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半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立
1
作者
张玉超
刘良禹
+1 位作者
朱思洁
刘旭东
《食品研究与开发》
CAS
2024年第3期187-193,共7页
为建立更优的四环素(tetracycline,TC)酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),将TC与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗TC的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,...
为建立更优的四环素(tetracycline,TC)酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),将TC与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗TC的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将TC直接包被在酶标板上,并对ELISA反应体系条件进行优化,构建一种半抗原直接包被的TC ELISA检测方法。所制备的MAb特异性良好,交叉反应率低。所构建的检测方法最低检测限IC_(10)值为0.306 ng/mL,半数抑制率IC_(50)值为9.26 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为96.46%~101.89%、96.84%~102.50%。与人工完全抗原包被的检测方法相比(IC_(10)值:0.624 ng/mL,IC_(50)值:28.24 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为93.86%~105.12%、94.04%~105.56%),检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中TC含量的检测,具备良好的应用前景。
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关键词
四环素
半抗原包被
人工完全
抗原
单克隆抗体
酶联免疫吸附分析法
下载PDF
职称材料
半抗原直接包被的磺胺二甲氧嘧啶酶联免疫吸附分析法的建立
2
作者
张玉超
周洪波
+2 位作者
刘良禹
朱思洁
刘旭东
《食品科技》
CAS
北大核心
2023年第3期303-309,共7页
作为食品中抗生素残留的主要类型之一,传统的磺胺类抗生素(Sulfonamides,SAs)酶联免疫吸附分析法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)常以多克隆抗体和完全抗原包被作为检测基础,可能会出现检测灵敏度低、标准化难等问题。为建...
作为食品中抗生素残留的主要类型之一,传统的磺胺类抗生素(Sulfonamides,SAs)酶联免疫吸附分析法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)常以多克隆抗体和完全抗原包被作为检测基础,可能会出现检测灵敏度低、标准化难等问题。为建立更优的SAs ELISA检测方法,以磺胺二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,SDM)为研究对象,并将其作为半抗原与大分子蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗SDM的单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)。并采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将SDM直接包被在酶标板上后对ELISA反应体系条件进行优化,构建一种基于MAb的半抗原直接包被的SDM间接竞争ELISA(Indirect competitive ELISA,icELISA)检测方法。所制备的MAb特异性良好,交叉反应率低。所构建的icELISA检测法检测条件为:半抗原包被浓度为0.5μg/mL,抗体稀释比为256000,竞争反应体系温度为25℃,pH7.4,以1%BSA溶液作为封闭剂。该方法最低检测限IC_(10)为0.274 ng/mL,半数抑制率IC50为8.39 ng/mL,水和牛乳中加标回收率分别为97.28%~101.2%、98.34%~101.28%。与同等条件下建立的人工抗原包被的icELISA检测方法(IC_(10):0.579 ng/mL,IC50:22.5 ng/mL,水和牛乳中加标回收率分别为92.08%~105.22%、94.62%~103.76%)相比检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中SDM含量的检测,具有良好的应用前景。
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关键词
磺胺二甲氧嘧啶
半抗原包被
人工完全
抗原
单克隆抗体
酶联免疫吸附分析法
原文传递
基于单克隆抗体的双酚A半抗原直接包被的酶联免疫吸附法的建立
被引量:
8
3
作者
张玉超
刘旭东
《食品科技》
CAS
北大核心
2020年第3期320-325,共6页
传统的人工抗原包被酶联免疫吸附法(ELISA)依赖疏水相互作用将人工抗原与酶标板结合,会影响半抗原的呈现与识别,且多采用多克隆抗体为检测抗体,这些均会导致检测灵敏度下降和标准化难度增大。该研究选择双酚酸(BVA)作为双酚A(BPA)的半...
传统的人工抗原包被酶联免疫吸附法(ELISA)依赖疏水相互作用将人工抗原与酶标板结合,会影响半抗原的呈现与识别,且多采用多克隆抗体为检测抗体,这些均会导致检测灵敏度下降和标准化难度增大。该研究选择双酚酸(BVA)作为双酚A(BPA)的半抗原与蛋白质偶联制备人工抗原免疫BALB/c小鼠,获得一株可分泌BPA单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。利用3-氨丙基三乙氧基硅烷硅化处理酶标板,将BVA直接包被在酶标板上,建立了一种基于MAb的半抗原直接包被的BPA间接竞争ELISA法。该检测方法最低检测限IC10为0.29 ng/mL,半数抑制率IC50为5.4 ng/mL,水样中加标回收率为94.04%~102.31%。与人工抗原包被BPA ELISA检测方法(IC10:0.5 ng/mL,IC50:16.65 ng/mL,水样中加标回收率为89.72%~105.25%)相比,检测灵敏度显著性提高。
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关键词
双酚A
单克隆抗体
酶联免疫吸附法
半抗原包被
原文传递
题名
半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立
1
作者
张玉超
刘良禹
朱思洁
刘旭东
机构
茅台学院酿酒工程系
中国海洋大学食品科学与工程学院
茅台学院食品科学与工程系
贵州特色食品开发及综合利用工程研究中心
出处
《食品研究与开发》
CAS
2024年第3期187-193,共7页
基金
遵义市科学技术局、茅台学院市校联合科技研发资金项目(遵市科合HZ字[2020]315号)
教育部“春晖计划”国际合作项目(mych2019001)
茅台学院科学研究项目(myk2019008)。
文摘
为建立更优的四环素(tetracycline,TC)酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),将TC与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗TC的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将TC直接包被在酶标板上,并对ELISA反应体系条件进行优化,构建一种半抗原直接包被的TC ELISA检测方法。所制备的MAb特异性良好,交叉反应率低。所构建的检测方法最低检测限IC_(10)值为0.306 ng/mL,半数抑制率IC_(50)值为9.26 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为96.46%~101.89%、96.84%~102.50%。与人工完全抗原包被的检测方法相比(IC_(10)值:0.624 ng/mL,IC_(50)值:28.24 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为93.86%~105.12%、94.04%~105.56%),检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中TC含量的检测,具备良好的应用前景。
关键词
四环素
半抗原包被
人工完全
抗原
单克隆抗体
酶联免疫吸附分析法
Keywords
tetracycline
coating of hapten
artificial complete antigen
monoclonal antibody
enzyme⁃linked immunosorbent assay
分类号
S85 [农业科学—兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
半抗原直接包被的磺胺二甲氧嘧啶酶联免疫吸附分析法的建立
2
作者
张玉超
周洪波
刘良禹
朱思洁
刘旭东
机构
茅台学院酿酒工程系
茅台学院食品科学与工程系
中国海洋大学食品科学与工程学院
贵州特色食品开发及综合利用工程研究中心
出处
《食品科技》
CAS
北大核心
2023年第3期303-309,共7页
基金
遵义市科学技术局茅台学院市校联合科技研发资金项目(遵市科合HZ字[2020]315号)
教育部“春晖计划”国际合作项目(mych2019001)
+1 种基金
茅台学院科学研究项目(myk2019008)
贵州省大学生创新创业训练计划项目(X202214625041)。
文摘
作为食品中抗生素残留的主要类型之一,传统的磺胺类抗生素(Sulfonamides,SAs)酶联免疫吸附分析法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)常以多克隆抗体和完全抗原包被作为检测基础,可能会出现检测灵敏度低、标准化难等问题。为建立更优的SAs ELISA检测方法,以磺胺二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,SDM)为研究对象,并将其作为半抗原与大分子蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗SDM的单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)。并采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将SDM直接包被在酶标板上后对ELISA反应体系条件进行优化,构建一种基于MAb的半抗原直接包被的SDM间接竞争ELISA(Indirect competitive ELISA,icELISA)检测方法。所制备的MAb特异性良好,交叉反应率低。所构建的icELISA检测法检测条件为:半抗原包被浓度为0.5μg/mL,抗体稀释比为256000,竞争反应体系温度为25℃,pH7.4,以1%BSA溶液作为封闭剂。该方法最低检测限IC_(10)为0.274 ng/mL,半数抑制率IC50为8.39 ng/mL,水和牛乳中加标回收率分别为97.28%~101.2%、98.34%~101.28%。与同等条件下建立的人工抗原包被的icELISA检测方法(IC_(10):0.579 ng/mL,IC50:22.5 ng/mL,水和牛乳中加标回收率分别为92.08%~105.22%、94.62%~103.76%)相比检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中SDM含量的检测,具有良好的应用前景。
关键词
磺胺二甲氧嘧啶
半抗原包被
人工完全
抗原
单克隆抗体
酶联免疫吸附分析法
Keywords
sulfadimethoxine
hapten coated
artificial complete antigen
monoclonal antibody
enzymelinked immunosorbent assay
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
原文传递
题名
基于单克隆抗体的双酚A半抗原直接包被的酶联免疫吸附法的建立
被引量:
8
3
作者
张玉超
刘旭东
机构
茅台学院酿酒工程系
茅台学院食品科学与工程系
出处
《食品科技》
CAS
北大核心
2020年第3期320-325,共6页
基金
2018年度教育部“春晖计划”合作项目(mych2019001)。
文摘
传统的人工抗原包被酶联免疫吸附法(ELISA)依赖疏水相互作用将人工抗原与酶标板结合,会影响半抗原的呈现与识别,且多采用多克隆抗体为检测抗体,这些均会导致检测灵敏度下降和标准化难度增大。该研究选择双酚酸(BVA)作为双酚A(BPA)的半抗原与蛋白质偶联制备人工抗原免疫BALB/c小鼠,获得一株可分泌BPA单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。利用3-氨丙基三乙氧基硅烷硅化处理酶标板,将BVA直接包被在酶标板上,建立了一种基于MAb的半抗原直接包被的BPA间接竞争ELISA法。该检测方法最低检测限IC10为0.29 ng/mL,半数抑制率IC50为5.4 ng/mL,水样中加标回收率为94.04%~102.31%。与人工抗原包被BPA ELISA检测方法(IC10:0.5 ng/mL,IC50:16.65 ng/mL,水样中加标回收率为89.72%~105.25%)相比,检测灵敏度显著性提高。
关键词
双酚A
单克隆抗体
酶联免疫吸附法
半抗原包被
Keywords
bisphenol A
monoclonal antibody
enzyme-linked immunosorbent assay
hapten coated
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立
张玉超
刘良禹
朱思洁
刘旭东
《食品研究与开发》
CAS
2024
0
下载PDF
职称材料
2
半抗原直接包被的磺胺二甲氧嘧啶酶联免疫吸附分析法的建立
张玉超
周洪波
刘良禹
朱思洁
刘旭东
《食品科技》
CAS
北大核心
2023
0
原文传递
3
基于单克隆抗体的双酚A半抗原直接包被的酶联免疫吸附法的建立
张玉超
刘旭东
《食品科技》
CAS
北大核心
2020
8
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