系,线性回归方程分别为A=40 195C-248.67(r=1.0000),A=42 577C+12 782(r=1.0000);平均加样回收率为98.11%、99.28%,RSD为1.92%、1.90%(n=6)。结论 SPE-UPLC法简便准确且重现性好,可有效控制复方荆防颗粒的质量。

HPLC测定史国公药酒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定史国公药酒中防风中的升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-2%冰醋酸水溶液(40:60),检测波长254 nm,流速1.0 ml/min,柱温25℃。结果升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷进样量分别在121.84～1827.60 ng(r=0.9989)、122.72～1840.80 ng(r=0.9983)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.12%、97.56%,RSD分别为0.95%、0.98%。结论该方法简便、准确、重复性好、专属性强,可用于该制剂的质量控制和评价。

HPLC法测定止咳宁嗽胶囊中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的总含量

目的建立止咳宁嗽胶囊中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定法。方法采用HPLC法测定含量:Shiseido Capcell Pak 5μm4.6mm.I.D.×250mm色谱柱,甲醇-水(35∶65)为流动相,检测波长254nm,流速1.0m L·min^(-1);柱温:30℃。结果升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分离完全,平均加样回收率分别为96.5%、97.1%。结论本方法简便,快速,准确。

HPLC法测定防风通圣丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定防风通圣丸中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法色谱柱为Inertsil ODS-3(C18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-醋酸-水(35∶4∶61);检测波长为254 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温为室温。结果升麻素苷进样量在0.147 2～0.736 0μg之间,5-O-甲基维斯阿米醇苷进样量在0.134～0.670μg之间与峰面积呈良好的线性关系(相关系数r分别为0.999 7、0.999 8);二者的平均回收率分别为99.78%和99.86%。结论该方法简便、准确,专属性好,可用于防风通圣丸的质量控制。

HPLC测定荆防止痒颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的:建立测定荆防止痒颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的高效液相色谱方法。方法:以Phenomenex Synergi C18(250 mm×4.6 mm,4μm)为色谱柱,流动相采用乙腈(A)-水(B)梯度洗脱:0~15 min,15%A;15~35 min,15%~35%A,检测波长为254 nm,流速为1.0 m L·min-1,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:升麻素苷的进样量在0.049 735 96~1.243 399μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.43%,RSD=0.59%(n=6);5-O-甲基维斯阿米醇苷的进样量在0.048 52~1.213μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.85%,RSD=1.30%(n=6)。结论:该方法专属性强,准确度高,可用于荆防止痒颗粒中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定。

高效液相色谱测定除脂生发片中丹皮酚、黄柏酮、5-O-甲基维斯阿米醇苷和胡薄荷酮

建立高效液相色谱波长切换法测定除脂生发片中丹皮酚、黄柏酮、5-O-甲基维斯阿米醇苷和胡薄荷酮成分含量。色谱柱为Agilent EclipsePlus C18(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(流动相A)-0.3%磷酸(流动相B)为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;柱流量1.0 mL/min;丹皮酚、黄柏酮、5-O-甲基维斯阿米醇苷和胡薄荷酮的检测波长分别为274、236、254和252 nm;进样体积:10μL,高效液相色谱-二极管阵列检测器定量检测。丹皮酚、黄柏酮、5-O-甲基维斯阿米醇苷和胡薄荷酮分别在质量浓度0.01996~1.996、0.5868~5.868、0.997~9.97、0.0998~9.98μg/mL内与其色谱峰面积呈线性关系,相关系数分别为0.9996、0.9980、0.9997和0.9999,平均回收率分别为100.92%、100.54%、101.14%、100.93%;测定结果的相对标准偏差均小于5.0%(n=6)。该方法具有样品处理简单、分析时间短、检测结果准确等优点,适用于除脂生发片制剂的质量控制。

防风中5-O-甲基维斯阿米醇苷抗炎作用及机制研究

目的研究防风中5-O-甲基维斯阿米醇苷的抗炎作用及其机制。方法建立脂多糖(LPS)诱导RAW264.7小鼠单核巨噬细胞体外炎症模型,采用酶联免疫吸附测定法细胞中的白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、Toll样受体-4(TLR4)含量;采用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠结肠炎模型,观察5-O-甲基维斯阿米醇苷对结肠炎小鼠结肠损伤的影响,采用酶联免疫吸附测定法测定小鼠结肠组织上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β蛋白表达。结果与脂多糖组比,5-O-甲基维斯阿米醇苷各剂量组能降低RAW264.7炎症细胞中IL-1β、IL-6、TLR4含量(P<0.01),并呈现浓度依赖性;与空白组比,结肠炎模型组小鼠体质量及结肠长度降低,结肠组织有明显的病理改变。与模型组比,5-O-甲基维斯阿米醇苷各剂量组能缓解结肠炎小鼠肠炎症状和减轻肠黏膜病理损伤,降低结肠中MDA含量,增加SOD活性(P<0.01),并能下调结肠组织中的TNF-α、IL-1β蛋白表达水平(P<0.01)。结论防风中5-O-甲基维斯阿米醇苷可抑制LPS诱导小鼠RAW264.7细胞炎症,对DSS诱导小鼠结肠炎有一定的治疗作用。