半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺递送siRNA对肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中MRE11表达的影响

背景:壳聚糖是一种常用的非病毒载体,具有良好生物相容性、生物可降解性、低毒等优点,但其基因递送能力相对较弱,常需要进行结构衍生修饰。目的:观察半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺(LA-CS-PEI)在肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中递送si RNA的能力及对减数分裂重组蛋白11(MRE11)表达的影响。方法:1将肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu或人肝细胞HL-7702分别与0,10,20,40,80,100 mg/L的LA-CS-PEI或壳聚糖-聚乙烯亚胺共培养24 h,检测细胞存活率;2将LA-CS-PEI与si RNA-FAM分别以0,2,4,8,16,32的质量比混合,制备复合转染颗粒。以复合转染颗粒转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu,48,72,96 h后,以转染效率筛选最佳质量比与转染时间,进行下步实验;3以复合转染颗粒、LA-CS-PEI、si RNA分别转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu 48 h后,以未转染的细胞为空白对照,检测MRE11基因及蛋白的表达。结果与结论:1与壳聚糖-聚乙烯亚胺相比,LA-CS-PEI毒性更低,且当LA-CS-PEI质量浓度高达100 mg/L时,仍表现出很低的细胞毒性;2LA-CS-PEI与si RNA-FAM质量比为4和8时转染效率均达95%以上,入胞效率极高,转染48 h转染效果最好,所以后续实验选择质量比为8,转染时间为48 h的复合转染颗粒;3复合转染颗粒组MRE11基因及蛋白表达低于LA-CS-PEI组、si RNA组、空白对照组(P<0.05);4结果表明,LA-CS-PEI能实现si RNA的有效递送,并能沉默肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中的MRE11基因。

奈达铂-半乳糖基化壳聚糖微球的制备及其与热疗联合对非小细胞肺癌细胞的作用

目的探讨奈达铂-半乳糖基化壳聚糖微球(NDP-GC MP)的制备及与其与热疗(HT)联合对非小细胞肺癌细胞的作用。方法首先采用乳化-化学交联法,以半乳糖基化壳聚糖(GC)为载体,戊二醛为交联剂,制备了NDP-GC MP,然后通过细胞迁移、细胞凋亡等实验评估了人肺鳞癌细胞SK-MES-1对NDP/NDP-GC MP和温度的敏感性。结果当与HT结合时,SK-MES-1细胞对NDP-GC MP更加敏感,细胞迁移会受到更明显的抑制作用,并增加了细胞凋亡。结论HT与奈达铂联合可以有效抑制非小细胞肺癌细胞迁移,促进其凋亡,具有用于非小细胞肺癌治疗的潜力。