半枝莲氯仿极性部位提取物促进人结肠癌细胞凋亡及其逆转耐药的机制研究

目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)促进人结肠癌细胞的凋亡及其逆转HCT-8/5-FU细胞对5-FU耐药的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8,用Gexp技术检测其细胞凋亡相关基因的表达;用5-FU、ECSB联合5-FU干预耐药细胞株HCT-8/5-FU,检测其耐药相关基因的表达。结果在ECSB干预48 h后,能显著下调HCT-8的Bcl-2表达,并且升高Caspase 8的表达,但不影响Bax的表达;ECSB联合5-FU给药后,HCT-8/5-FU的LRP表达比5-FU给药显著下降。结论 ECSB通过上调Bax/Bcl-2和Caspase 8的表达促进HCT-8细胞的凋亡,下调LRP的表达增强HCT-8/5-FU对5-FU的敏感性。

半枝莲氯仿极性部位提取物调控linc01843逆转大肠癌5-FU耐药研究

目的探讨半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)调控linc01843逆转大肠癌5-FU耐药的作用机制。方法在5-FU干预HCT-8和HCT-8/5-FU细胞后,通过QPCR法检测linc01843的表达。用lipofectamine 3000将si-linc01843、negative control分别转染到HCT-8和HCT-8/5-FU细胞中去,用5-FU干预转染后的两株细胞,通过MTT法检测5-FU对转染si-linc01843、negative control后的两株细胞生长活力的影响。用ECSB、5-FU、以及ECSB联合5-FU干预HCT-8/5-FU细胞,通过MTT法检测其细胞活力;用5-FU、ECSB联合5-FU干预HCT-8/5-FU细胞,通过QPCR法检测linc01843的表达。结果在5-FU干预下,HCT-8和HCT-8/5-FU细胞中的linc01843表达均显著高于各自对照组(P<0.05)。在5-FU干预下,转染了si-linc01843的HCT-8和HCT-8/5-FU细胞均显著提高了其对5-FU的敏感性(P<0.05)。在HCT-8/5-FU细胞中,ECSB能显著逆转其对5-FU的耐药性(P<0.05),可显著降低HCT-8/5-FU细胞中linc01843的表达(P<0.05)。结论linc01843参与了5-FU耐药的过程,且ECSB逆转大肠癌5-FU耐药的作用机制之一是通过调控linc01843的表达。

半枝莲不同极性部位提取物体外抗结肠癌活性研究

目的通过观察半枝莲的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位提取物对人结肠癌SW620和HT-29细胞的影响,探讨半枝莲抗结肠癌的有效部位。方法半枝莲的4个极性部位提取物分别对人结肠癌SW620和HT-29细胞进行药物干预24 h,用MTT法测定4个极性部位对细胞活力的影响,并在倒置显微镜下观察细胞的形态。结果半枝莲氯仿、正丁醇、乙酸乙酯及石油醚提取物干预后,氯仿提取物使结肠癌细胞SW620、HT-29的细胞密度明显减少,细胞变小,且对两株细胞的细胞活力也有显著的抑制作用,并呈现明显的剂量依赖性;其它各极性部位的作用不明显,作用由强到弱依次为氯仿提取物>正丁醇提取物>乙酸乙酯提取物>石油醚提取物;其中氯仿提取物抗SW620和HT-29的IC50分别为65μg/mL和130μg/mL。结论半枝莲氯仿提取物是半枝莲治疗人结肠癌细胞的最主要有效部位。

石见穿乙醇提取物氯仿部位抗HIV-1活性的体外实验研究

目的筛选出中药石见穿乙醇提取物中具有抗HIV-1活性的有效部位。方法选用CEMx174细胞感染BK132HIV-1病毒为体外实验模型,利用系统溶剂分离法,根据极性大小依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇从石见穿75%醇提物浸膏中萃取4个部位,通过体外药效学实验,采用病毒引起合胞体数量和RT-PCR法,以细胞病变效应(CPE)、细胞内HIVRNA表达水平和上清中病毒载量为评价指标,观察各部位的抗HIV-1活性及有效部位的药效作用。结果显微镜下观察,仅石见穿氯仿部位组观察不到合胞体的形成,与阳性组基本一致;该部位在浓度20μg·ml-1时,细胞内HIVRNA相对量明显低于病毒组(P <0. 05),与AZT阳性组比较无明显差异(P> 0. 05),上清中病毒载量也明显低于病毒组(P <0. 05),其余4个浓度(10,5,2. 5,1. 25μg·ml-1)有一定的量效关系。结论中药石见穿醇提物仅氯仿部位对HIV-1的复制有明显抑制作用,抑制效果与阳性药物AZT无明显差异,有效浓度为20μg·ml-1,具有一定的开发和研究前景。

半枝莲阻滞人结肠癌细胞周期的机制

目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)阻滞人结肠癌细胞周期的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8、SW620,检测其细胞周期相关基因的表达。结果 ECSB干预SW620细胞后,其p16表达上升,PCNA表达下降;ECSB干预HCT-8细胞后,Cyclin D1、CDK2、CDK4表达下降。结论ECSB通过调控细胞周期相关基因的表达,抑制人结肠癌细胞的增殖。

甘肃棘豆化学成分研究Ⅲ．酸水氯仿提取部位成分分析

甘肃棘豆草粉11kg，用乙醇热回流，回收溶剂，得到浸膏，然后用1mol／L HCl溶液酸化后抽滤，滤液氯仿萃取4次，回收氯仿，得到20．0g酸性氯仿提取部位。将20g样品上硅胶层析柱，用石油醚、氯仿：石油醚(V／V)1：1、3：2、2：1、4：1、氯仿、氯仿：乙酸乙酯(V／V)20：1、10：1、乙酸乙酯、氯仿：甲醇：氨：水(V／V)70：26：2：2甲醇梯度洗脱。每20mL收集一份，共收集785份，TLC检测，合并相同部分，共得到26个组份。酸性氯仿提取物部位，经GC-MS分析，结果表明，酸性氯仿提取物中共有23种化学成分，其中17种已确定结构，另外6种有待进一步分析确定。

半枝莲对人结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响

目的探索半枝莲对人结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、12.5、25、50、75μg/mL)的半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)干预SW620细胞后,MTT法检测细胞活力,DAPI染色观察SW620细胞的凋亡,流式细胞术检测SW620细胞的周期,蛋白质印迹法(Western blot)检测SW620细胞中PCNA、Survivin的表达。结果ECSB显著抑制了SW620细胞的活力(P<0.01),并呈剂量性依赖;DAPI染色显示ECSB处理SW620细胞24 h后出现明显的细胞核固缩,核碎裂形成,提示ECSB促进SW620细胞的凋亡;流式细胞术检测结果显示在50μg/mL ECSB干预SW620细胞48 h后,S期明显增高,提示ECSB抑制SW620细胞的增殖;Western blot检测结果显示各浓度的ECSB均能显著抑制SW620细胞的PCNA表达,75μg/mL ECSB能显著抑制SW620细胞的Survivin表达。结论ECSB促进人结肠癌细胞株SW620的凋亡,抑制其增殖,其可能机制是通过下调PCNA、Survivin的表达。

粤北农村有效中草药制剂介绍(续)

复方半枝莲注射液本品为唇形科植物半枝莲(Scutellaria barbrta D.Don)的全草,山梗菜科植物半边莲(Lobelia Chinensis Lour.)的全草,茜草科植物白花蛇舌草(Hedyolis diffusa Willd.)的全草,卷柏科植物石上柏(Selaginella doederleinii Hiercn)的全草及寥科植物大黄(Rheum palmatum L.)的根水提酒沉所制成的针剂。