半枝莲含药血清对膀胱癌T24细胞凋亡和黏附力的影响探究

目的:探究半枝莲含药血清对膀胱癌T24细胞凋亡和黏附力的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠20只,随机分为无药血清组、半枝莲低剂量组、半枝莲中剂量组、半枝莲高剂量组,每组5只,分别以蒸馏水及半枝莲1.5g/(kg·d)、3g/(kg·d)、6g/(kg·d)腹腔注射灌胃,连续3d。末次灌胃后抽取心主动脉血,经灭活处理及微孔过滤或获得半枝莲含药血清。体外培养膀胱癌T24细胞株,分为无药血清组、半枝莲(低、中、高剂量)组,分别对应各组动物血清,以无药血清及含10%的药物血清培养。使用CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及周期分布;MTT酶标仪法检测各药物浓度下细胞的黏附率;以蛋白印记免疫法检测凋亡相关蛋白[B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)抗体、BCL2关联X蛋白(Bax)抗体、胱天蛋白酶3(CASP3)]的表达。结果:与无药血清组比较,半枝莲低剂量组24h及48h的增殖抑制率及凋亡率、细胞G0/G1期、黏附率增加(P<0.05);与半枝莲低剂量组比较,半枝莲中剂量组24h及48h的增殖抑制率及凋亡率、细胞G0/G1期、黏附率增加(P<0.05);与半枝莲中剂量组比较,半枝莲高剂量组24h及48h的增殖抑制率及凋亡率、细胞G0/G1期、黏附率增加(P<0.05)。与无药血清组比较,半枝莲低剂量组Bcl-2相对表达量下降,Bax、CASP3相对表达量增加(P<0.05);与半枝莲低剂量组比较,半枝莲中剂量组Bcl-2相对表达量下降,Bax、CASP3相对表达量增加(P<0.05);与半枝莲中剂量组比较,半枝莲高剂量组Bcl-2相对表达量下降,Bax、CASP3相对表达量增加(P<0.05)。结论:半枝莲含药血清体外培养膀胱癌T24细胞,可有效抑制细胞增殖、降低黏附力,并能诱导细胞凋亡,具有作为抗膀胱癌药物研发的价值。

半枝莲含药血清通过抑制mTOR信号通路影响非小细胞肺癌NCI-H1650细胞上皮间质转化

目的探讨半枝莲含药血清通过抑制雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)NCI-H1650细胞上皮间质转化。方法选取健康青紫蓝大白兔制备半枝莲含药血清,根据不同剂量分为对照组、低剂量组(A组)、中剂量组(B组)、高剂量组(C组)。选取人非小细胞肺癌细胞NCI-H1650与含药血清培养,采用逆转录RT-PCR、免疫印迹、MTT、划痕实验等方法,观察4组不同剂量半枝莲含药血清抑制mTOR信号通路对NCI-H1650细胞上皮间质转化、增殖、迁移的影响。结果4组mTOR表达量差异具有统计学意义,其中C组mTOR表达量低于对照组和A组(P<0.05);4组Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达相对灰度值差异具有统计学意义,且C组Vimentin、N-cadherin灰度值低于对照组、A组、B组,E-cadherin灰度值高于对照组(P<0.05);4组24、48、72 h吸光度差异具有统计学意义,且C组24、48、72 h吸光度低于对照组、A组、B组(P<0.05);4组NCI-H1650细胞迁移率差异具有统计学意义,且A组、B组、C组迁移率低于对照组,C组低于A组、B组(P<0.05)。结论高剂量半枝莲含药血清可通过抑制mTOR信号通路影响NCI-H1650细胞上皮间质转化、增殖及迁移,从而抑制NSCLC发生和发展。