布鲁氏菌病M5、S2疫苗免疫血清半抗原-琼脂扩散试验方法检测评价

目的应用NH-AGID方法对布鲁氏菌M5、S2疫苗株免疫血清进行检测,评价该方法适用性。方法选取3~5月龄羔羊74只,随机分为3组。分别以S2株1.0×1010 CFU、5.0×109 CFU灌服和皮下注射接种羔羊各25只,M5株以1.0×10^(9) CFU皮下注射接种羔羊24只。免疫后7 d~150 d采集羊全血,分离血清,经RBT初筛和SAT确诊免疫抗体阳性血清。评估NH-AGID方法对M5和S2株疫苗免疫抗体与感染抗体的鉴别诊断特异性。结果NH-AGID方法对M5株疫苗免疫阳性血清的LPS抗体检出率为100%,NH抗体检出率8.3%~29.2%,鉴别诊断特异性为82.8%。对S2株疫苗口服组免疫阳性血清的LPS抗体检出率为31.2%~66.7%,NH抗体检出率为0%;皮下注射组免疫阳性血清的LPS抗体检出率为45.4%~100%,NH抗体检出率为4.5%~20%。对S2株疫苗免疫血清的鉴别诊断特异性为96.5%。结论NH-AGID方法不完全适用于羊用布鲁氏菌疫苗M5株和S2株的鉴别诊断,该方法的鉴别诊断特异性与疫苗毒力、免疫剂量和途径等因素相关,应进一步研究明确该方法的适用范围及条件,以期合理应用于布病防控诊断工作中。

半抗原-琼脂扩散试验鉴别布鲁氏菌感染抗体和S2、Rev.1免疫抗体的研究与应用

目的布鲁氏菌病严重威胁着我国畜牧业生产和公共卫生安全,现有的常规血清学检测方法虽具有较高的敏感性与特异性,但无法区分布鲁氏菌感染抗体和S2、Rev.1疫苗免疫抗体(以下简称"鉴别诊断"),给我国执行扑杀布病感染动物的政策带来阻力。因此在S2和Rev.1疫苗免疫背景下研究天然半抗原-琼脂扩散试验(NH-GD)的鉴别诊断能力。方法优化NH-GD试验条件,测定其敏感性、特异性、重复性及鉴别诊断能力,并与荧光偏振测定法(FPA)作比较。结果 NH-GD试验具有很好的特异性和重复性,对S2免疫羊群从疫苗接种开始就具有鉴别诊断能力,而对Rev.1免疫羊群从疫苗接种122d开始具有鉴别诊断能力;与FPA作比较,一致性较好,且操作技术和所需仪器都非常简单,特别适合在基层推广使用,为我国羊布病监测提供了一个很好的检测方法。

重组人白介素-2鉴别试验方法的研究

目的 比较白介素-2鉴别试验3种方法的特点。方法 应用免疫印染法、免疫斑点法和琼脂双扩散法对白介素-2进行鉴别试验。结果 3种鉴别试验结果基本一致。其中免疫印染法的灵敏度最高、特异性最强,适合微量分析;琼脂双扩散法操作最简便,适合基层单位定性分析。结论 为选择合适的鉴别试验提供了实验依据。

一起牛场布鲁氏菌病的诊断和防治

【目的】阿勒泰地区某牛场生产母牛发生流产,经检测由布鲁氏菌病(简称布病)引起。通过淘汰阳性牛,免疫阴性牛,有效地控制了这起布病。【方法】对该牛场48月龄母牛259头进行血清学检测,成年牛布病阳性率为15.16%。淘汰阳性牛后,对该牛场220头成年牛(48月龄母牛)、72头犊牛(8月龄母牛)用布病A19疫苗进行免疫。【结果】免疫后180d,用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)检测抗体,成年牛转阴率分别为64.55%和67.73%,犊牛转阴率分别为69.44%和73.61%,半抗原琼脂扩散试验(NH-GD)检测阳性均为0,流产率下降到1.13%。【结论】布病检测用RBT初筛,SAT确诊,用NH-GD鉴别感染和免疫抗体,实施淘汰阳性牛,免疫阴性牛,能够有效防控牛布鲁氏菌病。

用ELISA检测山羊关节炎-脑炎病毒抗体

新疆畜科院兽医研究所李建军等,用ELISA对山羊关节炎-脑炎病毒（CAEV）抗体作了检测。以差速离心,结合SDS处理制备ELISA抗原,用含0.02％NaN3的炭酸盐缓冲液作抗原包被液,不加任何封闭剂,待测血清以含5％犊牛血清和0.05％吐温-20稀释,检测了922份山羊血清CAEW抗体,同时用琼脂扩散试验（AGID）进行比较。结果表明,综合试验点连续3年跟踪检测结果。

上海铁路医院1999～2001年痢疾杆菌耐药分析

目的 :分析目前上海地区痢疾杆菌耐药情况以及不同菌型间耐药性差异。方法 :应用纸片琼脂扩散法 (K B法 )对上海铁路中心医院 1999～ 2 0 0 1年 15 0株痢疾杆菌进行药敏试验。结果 :痢疾杆菌对庆大霉素、呋喃唑酮、头孢唑啉、妥布霉素、阿米卡星等较敏感 ,而对氨苄西林、复方磺胺甲唑、诺氟沙星耐药率较高 ,分别为 77.3 3 %,75 .3 3 %,18.0 0 %。结论 :对菌痢患者进行分型监测和药敏试验 ,定期及时公布本地区和全国细菌抗菌药物耐药监测情况 。

2006年度临床常见细菌分布及耐药性监测分析

目的了解2006年度本院细菌分布及对抗菌药物耐药情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法药物敏感性试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性分析采用WHONET 5.4软件。结果2006年度我院共收集患者首次分离株细菌1 497株,革兰阴性菌878株,革兰阳性菌400株,真菌219株。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌是最常见菌,检出率分别为17.0%、13.2%、8.9%、7.0%、6.9%、4.7%、3.7%、3.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的比例分别为63.9%、82.1%,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌。肠球菌对万古霉素耐药率为1.0%,对替考拉宁耐药率为3.8%。革兰阴性菌对亚胺培南-西拉司丁钠的敏感性最好,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和克雷伯菌株的检出率分别为26.1%和34.2%。在痰标本中铜绿假单胞菌检出率最高,为22.2%,对亚胺培南-西拉司丁钠和头孢他啶敏感性最好;在血标本中大肠埃希菌检出率最高,共9株,占血标本阳性率的18.4%,对万古霉素敏感性最好,耐药率为0。结论加强细菌耐药性监测,以推动临床抗菌药物的合理使用。

嗜血杆菌的分离及耐药性分析

目的了解衡阳市中心医院2010年10月至2011年11月嗜血杆菌的分离率、产酶率,并对其耐药性进行分析,指导临床合理用药,控制嗜血杆菌的流行。方法用嗜血杆菌选择性培养基对来自不同科室的607份临床标本(痰、咽拭子、支气管分泌物)进行分离培养,用卫星现象鉴定流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae,Hi)与副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae,Hp)、头孢硝基噻吩纸片进行β-内酰胺酶测定,采用琼脂纸片扩散(K-B)法检测Hi和Hp对10种抗菌药物的耐药性。结果共分离培养出嗜血杆菌136株,检出率为22.4%(136/607),其中流感嗜血杆菌31株,检出率为5.1%(31/607),副流感嗜血杆菌105株,检出率为17.3%(105/607);各科室中以呼吸内科检出率最高,检出率为9.7%(59/607),其次为儿科和心内科,分别为2.6%、2.8%。136株嗜血杆菌对青霉素普遍耐药,耐药率高达90.4%,对洛美沙星和氧氟沙星的耐药率较高,分别是68.4%、48.5%,对头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋肟的耐药率分别是9.6%、11.8%、22.1%,对四环素类如:四环素、强力霉素的耐药率分别为38.2%、8.8%,对壮观霉素、头孢曲松全部敏感,共检出产β-内酰胺酶菌株32株,产酶率为23.5%(32/136)。结论该院呼吸道嗜血杆菌感染以副流感嗜血杆菌为主,以呼吸内科感染最为严重,其次为儿科和心内科,临床上治疗嗜血杆菌感染的有效药物是头孢曲松、壮观霉素。

浅谈药敏试验方法及影响试验结果因素

本文探讨细菌药敏试验方法及影响试验结果因素。做好药敏试验质量控制。避免用药不当，产生耐药菌株或原有耐药菌株耐药性的增高。细菌药敏试验方法包括：试管稀释法（全量法）、微量稀释法、琼脂稀释法、纸片琼脂扩散法、β-内酰胺酶（青霉素酶）试验、筛选耐甲氧苯青霉素葡萄球菌的方法。并探讨影响试验结果因素。做好药敏试验质量控制。避免用药不当，产生耐药菌株或原有耐药菌株耐药性的增高。