半叶马尾藻多糖的提取和分析

采用热水浸提法提取半叶马尾藻多糖 [Sargassumhemiphyllum (Turner)C Ag polysaccharides ,SHP],并对其理化性质、提取率、含量、组成和性质进行了研究。SHP呈灰白色粉末状 ,溶于水 ,不溶于有机溶剂。碘 碘化钾反应呈阴性 ,说明提取物为非淀粉性多糖。提取率为 7 0 4 % ,总糖含量为 82 9%。紫外扫描结果表明多糖几乎不含核酸和蛋白质。红外光谱显示SHP主要为吡喃多糖 ,并显示多糖分子结构中存在 β 糖苷键。薄层层析结果提示该多糖可能为木聚糖。上述结果不仅说明该方法提取的物质是多糖 ,而且纯度好 ,提取效率高。

半叶马尾藻粗糖中单糖的离子色谱法分析

以60～80℃的水从半叶马尾藻干粉中提取粗多糖，用Sevage溶剂去蛋白纯化后，将粗多糖用4．0g／L的三氟乙酸在80℃下水解，水解液在CarboPac^TM PA10离子色谱柱（2mmi．d．×250mm）上以14．0mmol／L NaOH溶液为流动相进行分离，以电化学检测器检测半叶马尾藻粗糖水解产生的单糖成分及含量。结果表明，半叶马尾藻粗糖中木糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖和果糖的含量分别为2200，820，98，4560，358和740mg／kg，加标回收率范围为86．0％～108．0％，检出限范围为5．6—89．6μg／kg。该方法具有灵敏度高、精密度好、样品不需要衍生化处理等优点，适合藻类样品中单糖的分析。

重金属Cu^(2+)胁迫对半叶马尾藻生长及生理生化特性的影响

采用半静态试验法研究了不同浓度的重金属铜离子(Cu2+)胁迫对半叶马尾藻(Sargassum hemiphyllum)生长及生理生化特性的影响。结果表明,对照组藻体相对生长速率(RGR)持续升高,胁迫组均先上升而后下降,实验第8天时只有ρ(Cu2+)为0.05 mg·L-1胁迫组的RGR较对照组高。藻体的各项生理生化指标随胁迫时间呈波动趋势,实验第8天时,ρ(Cu2+)为0.01 mg·L-1胁迫组的各项指标与对照组无显著差异;ρ(Cu2+)为0.05 mg·L-1时,过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平显著高于对照组,其余指标均恢复到对照组水平;ρ(Cu2+)>0.05 mg·L-1的胁迫组,叶绿素a(Chl-a)、类胡萝卜素(Car)和可溶性蛋白(SP)水平低于对照组,其余指标高于对照组,同时相对于0.25 mg·L-1胁迫组,1.25 mg·L-1胁迫组对除MDA外的其余指标影响更显著。因此,适当质量浓度的Cu2+胁迫(≤0.05 mg·L-1)对半叶马尾藻生长和生理生化指标有正面效应,而过高质量浓度Cu2+胁迫(>0.05 mg·L-1)对藻体生长和抗逆能力有一定的负面影响。

半叶马尾藻多糖对γ射线氧化损伤小鼠的保护作用

采用检测小鼠血浆和肝脏超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)和丙二醛 (MDA)的方法 ,观察半叶马尾藻多糖 [Sargassum hemiphyllum (Turner) C.Ag. polysaccharides,SHP]对2 Gyγ射线损伤小鼠氧化自由基的影响。结果发现 2 0 mg/ kg和 4 0 mg/ kg的 SHP不仅能明显降低辐射损伤小鼠血清和肝脏的 MDA含量 ,而且能够提高辐射损伤小鼠 SOD和 CAT的活性 ,并呈剂量依赖性增强。 1 0 mg/ kg的 SHP对辐射损伤小鼠肝脏 SOD、小鼠血浆和肝脏 CAT也有明显的促进作用。

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠免疫功能的保护作用

目的探讨半叶马尾藻多糖[Sargassum hemiphyllum(Turner)C.Ag,SHP]对辐射损伤小鼠免疫功能的影响。方法选取74MBq的32P-玻璃微球(32P-GMS)肿瘤内照射导致荷瘤小鼠辐射损伤,通过流式细胞术、分光光度法、酶释放法测定不同浓度的SHP对辐射损伤小鼠免疫功能的保护作用。结果照射组荷瘤小鼠免疫功能明显低于正常对照组(P<0.01);200,400,800 mg/kg SHP口服灌胃加照射组荷瘤小鼠免疫功能明显高于照射组(P<0.01)。结论74MBq的32P-GMS肿瘤内照射可以抑制小鼠的免疫功能,SHP对辐射损伤小鼠的免疫功能有保护作用。

半叶马尾藻多糖的分离纯化与光谱分析

本文对半叶马尾藻多糖采用水提醇沉法粗提,蛋白酶联合Sevag法去蛋白纯化,凝胶过滤柱层析分离得半叶马尾藻纯多糖的不同组分,溴化钾压片红外光谱测定和紫外光谱扫描鉴定分析。结果表明,SHP的苯酚-硫酸呈色反应呈阳性,茚三酮反应呈弱阳性,碘-碘化钾反应呈阴性,说明提取物为非淀粉性多糖。SHP的提取率为8.56%,总糖含量为90.96%。凝胶过滤柱层析结果表明,半叶马尾藻多糖中含有吡喃多糖、木聚糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖和果糖等。紫外扫描结果显示多糖几乎不含核酸和蛋白质;红外光谱显示SHP主要为吡喃多糖,并显示多糖分子结构中存在β2糖苷键,还存在α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰。

半叶马尾藻多糖对[^(60)Co]γ射线损伤小鼠骨髓细胞的影响

目的:探讨半叶马尾藻多糖(SHP)拮抗辐射损伤小鼠造血系统的机制。方法:流式细胞术检测小鼠骨髓细胞周期和Westernblotting测定细胞周期相关蛋白质CDK4的表达。结果:[60Co]γ射线(5Gy)导致小鼠骨髓细胞G0/G1期阻滞,而S期和G2/M期细胞百分率下降。SHP(10-40mg/kg)可以减轻小鼠骨髓细胞G0/G1期阻滞,增加S期和G2/M期细胞百分率,表现为SHP加照射组小鼠G0/G1期骨髓细胞百分率明显低于单纯照射组,S期和G2/M期骨髓细胞百分率显著高于单纯照射组。小鼠骨髓细胞CDK4蛋白质表达照射组明显低于正常对照组,SHP加照射组小鼠骨髓细胞CDK4蛋白质表达显著高于单纯照射组。结论:SHP拮抗[60Co]γ射线损伤小鼠骨髓细胞的机制与其调节骨髓细胞周期和增加CDK4蛋白质表达密切相关。

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠骨髓细胞集落生成的影响

探讨半叶马尾藻多糖[Sargassumhemiphyllum (Turner)C .Ag .polysaccharides ,SHP]对辐射损伤小鼠骨髓细胞集落生成的影响。检测辐射损伤小鼠脾集落生成单位、红细胞集落生成单位、爆裂型红细胞集落生成单位、粒细胞 巨噬细胞集落生成单位、巨核细胞集落生成单位、混合集落生成单位的变化。5Gyγ射线照射后小鼠CFU S ,CFU E ,BFU E和CFU Mix明显减少,而SHP(2 0mg/kg～40mg/kg)可以抑制CFU S ,CFU E ,BFU E和CFU Mix下降。辐射损伤也可以引起小鼠CFU GM显著降低,但是,SHP(10mg/kg～40mg/kg)具有拮抗辐射损伤的作用,使CFU GM增加。单纯照射组小鼠CFU Meg显著低于正常对照组,SHP(4 0mg/kg)加照射组小鼠CFU Meg却显著高于单纯照射组。SHP对辐射损伤小鼠多能干细胞和造血祖细胞具有保护作用。

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠骨髓CD_(34)^+细胞和SCF mRNA表达的影响

腹腔注射10~40mg.kg-1.d-1半叶马尾藻多糖[Sargassum hemiphyllum(Turner)C.Agardh poly-saccharides,SHP],7d后,小鼠经5Gyγ射线照射,观察SHP对辐射损伤小鼠骨髓CD3+4细胞占骨髓有核细胞的百分率、CD34基因表达和SCF(stem cell factor,干细胞因子)mRNA基因表达的变化,探讨SHP抗辐射损伤保护小鼠造血功能的机理。用流式细胞术测定CD34+细胞含量,通过RT-PCR检测CD3+4和SCF mRNA基因表达。结果显示SHP能显著提高辐射小鼠CD3+4细胞的百分率,提高CD3+4和SCF mRNA基因的表达。增加CD3+4细胞数、促进CD3+4和SCF mRNA基因表达可能是该海藻多糖抗辐射、保护小鼠造血功能的重要机理之一。

3种氮源加富对半叶马尾藻幼苗生长和生化组成的影响

为了探讨硝氮(NO_3^--N)、氨氮(NH_4^+-N)和尿素氮(Urea)3种氮(N)源对半叶马尾藻(Sargassum hemiphyllum)幼苗生理特性的影响,在实验室条件下,把幼苗分别置于不同N源浓度中培养24 d,而后测定藻体的生长和生化组成含量。结果显示,不同N源和N浓度对幼苗的生长和部分生化组成有显著影响。3种N源加富均能促进幼苗的生长和组织N的增加,相对生长速率随着N浓度的升高而增加,在浓度为25~150μmol/L组中,幼苗的组织N增加量接近或超过每天以最大速率生长的N需求(0.032%/d);在浓度为50μmol/L时,相对生长速率达到最大值,Urea组的最大相对生长速率显著低于NO_3^--N和NH_4^+-N组;在浓度为10、25μmol/L时,NH_4^+-N组幼苗的相对生长率显著高于相同浓度下的NO_3^--N组,而在浓度为50~150μmol/L时则相反。除了最高浓度组(150μmol/L),随着N浓度的升高,幼苗光合色素、可溶性蛋白和组织N含量逐渐增加,而可溶性糖含量逐渐降低;在相同N浓度下,NO_3^--N加富幼苗的可溶性糖、叶绿素a和叶绿素c含量最高,NH_4^+-N加富时,可溶性蛋白和组织N含量最高,而Urea加富下墨角藻黄素含量最高。当NH_4^+-N浓度增加至150μmol/L时,幼苗的生长和可溶性蛋白含量下降幅度最大。研究表明,将培养水体中NO_3^--N加富至50~150μmol/L或NH_4^+-N加富至25~100μmol/L时,可有效促进半叶马尾藻幼苗的生长、光合作用和物质积累,为室内幼苗顺利度夏培育提供保障。

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠脾细胞的影响

探讨了半叶马尾藻多糖[Sargassumhemiphyllum(Turner)C.Ag.polysaccharides,SHP]对辐射损伤小鼠脾细胞的影响。用3H-TdR(氚标记胸腺嘧啶核苷)和3H-TyR(氚标记酪氨酸)掺入法分别检测脾细胞DNA、UDS(非程序性DNA合成)和蛋白质合成,通过流式细胞术测定脾细胞周期和脾淋巴细胞CD4分子表达。20mg/kg和40mg/kg的SHP对辐射损伤小鼠DNA和蛋白质合成具有显著的刺激作用,10—40mg/kg的SHP对辐射损伤小鼠脾淋巴细胞UDS和CD4分子的表达也有明显的促进作用。脾细胞周期研究表明20mg/kg和40mg/kg的SHP对辐射损伤小鼠脾细胞G0/G1期和G2/M期的细胞百分率分别有减少和增加的作用,而10—40mg/kg的SHP能够提高辐射损伤小鼠脾细胞S期的细胞百分率。SHP对辐射损伤小鼠脾细胞具有保护作用。

半叶马尾藻对N、P吸收速率的初步研究

在实验室条件下研究半叶马尾藻对不同浓度N、P以及不同化合态N的吸收速率。结果显示：不同浓度N、P下,半叶马尾藻对N、P的吸收速率差异有统计学意义（P〈0.05）;半叶马尾藻对N、P的吸收速率随N、P浓度的升高而增加,最大吸收速率出现在N为200μmol/L、P为20μmol/L时,分别为2.397和0.229μmol·g-1·h-1;不同氮磷比条件下,半叶马尾藻对N、P的最大吸收速率出现在氮磷比为10时,在氮磷比为1-30范围内,氮磷比对半叶马尾藻吸收N、P速率的影响有统计学意义（P〈0.05）;不同化合态N对半叶马尾藻吸收N、P速率的影响有统计学意义（P〈0.05）,当NH4＋-N和NO3--N共存时,半叶马尾藻对这2种化合态氮可同时吸收利用,各处理组间,对总无机N的吸收速率差异有统计学意义（P〈0.05）,在c（NO3--N）/c（NH4＋-N）为2∶1和1∶2处有两个峰值,分别为2.036、1.862μmol·g-1·h-1,对P的最大吸收速率均出现在c（NO3--N）/c（NH4＋-N）值为2∶1时,为0.206μmol·g-1·h-1。因此,在粤西沿海半叶马尾藻在消除养殖水域营养盐、防治海水富营养化方面有很大优势。

半叶马尾藻多糖体内抗肿瘤作用及其机制探讨

目的研究半叶马尾藻(SC)多糖体内抗肿瘤作用及其机制。方法观察SC多糖对S180小鼠瘤质(重)量、胸腺等免疫器官的影响及分别测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),丙二醛(MDA)的活性。结果SP可明显抑制S180小鼠瘤体的生长,腹腔注射SC150 mg/kg·b.w.,连续注射10 d,可使肿瘤抑制率达63.52%;小鼠血清中SOD、GSH-PX的活性分别由(350.76±31.34)NU/ml,(299.36±43.63)U增加到(487.76±16.67)NU/ml(P<0.01),(370.90±16.49)U(P<0.01);MDA由(9.46±1.77)nmol/ml降至(7.26±1.18)nmol/ml(P<0.05)。结论SC多糖可通过提高机体免疫功能和抗氧化能力从而抑制肿瘤的生长。

半叶马尾藻多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制

背景与目的:由于目前使用的化疗药物在肿瘤治疗中副作用较大,严重制约了化疗药物在肿瘤治疗方面的应用。本实验目的是研究野生半叶马尾藻多糖(SP)对S180肉瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用和机制,为寻找低毒和高效的治疗肿瘤药物提供有价值的实验资料。方法:称重法检测SP对小鼠S180肉瘤的抑瘤率,流式细胞术分析SP对S180肉瘤小鼠胸腺细胞和脾淋巴细胞周期的影响,3H-TdR和3H-TyR掺入法测定S180肉瘤小鼠胸腺细胞、脾淋巴细胞DNA合成及蛋白质合成,脾淋巴细胞转化实验检测SP对S180肉瘤小鼠的免疫增强作用。结果:在肿瘤接种前10天给予小鼠SP50、100和200mg/kg,抑瘤率分别为28.7%、32.9%和50.3%,其中100mg/kg和200mg/kg的SP组与NS对照组比较抑瘤率有显著性差异(P<0.05)。小鼠接种肿瘤细胞后,脾脏和胸腺明显缩小,其脏器指数与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。SP可以缓解小鼠脾淋巴细胞和胸腺细胞在接种肿瘤细胞后发生的G1期阻滞。各浓度SP组小鼠胸腺细胞3H-TdR掺入值显著高于NS对照组。200mg/kgSP组小鼠脾细胞DNA合成及100mg/kg和200mg/kgSP组小鼠脾细胞蛋白质合成显著高于NS对照组,说明SP对肿瘤接种后引起的小鼠脾细胞DNA和蛋白质合成显著降低也有拮抗作用。各浓度SP组刀豆素A(concanavalinA,ConA)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖显著高于NS对照组。结论:SP对S180肉瘤小鼠肿瘤生长有抑制作用,其机制可能是通过提高小鼠的脾淋巴细胞和胸腺细胞的数量和功能而实现的。

半叶马尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的提取纯化及抗氧化研究

从半叶马尾藻中提取得到的岩藻聚糖硫酸酯(SPF),采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀法纯化得SPF1,然后经DEAEC-52柱层析得F1和F2两个级分。化学组成分析表明,这4个级分均含有岩藻糖、硫酸基、糖醛酸以及少量的蛋白质。采用比色法研究岩藻聚糖硫酸酯清除羟基自由基(.OH)及超氧阴离子自由基(O2-.)的作用,结果显示,4种岩藻聚糖硫酸酯级分均有清除活性氧自由基的能力,并且随着纯度的提高其抗氧化能力越强。

半叶马尾藻多糖对抑癌基因p53和Rb的影响

目的研究半叶马尾藻多糖(SP)对抑癌基因p53和Rb的影响。方法称重法检测SP对小鼠S180肉瘤的抑瘤率;RT-PCR分析抑癌基因p53和Rb中mRNA的含量;Western-blotting检测p53和Rb中蛋白质的表达水平。结果将浓度分别为50、100和200mg/kg的SP经腹腔注射入S180肉瘤小鼠体内,连续10d,抑瘤率分别为30.5%、47.6%和63.5%。SP可上调抑癌基因p53和Rb中mRNA的表达以及增加p53和Rb中蛋白质含量。结论SP对小鼠S180肉瘤具有一定的体内抑制作用,并上调抑癌基因的表达。

半叶马尾藻多糖对HL-60细胞CD_(11b)和CD_(11a)表达的体外影响

目的探讨半叶马尾藻多糖对HL-60细胞CD11b、CD11 a表达的影响。方法MTT研究半叶马尾藻多糖对HL-60细胞体外增殖的影响,采用流式细胞术研究对CD11b、CD11 a表达的影响。结果半叶马尾藻多糖能增高CD11b、CD11 a的表达率,且作用随时间和浓度的增加而增强。结论半叶马尾藻多糖在体外可影响HL-60细胞CD11b、CD11 a的表达,提示其在抗肿瘤方面有一定的开发应用前景。

深圳南澳海域半叶马尾藻的金属元素富集特性分析

采用ICP-MS法对深圳南澳月亮湾海域半叶马尾藻及海水中14种金属元素含量进行分析测试,用富集系数表征富集能力.结果发现,半叶马尾藻对重金属元素具有极强的富集能力,其对As,Pb,Cd,Cr,Cu,Zn、Ni的富集总量高达201mg/kg;半叶马尾藻对各金属元素的富集能力有差异,其中富集能力最强的是As,富集能力较弱的是Se;半叶马尾藻对As,Cd,Fe的富集能力远大于对Zn和Pb的富集能力.

半叶马尾藻化学成分的研究Ⅰ

目的：对马尾藻科植物半叶马尾藻［Ｓａｒｇａｓｕｍｈｅｍｉｐｈｙｌｕｍ（Ｔｕｒｎ．）Ａｇ．］藻体的甾醇类成分进行研究。方法：利用真空液相层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０层析和反复硅胶柱层析进行分离，根据甾醇的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果：得到５个甾醇类化合物，分别确定为岩藻甾醇（ＳＰⅠ）、２４氢过氧基２４乙烯基胆固醇（ＳＰⅡ），（２２Ｅ，２４Ｓ）２４甲基５α胆甾７，２２二烯３β，５，６β三醇（ＳＡⅢ），ｓａｒｉｎｇｏｓｔｅｒｏｌ（ＳＰⅣ）和麦角甾醇过氧化物（ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌｐｅｒｏｘｉｄｅ）（ＳＡⅥ）。结论：ＳＰⅡ。

盐度对半叶马尾藻幼苗生长及光合色素合成的影响

在温度22 ± 0.5 ℃、光照强度100 μmol·m^-2·s^-1 的光照培养箱中,以8 组不同盐度培养半叶马尾藻（Sargassum hemiphyllum）幼苗（2～3 g/株）,研究不同盐度对其生长发育和光合色素合成的影响.结果表明：半叶马尾藻幼苗适合存活和生长的盐度为24.84～35.28,在该盐度范围内幼苗均可正常存活和生长;幼苗最适生长盐度为30.06,质量增长率达到最大,光合色素含量达到最高;24.84～35.28 中,幼苗更适合于在高盐端生长.