PCR和IFA测定猪圆环病毒2型半数细胞培养感染量的比较

采用聚合酶链式反应(PCR)和间接免疫荧光法(IFA)测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID_(50)),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID_(50),并采用荧光定量PCR(Real-time PCR)法对试验结果进行验证。对于同一病毒样品,IFA法测出的TCID_(50)为10^(6.5)/mL,PCR法测出的TCID_(50)为10^(5.0)/mL,结果表明:IFA法比PCR法更敏感,更适宜用于测定PCV2的效价。

6种桐籽粕提取物对鸡新城疫病毒体内体外抗病毒作用的研究

为了解6种桐籽粕提取物对正常单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的毒性作用,以及对鸡新城疫病毒(NDV)体内外抗病毒的作用效果,首先将桐籽粕提取物直接作用于正常的单层CEF,然后将桐籽粕提取物与鸡新城疫病毒37℃作用2 h,分别接种10日龄鸡胚和加入单层CEF。试验结果表明:过NKA 70%醇洗部分,对正常CEF的毒性作用最大,水提物毒性作用最小。而对新城疫病毒,水提物(0.125 m g/m l)的抗病毒效果最好;其次为过NKA大孔吸附树脂30%醇洗部分(0.2 m g/m l),然后依次是水提物(0.5 m g/m l)、水提物(0.25 m g/m l)、无水乙醇析出物(0.2 m g/m l)。

H5N1型禽流感病毒广谱中和单克隆抗体的筛选及其中和机制初步研究

利用杆状病毒-昆虫细胞表达H5N1型禽流感病毒的血凝素蛋白(HA),纯化后的重组蛋白HA免疫小鼠并制备杂交瘤单克隆抗体,用H5N1型禽流感病毒的全病毒进行筛选,成功地获得了抗H5N1型禽流感病毒血凝素蛋白HA的单抗.MDCK细胞微量中和试验表明,单抗8G10D7可对clade2和clade9的H5N1型禽流感病毒起中和作用.Western-blot及血凝抑制实验进一步证明了该单抗的结合位点位于HA蛋白的HA1亚基上.鸡胚感染病毒预防试验结果表明,8G10D7对禽来源的和人来源的H5N1型禽流感病毒均可达到100%的保护率;在治疗试验组中,8G10D7对禽来源的病毒感染具有较高的保护率,可达100%,对人来源的H5N1型禽流感病毒最高也可达87.5%的保护率.该抗体的获得不仅为H5N1型高致病性禽流感病毒的预防和治疗带来了希望,同时其中和位点的发现也为以后亚单位疫苗的研制提供新的思路.

猪流感病毒的分离鉴定及毒力检测

为了解猪流感(SIV)在广东的存在和流行情况、流行病学规律和遗传演化,本研究从广东省采集到的棉拭子和猪肺分离到的两株H3N2亚型SIV。选其中一株(SGD2)作为研究对象,对其致病性和生物学特性进行研究。