MTT-半固体培养基测定细菌动力的研究

目的 制成一种容易测定细菌动力的半固体培养基。方法 根据Difco动力试验培养基配方 ,降低琼脂浓度 ,加入MTT代替TTC。培养基组成为 10 .0gTryptose ,5 .0gNaCl,3.5gagar ,10 0 0 .0ml蒸馏水 ,高压灭菌后 ,冷却至 5 0℃～ 6 0℃。无菌加入 1.5ml滤器除菌的 10g/LMTT水溶液。分装无菌管。结果 有动力菌株沿着穿刺线扩散 ,形成蓝色云雾状 ,而无动力菌株在穿刺线上生长只形成蓝线 ,蓝线周围培养基保持澄清。检测了 12 3株菌 ,鞭毛染色证实 94株有鞭毛、2 9株无鞭毛 ;有鞭毛的菌株中 ,90株菌培养 10～ 18h动力阳性 ,其余 4株大肠埃希菌培养 2 4h动力阳性 ,但这 4株菌应用Difco动力试验培养基需诱导传代才获得阳性结果。除此 4株外 ,还有 9株用Difco动力培养基需培养 48h才阳性。

脐血单个核细胞在半固体培养基中向神经元样细胞的分化

为观察脐血单个核细胞在甲基纤维素半固体培养基中的生长情况 ,常规方法分离脐血单个核细胞 ,接种于含 SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、IL-6、EPO的甲基纤维素半固体培养基中培养。第 5 d发现有 6～ 10个细胞组成的小集簇 ,散在分布 ,细胞形态无变化。第 11d有神经元样细胞生长 ,与集簇并存。以后神经元样细胞逐渐生长 ,但集簇生长停滞 ,第 16d仍未发现集落形成。收集细胞 ,进行神经元特异烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)免疫细胞化学测定 ,显示少量神经元样细胞 NSE、NF阳性。该结果提示在半固体培养基中 ,脐血单个核细胞可向神经元样细胞分化 。

显色半固体培养基检测细菌动力的临床应用

目的研究革兰阴性杆菌,特别是粘液型菌落动力检测的简便可靠方法。方法采用传统半固体培养基及显色半固体培养基,对临床分离的128株革兰阴性杆菌的动力进行检测。结果对于发酵革兰阴性杆菌,两种培养基检测结果基本一致。而对绿脓杆菌的粘液菌落,显色半固体通过显色,全部能检测到动力。结论显色半固体培养基检测细菌动力,而显色半固体培养通过显色减少了细菌本身因素对试验结果的影响,具有结果明显,检出率高的优点,是取代传统半固体培养基检测细菌动力的有效方法。

半固体培养基快速测定法在不同食品中的应用研究

本文主要利用半固体培养基快速测定法同国标九管发酵法做比较,评价在不同食品中的应用效果。结果表明:半固体培养基对气泡的滞留现象明显可见,易于观察及判断;操作简便,检测周期短,只需24h即可得出检验结果,节约了时间和原料,提高了检测效率。

TTC半固体培养基作细菌动力的实验研究

ＴＴＣ半固体培养基作细菌动力的实验研究熊蔚，施益民靖江市卫生防疫站（江苏２１４５００）动力试验是肠杆菌科、弧菌科等细菌的一项重要的鉴定试验。为了能够正确判断细菌动力有无，中国药品生物制品检定所杨正时研究员在有关论著中介绍万分之一氯化三苯四氮唑（ＴＴＣ...

食品中大肠菌群半固体培养基快速检测法的研究

本研究主要研究食品中大肠菌群半固体培养基快速检测法。结果表明:在乳糖发酵培养基中添加0.8%琼脂、0.5%SDS的半固体快速检测法现象明显,结果报告时间大大缩短,且结果同样可用MPN报告。

应用TTC半固体培养基检测细菌动力的探讨

动力试验是肠杆菌科、弧菌科等细菌的一项重要的鉴定试验。为了正确判断细菌有无动力,杨正时介绍用1/万氯化三苯四氮唑(TTC)加入半固体培养基中作动力试验。我们在应用这种培养基中,对TTC的含量和TTC加入半固体培养基中能否耐高压灭菌等问题作了探讨,现把实验结果报告如下。

生孢梭菌半固体培养基菌落计数方法的研究

目的 ：建立使用半固体培养基进行生孢梭菌菌落计数的方法,使菌落计数结果能够接近最大活菌数。方法 ：接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐培养基中,30~35℃培养18~24小时,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释生孢梭菌菌液至与标准比浊管相同的浓度,用10倍稀释法分别稀释至1×10-6、1×10-7、1×10-8三个稀释级备用。分别配制琼脂浓度为0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%的6种硫乙醇酸盐培养基,分别取三个稀释级的菌液1m L接种至配制好的上述6种硫乙醇酸盐培养基中,同时在胰酪大豆胨琼脂培养基上接种等量菌液,并放入厌氧袋中,将接种好的上述培养基至35℃培养18~24小时,进行菌落计数并比较结果。结果 ：半固体培养基计数法比厌氧袋计数法效果好,使用琼脂浓度为0.5%的硫乙醇酸盐培养基,30~35℃培养18小时,菌落计数最多,最接近最大活菌数。结论 ：生孢梭菌半固体培养基计数法适用于生孢梭菌计数。

对“半固体培养基保存肠道杆菌菌种方法”的改进

我们试用半固体培养基穿刺双密封法保存肠道杆菌可延长保存时间达二年,比常法延长时间4—8倍,解决了农村山区基层医疗卫生单位无法长期保存肠道杆菌菌种的困难,现介绍如下: 材料与方法一、材料: 1.无菌试管: 大试管(18×180mm) 中试管(12×100mm) 2.液体石腊 3.肌皮胶帽 4.胶塞、塑料袋。 5.半固体培养基、普通肉汤培养基二、方法: 将要保存的菌株按常法穿刺接种于制备好的半固体培养基内,放37℃16小时培养观察生长良好则可按下法处理保存:首先将各管加无菌肉汤1—2毫升,上面加无菌液体石腊厚约1厘米。无菌手续盖上无菌小胶塞,然后将此管放入无菌大试管内塞上无菌胶塞,带上肌皮胶帽,再装入塑料袋内捆紧放4℃冰箱保存观察,最长时间为二年。

不同性状培养基在菌种保存上的优劣势分析

保持菌种原有的生物学特征可以确保研究、检验、交流和使用实验菌种时能够达到预期的效果。实验菌种的保存对于食品和药品微生物检验工作至关重要,而其中培养基的选择对于菌种的存活率、纯度、长期保存的稳定性等方面都有着直接影响。本文旨在分析不同性状培养基在菌种保存上的优劣势,为微生物学研究人员和实验室提供指导和参考。

半固体培养基法制备单抗的可行性研究

目的建立稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法。方法常规细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基重悬细胞沉淀,通过优化甲基纤维素半固体培养基中甲基纤维素、血清及L-谷氨酰胺三种成分的浓度,建立稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法。并进行有限稀释法和甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞的对照实验。阳性克隆扩大培养,ELISA检测后冻存,再次复苏后ELISA检测呈阳性为稳定杂交瘤细胞株。结果甲基纤维素三种浓度中,甲基纤维素浓度1.0%和1.2%时获得的杂交瘤细胞团个数约为甲基纤维素浓度1.25%时的2倍。而甲基纤维素浓度1.2%时细胞团固定效果较甲基纤维素浓度1.0%更好。通过对梯度稀释的SP2/0细胞培养后,选择半固体培养基中使用的胎牛血清浓度(25%),在半固体培养基中含4mmol/LL-谷氨酰胺比含2mmol/LL-谷氨酰胺得到多近一倍的杂交瘤。得到的5株阳性杂交瘤在扩大培养、冻存复苏后抗体分泌稳定,得到5株稳定阳性杂交瘤细胞株。有限稀释法和甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞对照实验显示半固体培养基法可节省一半时间。结论建立了稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法。该法缩短了克隆化的时间,节省了人力和材料,不需要添加饲养细胞和细胞因子,是一种稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法。

皖西大别山松乳菇菌丝半固体培养研究

采用含琼脂的半固体培养基来培养松乳菇菌丝,优化了半固体培养基碳源和氮源以及培养温度,并将含同样营养成分的液体培养、固体培养和半固体培养进行了比较,试验结果表明,松乳菇菌丝采用半固体培养时,0.5%蔗糖与1.5%淀粉的组合碳源培养菌丝生长速度最快,蛋白胨是最理想的氮源物质,25℃是松乳菇菌丝的最适培养温度。3种不同培养基培养结果是半固体培养基菌丝生长速度明显超过了其他2种培养基,且菌丝颜色可以由纯白色转变为棕黄色,同时出现部分菌丝相互靠近集中生长的现象,此现象类似子实体原基的形成。松乳菇菌丝半固体培养方法为人工栽培松乳菇提供了新的思路。

乳酸菌生长最佳培养基的筛选

文中通过检测乳酸菌在不同固体和半固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小 ,以筛选出乳酸菌生长的最佳培养基。实验表明 ,在添加胡萝卜汁的乳酸菌分离固体培养基上 ,乳酸菌生长最好 ,活菌数含量最高 ,菌落和溶钙圈最大。同种培养基 ,半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长 ,前者出菌快 ,活菌数多。

微生物培养基制备的质量控制

随着生物技术的迅猛发展,微生物对工业、农业、环境、医药、食品卫生、畜牧兽医等事业发挥着愈来愈重要的作用.由于各类微生物有着不同的营养要求以及对微生物培养的各自工作目的,促进了微生物培养基的研究、生产、使用技术的不断改进.……

不同选择性培养基对乳酸菌生长的影响

乳酸菌在不同种类、不同类型选择性培养基上生长培养后,比较活菌菌落数、菌落大小及溶钙圈大小。结果显示:添加胡萝卜汁的乳酸菌分离半固体培养基最适合乳酸菌的培养,活菌数最多,菌落最大。

应用改良马丁培养基检测支原体的敏感性

支原体的潜在污染已成为疫苗生产和各种细胞培养工作的严重问题。检测支原体的方法有:培养法,DNA 荧光染色法,间接免疫荧光染色法和同位素掺入法等。我们采用改良马丁培养基培养法,对40个样品进行了检测,结果如下。待检样品为:小牛血清8批,原代细胞10批,传代细胞14批,其它组织培养物8批。

TTC半固体培基用于细菌动力试验的观察

确定细菌的动力是细菌学鉴定中的一项重要试验。传统的简便方法是根据细菌在半固体培养基中的生长情况来确定的,细菌垂直接种后,仅沿穿刺线生长为动力阴性。

二种培养基保存流脑菌种的效果观察

脑膜炎双球菌系革兰氏阴性双球菌．它在外环境中比较脆弱，在保存过程中容易死亡。为探索适应基层的较为理想的保存方法．我们利用现有的条件和设备．采用半固体培养基和50%卵黄盐水悬液二种不同的培养基．置于同样环境中予以保存．进行比较。实验结果表明。

改进的三糖铁琼脂培养基

改进的三糖铁培养基是下层为半固体培养基,并在下层含蔗糖,上层含乳糖、葡萄糖,同时上下层用两种不同颜色的指示剂,颜色区分明显,更便于观察。配方:下层半固体培养基:蛋白胨1.5g,硫酸亚钱0.03g,硫代硫酸钠0.03g,蔗糖1g,K2HPO41g,琼脂粉0.4g,蒸馏水100ml,pH7.2,0.8％溴麝香草酚兰（B.T.B）水溶液0.5ml。将上述成分（除B.T.