HLA半相合外周血活化干细胞治疗晚期实体瘤的疗效

目的:观察HLA半相合外周血活化干细胞(HLA haploidentical peripheral blood stem cells,haplo-PBSCs)对晚期难治性实体瘤患者的临床抗肿瘤疗效以及不良反应。方法:入组42例全部为2004年10月至2007年10月天津医科大学肿瘤医院生物治疗科收治的晚期难治性恶性肿瘤患者(所有入组患者均知情同意,试验工作经医院伦理委员会批准),其中卵巢癌12例,肾癌9例,肺癌8例,乳腺癌8例,结肠癌2例,胃癌2例,恶性黑素瘤1例。供者为患者健康直系亲属,进行haplo-PB-SCs的动员、采集和体外rhIL-2活化。经HLA半相合外周血干细胞治疗后,分别通过CT/PET-CT检查、RESIST标准、KPS评分、临床症状缓解率等指标来评估HLA半相合外周血干细胞的临床疗效及不良反应情况。结果:42例患者接受1个疗程治疗后,全体患者中位无进展生存期(PFS)为6个月,临床获益率(CR+PR+SD)为73.8%;患者生活质量总获益率为76.2%,生活质量评分(KPS)较治疗前平均提高20分(0～30分)。其中,KIR不相合方向为GVH组的临床获益率、无进展生存期、生活质量总获益率均显著优于HVG(或相合)组[94.1%vs60.0%,(13.4±1.3)vs(8.0±0.9)个月,89.5%vs65.2%,均P<0.05];供受者关系为母子/女组的治疗有效率、患者生存期和生活质量均显著优于父子/女组(均P<0.05);肾癌和卵巢癌的临床获益率分别为90.0%和81.8%,相对于其他类肿瘤类型高,在治疗反应性和敏感性上可能占优势。结论:HLA半相合外周血活化干细胞治疗后,机体产生非特异性的抗肿瘤作用,对改善患者症状和提高生活质量有显著效果。

人类白细胞抗原半相合亲缘性骨髓移植联合中药治疗白血病的临床观察

目的探索半相合未去除T细胞骨髓移植联合中药治疗白血病的可行性.方法4例慢性粒细胞白血病和4例急性髓性白血病患者接受人类白细胞抗原（HLA）1-3个位点不相合骨髓移植,用阿糖胞苷、环磷酰胺和全身照射或马利兰进行预处理.供者每天应用粒细胞集落刺激因子（G-CSF）250μg,连用7天后采髓.移植物抗宿主病（GVHD）预防除用环孢霉素A（CSA）和甲氨喋呤（MTX）外,在移植前4天至前1天每天用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）2.5mg/kg,移植后第7天开始每天加用骁悉（霉酚酸酯）1.0g,骨髓输入后采用益气养阴、健脾和胃等中药治疗.结果患者移植后均获得造血重建,中性粒细胞＞0.5×10^9/L和血小板＞20×10^9/L的中位时间分别是12天（10～14天）和20天（18～25天）.8例中7例有程度不一的皮肤GVHD,其中1例为Ⅳ度皮肤GVHD,2例并发Ⅳ度急性肠道GVHD,1例在81天合并感染死亡,1例在46天自动出院,2例出现出血性膀胱炎;中位随访时间18个月（2～32个月）,无病存活6例.结论供者应用G-CSF后采髓,多种免疫抑制剂联合中药治疗HLA不全相合未去除T细胞骨髓移植,在治疗白血病过程中,有效的降低了急性重症GVHD发生,提高了无病生存率.

急性白血病患者对HLA半相合造血干细胞移植的感知和体验

目的:调查急性白血病患者接受人类白细胞抗原(HLA)半相合造血干细胞移植的感知和体验。方法:采用质性研究中的现象学研究方法,于2016年2-12月对8例急性白血病行HLA半相合造血干细胞移植的患者进行半结构式访谈,根据Colaizzi 7步分析法对资料进行整理分析。结果 :急性白血病患者接受HLA半相合造血干细胞移植的感知和体验可归纳为移植前对获得新生的强烈希望、移植中遭受巨大的身心痛苦、移植后出现两种不同的心理变化、承担沉重经济负担所带来的心理压力4个主题。结论 :急性白血病患者在HLA半相合造血干细胞移植不同阶段会发生不同的、复杂的感知和体验,医护人员应了解并重视患者的心理体验,帮助其应对心理问题,构建完整的护理体系,保证移植过程的顺利进行,提高移植患者的生活质量。

父供女HLA半相合造血干细胞移植后供者DC-CIK细胞输注治疗儿童难治复发性急性髓细胞白血病1例并文献复习

目的探索儿童难治复发性急性髓细胞白血病的治疗方法。方法对1例难治复发性急性髓细胞白血病M1患儿,行父供女人类白细胞抗原(HLA)半相合造血干细胞移植,移植前骨髓原始粒细胞16%,原幼单核细胞44.5%,未缓解。供者为其父亲,HLA半相合;预处理方案采用洛莫司汀+阿糖胞苷+白消安+环磷酰胺+抗胸腺细胞球蛋白(ATG);用骁悉、环孢素、甲氨蝶呤及ATG预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果患儿移植后14 d造血功能重建,移植后21 d复查骨髓完全缓解,骨髓染色体检查完全转为供者型,移植后23 d开始每周输注供者树突状细胞-细胞因子诱导为杀伤细胞(DC-CIK)共5次,细胞数按梯度递增。患者定期监测血常规各项指标均基本正常,移植后130 d复查骨髓示完全缓解,现继续随访中。结论供者DC-CIK细胞过继性治疗降低了异基因造血干细胞移植后白血病的复发概率,是有效且值得探索的新手段。

急性白血病半相合外周血造血干细胞移植后发生单纯肠道aGVHD的影响因素及治疗转归

目的:观察急性白血病半相合外周血造血干细胞移植后影响单纯肠道aGVHD发生的危险因素及治疗转归。方法:回顾性分析我院2010年1月至2016年12月期间行半相合外周血造血干细胞移植的19例急性白血病患者的临床资料,探究发生与未发生肠道aGVHD患者的临床特征差异,单因素分析患者性别、供受者性别差异、供者年龄、预处理方案、兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白用量、回输的单个核细胞计数及CD34^+细胞计数对肠道aGVHD发生的影响。观察发生肠道aGVHD患者治疗后的临床转归。结果:19例患者中5例于移植后发生肠道aGVHD(Ⅱ级1例,Ⅲ级3例,Ⅳ级1例),发生时间分别为移植后7,22,27,70和154 d。单因素分析显示,患者性别、供受者性别差异、供者年龄、兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白用量、回输的单个核细胞计数及CD34^+细胞计数与肠道aGVHD的发生无相关性,BuCy预处理方案同肠道aGVHD的发生可能相关(P<0.05)。5例患者中2例经甲强龙1 mg/(kg·d)治疗后好转,1例患者应用甲强龙联合他克莫司治疗后好转,其余2例患者对激素耐药,应用含CD25单克隆抗体的免疫抑制方案治疗后好转。结论:半相合外周血造血干细胞移植中BuCy预处理方案可能对移植后肠道aGVHD的发生有一定的影响,需要扩大病例数进一步观察确定。

化疗联合半相合供者淋巴细胞输注治疗难治性非霍奇金淋巴瘤实验及临床研究

目的观察化学治疗联合有血缘关系HLA半相合淋巴细胞输注治疗难治性非霍奇金淋巴瘤的安全性和有效性。方法通过测定半相合供者淋巴细胞与患者淋巴瘤细胞共培养后淋巴瘤细胞的凋亡率,确定HLA半相合供体淋巴细胞体外抗淋巴瘤细胞的有效性。选取难治性非霍奇金淋巴瘤24例,在常规化疗后,输注有血缘关系HLA半相合淋巴细胞,对完成两个联合疗程的患者进行评价。结果淋巴瘤细胞培养过程中加入HLA半相合供体淋巴细胞可促进淋巴瘤细胞凋亡。24例共完成47个疗程的联合治疗,19例完成两个疗程以上,13例患者完全缓解,中位随访时间18个月,7例处于无病生存状态。半相合淋巴细胞输注后,低度发热5例,轻度皮肤潮红伴散在皮疹3例,对症处理后消失。结论常规化疗联合有血缘关系HLA半相合淋巴细胞输注治疗安全有效。

荷载自体白血病抗原的HLA半相合DC-CIK联合CAG方案治疗老年AML

目的观察荷载自体白血病抗原的HLA半相合树突状细胞．细胞因子诱导的杀伤细胞（DC．CIK）联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病（AML）的安全性和有效性。方法选取老年AML124例，采用化疗CAG方案，其中65例CAG方案化疗后输注荷载自体白血病抗原的HLA半相合DC．CIK细胞作为细胞组，其余59侧单纯使用CAG方案化疗作为对照组。对2组中达到完全和部分缓解的患者均按各自的原方案巩固治疗，半年内每2个月1次、半年后每3个月1次、1年以上每半年1次，并对其跟踪随访。结果所有124名患者均完成了2个以上的疗程，细胞组：65例中完全缓解（CR）54例（83．08％）、部分缓解（PR）7例（10．77％）、未缓解（NR）4例（6．15％），总有效率93．85％；对照组：59例中完全缓解34例（57．63％）、部分缓解10例（16．95％）、未缓解15例（25．42％），总有效率74．58％。巩固治疗实施后细胞组、已随访6—53个月，存活〉12个月者32例、〉24个月者16侧；对照组已随访7～31个月，存活〉12个月者22例、〉24个月者4例，使用Kaplan-Meier分析两组总生存率有统计学差异（P〈0．05）。

外周血CD34^+造血干细胞加适量T细胞输注进行HLA半相合的异体移植

对1例Ph+染色体的急淋患儿进行母子间HLA半相合的异体外周血造血干细胞移植 ,为避免由于HLA不相合所产生的由T细胞介导的严重移植物抗宿主病(GVHD) ,采用了CD34+细胞正性分离去除淋巴细胞 ;同时为避免由于T细胞过度去除而引起宿主抗移植物反应(HVG)导致植入失败 ,在移植次日又加入部分T细胞 ,使病儿接受CD34 +细胞6×106/kg 和CD3 +细胞1.05×107/kg。结果 :随访1年来 ,红系、粒系和巨核系均恢复正常 ,临床上仅出现一过性的IIOaGVHD以及轻微的局限于口唇粘膜的cGVHD。STR位点DNA检验以及染色体检查 :移植后 +180天受体已从供体型嵌合体转为完全供体型 ,病儿获得植入成功。结果表明 ,常规剂量的CD34 +细胞移植加以适量CD3 +T细胞 ,可克服HLA部分不相配的难点 ,减轻GVHD ,同时也可避免由于过度的T细胞去除而出现的HVG。

亲缘间HLA半相合外周血造血干细胞移植治疗急性白血病的临床研究

目的探讨HLA半相合外周血造血干细胞移植(PBSCT)治疗急性白血病的疗效及安全性。方法4例急性白血病患者行HLA不全相合PBSCT,其中急性淋巴细胞白血病2例,急性非淋巴细胞白血病-M4b1例、M4EO1例,移植时均处于完全缓解状态。HLA配型1、2个位点不合各1例,3个位点不合2例。预处理方案由全身照射或白消胺、阿糖胞苷、环磷酰胺、司莫司汀组成。移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用环胞素A、甲氨蝶呤、霉酚酸酯、抗胸腺细胞球蛋白四联方案。结果患者移植过程顺利,4例患者均获得造血功能重建并达完全供者植入。3例出现Ⅰ度急性GVHD,1例出现Ⅱ度急性GVHD。1例并发巨细胞病毒间质性肺炎,2例并发真菌肺炎。至今2例患者分别无病存活30月和15月,1例目前为移植后4月,1例死亡。结论HLA半相合PBSCT疗效较好、安全可行,为无HLA完全相合供者的白血病患者提供了新的治疗手段。

Tju103和CTLA4-Ig诱导MHC半相合小鼠骨髓移植耐受比较

目的:观察Tju103和CTLA4-Ig各自对MHC半相合小鼠骨髓移植免疫耐受的诱导。方法:半相合供鼠T细胞与受鼠抗原、Tju103(或CTLA4-Ig)共育后与骨髓细胞混合移植,观测移植后受情况。结果:A.单纯照射组:全部小鼠于照射后11d内死于造血衰竭;B.白血病CTX治疗组:全部小鼠于接种白血病细胞后16～23d死于白血病;C.单纯移植组:全部小鼠于移植后21d内死于移植物抗宿主病(GVHD);D.CsA预防组:5只小鼠于移植后8～22d死亡,1只死于白血病,各有2只死于GVHD和感染,5只活过30d;E.Tju103处理组:4只小鼠于移植后9～26d死亡,2只死于GVHD,各有1只死于白血病和感染,6只活过30d;F.CTLA4-Ig处理组:2只小鼠于移植后17～26d死亡GVHD,8只活过30d。结论:Tju103和CT-LA4-Ig均明显延长生存期,降低GVHD发生和严重程度,CTLA4-Ig保留有抗感染和移植抗白血病(GVL)作用,而Tju103没有。

半相合造血干细胞移植中发生的输血相关急性肺损伤:1例病例报告附文献复习

目的探讨HLA半相合造血干细胞移植过程中发生输血相关急性肺损伤(TRALI)的风险性及其处理、预防措施。方法对1名行HLA半相合造血干细胞移植治疗的患者在移植过程中出现的TRALI的临床发病特点、实验室检查、影像检查、治疗措施进行分析,并对相关文献做复习。结果发现该患者在移植过程中因输注机采新鲜血小板而导致TRALI,经积极抢救无效,最终病情恶化死亡。结论半相合造血干细胞移植过程中若反复输血(包括血液成分),存在发生TRALI的较大风险,积极有效的预防和及时的处理措施显得尤为必要。

半相合异基因骨髓造血干细胞移植治疗再障病人的护理

目的探讨和总结10例半相合异基因骨髓造血干细胞移植治疗重型再障病人的护理。方法护理内容包括:移植前患者及供者的准备、心理干预、全环境保护的层流室的建立、中心静脉导管的护理、预处理及造血干细胞回输的护理、移植后及早对感染的防护、其他并发症的观察和护理等有效措施。结果 10例患者情绪稳定,积极配合治疗,移植过程顺利,移植后均获造血及免疫重建,其间无致死性严重感染发生,造血功能和免疫功能恢复较快,经检测HLA为供者型,至今无病生存10例。结论半相合异基因骨髓造血干细胞移植前后的护理对该类患者的康复有重要作用。

活化半相合混合骨髓移植GVHD反应的动物实验研究

目的:观察活化半相合混合骨髓移植的GVHD反应。方法:以急性放射病615小鼠模型为受鼠,615×C57BL/6杂交F1代小鼠为半相合供鼠。半相合鼠骨髓和脾细胞中混合一定比例的同基因脾细胞,经白细胞介素-2体外活化后,进行活化半相合混合骨髓移植。观察移植后小鼠死亡率、白细胞系造血重建、脾结节、体内混合淋巴细胞培养、嵌合体及病理学改变,比较不同移植方式的GVHD反应。结果:活化半相合骨髓移植组与未活化半相合骨髓移植组具有明显的GVHD反应。供受鼠3:1活化半相合混合骨髓移植不能明显降低GVHD反应,供受鼠脾细胞比例1:1和2:1移植组可以明显减轻GVHD反应。表现为外周血自细胞及骨髓造血恢复快,体内混合淋巴细胞反应降低及嵌合体百分率升高。结论:活化半相合混合骨髓移植方式可以降低GVHD反应,并与同基因和异基因脾细胞比例有关。

供、受体T细胞比例对HLA-半相合异基因造血干细胞移植移植物抗宿主反应的影响

目的研究移植物和受体的T细胞比例与移植物抗宿主反应(GVHD)的关系。方法①实验研究40对小鼠(受体SD小鼠和供体Wistar小鼠)按移植物和受体的T细胞1∶1、2∶1和4∶1比例和对照组分为4组进行移植,并观察移植后GVHD的发生和程度。②临床研究中5例9～18岁患者进行HLA-半相合异体外周血造血干细胞移植,其中4例进行CD34+细胞分选,并计算移植物和受体循环血中T细胞绝对值,按2∶1比例输入;另1例进行常规异体外周血造血干细胞移植。结果实验发现4组小鼠,1∶1和2∶1组的GVHD最轻,与对照组比较差异有统计学意义,而4∶1组的GVHD与对照组比较差异无统计学意义。临床中1例常规方法移植者出现超急性重度GVHD,死于并发间质性肺炎;其余4例仅出现轻度急性GVHD,1例在+155d时死于多发性神经根炎,3例病人移植成功,且均无病生存3年以上。结论移植物内T细胞与受体循环血内的T细胞绝对值之比介于1∶1和2∶1之间较为合适;临床按此比例进行移植,尤其对于HLA部分不相合或半相合的单倍体移植,可获得更好的抗肿瘤效果和较轻的GVHD。

HLA半相合非清髓性造血干细胞与间充质干细胞共移植治疗重症再生障碍性贫血1例

目的:观察HLA半相合非清髓性造血干细胞与间充质干细胞(MSC)共移植治疗重症再生障碍性贫血(SAA)的疗效及安全性。方法:1例24岁男性SAA患者。应用非清髓性预处理方案,进行HLA半相合异基因外周血造血干细胞和MSC共移植。移植rhG-CSF动员的供者外周血单个核细胞9.22×108/kg,CD34+细胞8.56×106/kg,及体外扩增培养的供者骨髓MSC2.12×105/kg。结果:移植后+12d中性粒细胞数>0.5×109/L,+21d WBC4.5×109/L,Hb99g/L,PLT108×109/L。经HLA配型,红细胞亚型和VNTR检测,为供者型完全嵌合体。随访14个月,无急、慢性移植物抗宿主病(GVHD)发生。结论:HLA半相合非清髓性造血干细胞与MSC共移植治疗SAA是安全有效的方法。

Rh阴性血型同胞间半相合造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病临床研究

目的总结国内首例Rh阴性血型同胞间半相合造血干细胞移植经验。方法对1例53岁慢性粒细胞白血病慢性期女性患者实施同胞间半相合造血干细胞移植(外周血干细胞加骨髓干细胞混合移植),观察造血重建及移植相关并发症。结果患者ANC>0.5×109/L,PLT>20×109/L的时间分别为+15d,+18d;染色体检查提示有XY染色体;+39d内未观察到急性移植物抗宿主病、肝静脉闭塞病、肝肾功能损伤等移植并发症。结论半相合造血干细胞移植可解决供者来源困难,是治疗慢性粒细胞白血病的有效手段。

IL-2短期活化的HLA半相合的外周血单个核细胞治疗晚期恶性实体瘤初步观察

目的:初步探讨IL-2短期活化的HLA半相合的异体外周血单个核细胞(allo-mPBMCs)治疗晚期转移性/化疗抗性实体瘤的可行性。方法:11例晚期转移性/化疗抗性恶性实体瘤患者,供者为与患者HLA半相合直系亲属。供者经10μg/kg·dG-CSF动员3天后采集PBMC,体外用大剂量rhIL-2培养后回输患者。观察治疗后临床反应,采用流式细胞仪、LDH和ELISA试剂盒检测动员、活化前后表型,IL-2短期活化前后的非特异性杀瘤活性以及患者回输前后血清中各种细胞因子的含量变化。结果:11例患者回输的HLA半相合allo-mPBMCs总数达(2.5～4.3)×1010。体外经G-CSF动员后T细胞,尤其是CD4+T细胞显著下降,而NK细胞比例显著上升;经大剂量IL-2短期活化后,各种细胞亚群比例未见改变,但活化细胞(包括CD69+和CD25+细胞)亚群比例显著升高。体外实验中可观察到IL-2短期活化的allo-mPBMCs具有类似LAK样的较高的非特异性杀瘤活性。经过治疗,11例患者血清中Th1类细胞因子,如IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α含量明显升高,而Th2类细胞因子,如TGF-β含量明显下降。治疗后8例观察到临床症状的缓解,或肿瘤标志物的降低,或影像学资料的改善,其中1例治疗后4个月达到部分缓解,而3例出现进展,其中2例死亡。结论:IL-2短期活化的HLA半相合的allo-mPBMCs具有明显的抗肿瘤效应,为治疗晚期转移性/化疗抗性实体瘤提供了新的希望。