半套式聚合酶链反应检测牛奶中部分肠道致病菌

目的 建立一套食物中的单核细胞增生性李斯特氏菌、耶尔森氏菌和副溶血性弧菌等肠道致病菌的快速检测方法。方法 采用裂解法提取DNA与各自的三条引物进行二次聚合酶链反应扩增(简称半套式PCR),检测模拟阳性牛奶中部分肠道致病菌。结果 常规PCR能检出100个活菌的存在,在其产物进行半套式PCR检测时有10个活菌存在时即可扩增出特异性产物,提高10倍。最低检测限可达10 cfu(集落形成单位)。结论 本方法具有特异性强、敏感性高、简便快速等特点。

半间歇釜式反应器安全高效操作的数值优化策略

半间歇釜式反应器内物料积累过多且反应放热过快时,容易引发热失控风险,造成化工安全事故。设计较优的加料操作,既可以避免热失控风险,又可以缩短操作周期、提高生产效率。针对半间歇釜式反应器,以乙酸酐水解为模型反应,基于反应器数学模型,提出了一种安全高效加料操作的数值优化策略。在该策略中,首先确定不同加料方式(如一段、二段和三段加料)下的安全操作温度区间,然后在该温度区间内寻找最短操作周期对应的操作温度,该温度即为最佳的加料操作温度。优化结果表明三段加料的安全操作温度区间和最佳操作温度分别比一段加料宽60.9%和低1.9 K,六段加料已经基本可以实现操作周期最短,增加操作压力也有利于缩短操作周期。

基于本质安全的半间歇式等温强放热反应加料速度优化

针对半间歇式等温强放热反应,加料速度是控制放热速率的有效控制方法之一。本文综合考虑反应过程安全性及经济性,建立半间歇式等温过程加料速度优化数学模型。为避免强放热反应的热失控,基于本质安全思想,考虑最危险情况——冷却失效情形引发的反应热失控作为实现过程安全的约束条件,并采用罚函数法将约束优化模型转化为无约束优化模型。采用粒子群算法(PSO)对优化问题求解,并将模拟退火(SA)引入粒子群算法增强全局寻优能力。优化计算结果表明:相比于采用恒定加料速度方式,基于混合粒子群算法(SA-PSO)优化算法的分段线性加料方式不仅可以实现过程本质安全化,还可以大大提高转化率。

环己酮半间歇过氧化反应过程热失控研究

采用反应量热仪(RC1e)、差示扫描量热仪(DSC)和绝热加速量热仪(ARC)对环己酮过氧化反应过程的热失控危险性进行了研究,利用冷却失效情形法对该工艺进行危险性分级。结果表明:温度的升高使环己酮过氧化反应速率加快,体系比热容增加,温度升高也使产物各种中间体及副反应活跃程度增加,提高搅拌速度也能促进环己酮氧化,而延长加料时间可以将反应热量较好地移出,但同时降低反应速率,使过氧化环己酮得率降低。依据风险评价指数矩阵法和失控情景分析法,得到环己酮半间歇过氧化反应的热失控危险程度级别为5级,而降低环己酮的加入量,危险程度等级为2级。

猪胸膜肺炎放线杆菌半套式PCR检测方法的建立及应用

根据1型胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因3′端序列设计3条引物,建立了检测猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的半套式PCR方法。筛选了该方法的最佳反应条件,并采用该方法进行临诊检测,比较了不同处理临床样品的检测结果。结果表明,该方法能检测出所有供试血清型APP,不能从猪上呼吸道常见细菌基因组DNA中扩增出条带,特异性好;最低DNA检出量为16.5 fg,其灵敏性是常规PCR方法的1 000倍;重复性试验结果表明,该方法稳定可靠。应用半套式PCR方法检测临床样品,检出率显著高于细菌分离鉴定;样品保存方法和核酸抽提方法能影响阳性样品的检出率。

化学反应方程式教学二则

离子——电子法配平氧化还原方程式主要适用于电解质溶液中的氧化还原反应。许多无机化学教材中对此法作了介绍。作者认为物质守恒和电荷守恒的原理在配平化学方程式中是相互关联、相互制约的,如果从配平电荷数入手来配平氢氧原子个数,可以取得事半功倍的教学效果。现以高锰酸钾在酸性介质中氧化硫酸亚铁为例,扼要说明离子——电子法的步骤和配平原则。

用观察法配平复杂的氧化还原反应方程式

试图用简单的观察法来配平复杂的氧化还原反应方程式,无疑不是什么新的想法。我的一些学生在这方面就偿试了多年,但并不很成功。在看到他们的那些试探法未必总是适用之后,以及在一些教科书上看到了诸如“许多氧化还原反应方程式,不能用观察法配平”之类的话,大多数学生就认为,配平较难的氧化还原反应方程式,需要学会使用一些特殊的方法。如“氧化数法”和“离子电子法”。

介绍一种配平化学反应方程式的方法

化学反应方程式的配平,是化学课程的一个重要内容、它对于培养学生认识'物质不灭定律'等自然规律以及研究和定量计算化学反应都很重要.因此,也是学生必须掌握的基本知识与基本技能之一.目前,配平化学反应方程式普遍采用'氧化值法'和'电子法'.前者是利用反应前后各元素原子的氧化值升高与降低的总数必须等同的原则,配上适当的系数,达到反应方程式两端平衡的目的;

议氧化还原方程式的配平

离子—电子法配平氧化还原方程式主要适用于电解质溶液中的氧化还原反应,许多无机化学教材中对此法作了介绍。现以高锰酸钾在酸性介质中氧化硫酸亚铁为例,扼要说明此法的步骤和配平原则。

母婴配对血清中TT病毒的分子鉴定

为了解TT病毒（TTV）在我国母婴间传播的可能及分子病毒学依据,合成引物（引物1:5’-ACAGACAGAGGAGAAGGCAACATG-3’;引物2:5’CTGGCATTTTACCATTTCCAAAGTT-3’;引物3:5’-GGCAACATGTTATGGATAGACTGG-3＇）,采用半套式聚合酶链反应（hemi-nested PCR）方法,检测了40对母、婴配对血消中的TTV DNA,并对TTV DNA均阳性的一对母婴配对血清中PCR产物进行测序和序列分析.结果发现:（1）在40例产妇血清中,有5例经半套式PCR检出了TTV DNA,检出率为12.5％;40例脐血中.检出TTV DNA阳性血清1例,阳性率为2.5％.脐血呈阳性的新生儿母亲静脉血中TTV DNA也为阳性.（2）母婴同时检出TTV DNA的血清PCR产物经测序后进行序列比对,二者病毒核苷酸序列的同源性为100％;与日本G2b型代表株核苷酸同源性为98.6％,属于G2b亚型、研究结果表明:TTV存在母婴传播途径,TTV可经胎盘垂直传播.

TTV在黑龙江省不明原因肝炎患者中的比例及其致病性

目的 研究一种肝炎病毒 (输血传播病毒 ,TTV)在黑龙江省不明原因肝炎患者中的比例、疾病的发展过程及健康人的携带情况 ,以探讨输血传播病毒的致病性。方法 采用半套式 聚合酶链反应 (semi nestedPCR)方法对不明原因性肝炎患者 ,包括 4 5例急性肝炎、2 7例慢性肝炎、8例重型肝炎 ,11例健康志愿献血员进行TTV的定性检测。对 9例经过第一步检测TTV DNA阳性的急性恢复期患者行再次检测。结果 80份不明原因性肝炎患者血清中 15份TTV阳性 ,占 18.75 %。其中急性肝炎患者血清中检出 9份TTV阳性 ,占 2 0 % ;慢性肝炎患者血清中检出 5份TTV阳性 ,占 18.5 2 % ;8份重型肝炎中检出 1份TTV阳性 ,占 12 .5 %。其中 9份TTV阳性的急性不明原因性肝炎患者在恢复期采集的第 2份血清TTV检测结果均为阴性。 11份健康志愿献血员的血清中没有检出TTV DNA。结论 输血传播病毒具有致病性。可以引起急性、慢性、重型肝炎 ,临床表现与甲 戊型肝炎的临床表现没有明显区别。急性TTV病毒性肝炎可以痊愈。

SEN病毒D亚型中国株流行病学及序列变异

目的 了解SEN病毒D亚型中国株的流行病学特点及其进化地位。方法 分析已知的基因序列设计引物 ,建立半套式PCR检测方法 ,对 5 8份献血者血清样本和 2 5份non A～E肝炎患者血清样本进行了SENV D亚型的检测 ,并对部分阳性血清的PCR产物进行克隆测序。结果 无偿献血者中SENV D亚型感染率为 4 5 % ,在non A～E肝炎患者中SENV D亚型感染率为 4 8% ,两者间差异无显著性 ;但在无偿献血者中SENV D亚型的阳性检出率大大高于国外报道。测序结果经BLASTP软件在GenBank中检索表明 ,各测序株均与已知的SENV D株序列有很高的同源性 ,并在此基础上用MegAlign软件进行进化树分析。结论 建立的半套式PCR检测方法适用于SEN病毒D亚型检测 ;SENV D亚型中国株之间以及与已发表的国外SENV D株序列之间有变异。与无偿献血者相比 ,non A～E肝炎患者血清SENV D株无进化上的显著倾向性。在测序的部分ORF1序列中存在一个核苷酸高变区。