老年前期及老年性白内障患者的全血半乳糖激酶活性研究

本文测定了60例老年前期白内障和77例老年性白内障患者的全血半乳糖激酶(GK)活性。此二组的GK活性水平均与对照组一致(P>0.05),但老年前期白内障组中GK杂合子频率显著高于对照组,提示GK活性部分降低者发生白内障的危险也比正常人大。因此,不论是GK缺乏的纯合子还是杂合子,均应限制乳品的摄取。

桑树半乳糖激酶基因的克隆及序列特征与诱导表达分析

从已构建的桑树幼叶cDNA文库得到一条编码桑树半乳糖激酶(galactokinase)的基因序列片段,通过RT-PCR和RACE获得该基因的完整序列,命名为M-GALK(GenBank登录号:JQ041908)。该基因全长1 400 bp,存在53 bp的5'端非翻译序列(5'-UTR)和51 bp的3'端非翻译序列(3'-UTR),其ORF长1 296 bp,编码431个氨基酸,预测蛋白质分子质量为47.07kD,等电点为6.34。同源性分析表明,M-GALK与葡萄和蓖麻等物种的GALK序列之间具有很高的保守性。基于桑树和其它物种GALK序列的系统进化分析表明,桑树与葡萄、蓖麻、杨毛果的亲缘关系较近。半定量RT-PCR检测M-GALK在桑树不同部位的表达存在一定的差异性,在幼芽、幼嫩叶和幼花中的表达量较高,在根和成熟桑椹中的表达量较低。在低温、盐分、干旱胁迫下和脱落酸(ABA)诱导处理后,桑树幼叶中M-GALK的表达量均发生明显变化:低温胁迫下,M-GALK的表达量在一开始有所减少,但是随着温度逐渐降低,表达量明显增加;干旱胁迫下,M-GALK的表达量逐渐增加,在9 h达到最高后又逐渐恢复到正常水平;盐分胁迫下,M-GALK的表达量先降低后又逐渐增加并保持基本不变,在8 d后又逐渐恢复到正常水平;ABA诱导下,M-GALK的表达量逐渐增加,在24 h达到最高之后又逐渐恢复到正常水平。推测M-GALK可能与桑树的抗逆性有关。

基于Nox4/PKC_(α)/Gal-3通路探讨柴胡皂苷D对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的:基于NADPH氧化酶4(Nox4)/蛋白激酶C_(α)(PKC_(α))/半乳糖凝集素3(Gal-3)通路探讨柴胡皂苷D对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、柴胡皂苷D组(50 mg/kg)、Apocynin组(10 mg/kg)、柴胡皂苷D+Apocynin组(柴胡皂苷D 50 mg/kg+Apocynin 10 mg/kg),每组12只。除假手术组外,其余各组制备心肌梗死模型。经药物处理后,采用超声测量各组大鼠心室功能指标左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS);苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠心肌组织形态;Masson染色检测各组大鼠心肌组织纤维化改变,并计算心肌组织胶原容积积分(CVF);酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、转化生长因子(TGF)-β_(1)水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠心肌组织Nox4/PKC_(α)/Gal-3通路相关蛋白表达含量。结果:相较于假手术组,模型组大鼠心肌组织有严重的病理损伤,胶原增生明显,心肌CVF、LVEDD、LVESD及血清IL-1β、IL-6、TGF-β_(1)水平升高,心肌组织Nox4、PKC_(α)及Gal-3蛋白表达升高(P<0.05),LVEF及LVFS降低(P<0.05)。相较于模型组,各药物组大鼠心肌组织病理损伤减轻,胶原增生减少,CVF、LVEDD、LVESD及血清IL-1β、IL-6、TGF-β_(1)水平降低,心肌组织Nox4、PKC_(α)及Gal-3蛋白表达降低(P<0.05),LVEF及LVFS升高(P<0.05)。相较于柴胡皂苷D组、Apocynin组,柴胡皂苷D+Apocynin组大鼠心肌组织病理损伤进一步减轻,且胶原增生进一步减少,CVF、LVEDD、LVESDE及血清IL-1β、IL-6、TGF-β_(1)水平降低,心肌组织Nox4、PKC_(α)及Gal-3蛋白表达降低(P<0.05),LVEF及LVFS升高(P<0.05)。结论:柴胡皂苷D可抑制Nox4/PKC_(α)/Gal-3通路激活,减轻心肌梗死大鼠心肌组织炎症损伤,缓解心肌纤维化,改善心功能。

儿科系列多解选择试题(八)

病历摘要:患儿,男,10天。因生后第3天出现黄疸住院。患儿系8个月早产,生后无窒息。母乳喂养,第3天皮肤及巩膜微黄,精神反应尚可。第7天黄疸加重,有低热。查体:皮肤和巩膜黄染,面部有几个小脓点。心肺未见异常。肝肋下2厘米,脐部有少量脓性分泌物。

儿科系列多解选择试题(八)答案

提问一:1、3、4、5是正确的,生后第3天出现黄疸,第7天加重,对于早产儿而言,生理性黄疸应考虑。患儿在黄疸加重时出现低热,同时伴有脐炎和皮肤化脓性病灶,应想到新生儿败血症可能。新生儿易患败血症,皮肤和粘膜的损伤和化脓病灶,是主要的病菌侵入门户,由此而进入血液循环。脐炎和皮肤化脓性感染诊断无疑。9、10是无效的。

利用BAC/gal K系统构建缺失潜伏相关转录物启动子LAP1的伪狂犬病突变病毒

伪狂犬病病毒感染猪后,在耐过猪中均能形成潜伏感染。在潜伏感染期间,病毒基因组仅大量转录病毒潜伏相关转录物(latency-associated transcripts,LATs)。为了研究潜伏相关转录物启动子对LAT表达特征的影响,通过构建缺失LAT启动子LAP1、并添加绝缘子cHS4的供体质粒,利用感染性细菌人工染色体克隆(bacterial artificial chromosome,BAC)操作平台和galK(半乳糖激酶)正负筛选系统,获得BAC载体pBAC-JS-cHS4-△LAP1b,BAC载体与质粒pcDNA3.1-cre共转染Vero细胞后获得突变病毒vJS-cHS4-△LAP1b。空斑和生长曲线结果显示,vJS-cHS4-△LAP1b与亲本病毒具有相似的生物学特性。vJS-cHS4-△LAP1b感染Vero细胞后,RT-PCR检测显示表达大的潜伏相关转录本(large latency transcripts,LLT)。vJS-cHS4-△LAP1b的构建为深入研究LAT表达特征及功能提供了依据和基础。

碳源对Bacillus cereus CZ氨肽酶产量及糖代谢酶活性的影响(英文)

本文对Bacillus cereus CZ生产亮氨酸氨肽酶(LAP)进行了研究。结果表明,L-阿拉伯糖最利于LAP生产,D-半乳糖和乳糖也有较好效果,葡萄糖、麦芽糖、蔗糖或碳酸氢钠则强烈抑制LAP产生。L-阿拉伯糖和单糖混合、乳糖或半乳糖与葡萄糖混合均大大降低LAP产量。乳糖、葡萄糖有利于细胞生长。2%的乳糖、半乳糖或阿拉伯糖作为碳源,发酵48 h时LAP产量并没有达到最高。对于三种糖代谢酶,β-半乳糖苷酶受乳糖强烈诱导,D-半乳糖则强烈抑制该酶的活性,半乳糖激酶受D-半乳糖强烈诱导。L-阿拉伯糖异构酶受L-阿拉伯糖强烈诱导。当L-阿拉伯糖和半乳糖的浓度为4%时,LAP产量达到最高。胞外半乳糖激酶随D-半乳糖增加而降低,而胞内正好相反。L-阿拉伯糖异构酶活性随L-阿拉伯糖浓度增加而增加。当L-阿拉伯糖为4%时,LAP产量在发酵56 h达到最高,但在半乳糖为4%时,LAP产量随时间延长而增加。