中国北方少数民族人群同型半胱氨酸代谢酶的遗传多态性

目的 了解我国北方地区3个少数民族人群中MTHFR和CBS基因的遗传多态性,获得MTHFR C677T和A1298 C 以及CBS T833C和G919A位点的群体遗传学数据。方法 应用PCR-RFLP,PCR-ARMS技术分别调查了吉林延边朝鲜族、新疆乌鲁木齐维吾尔族和回族新生儿的基因型分布。结果 回族和朝鲜族MTHFR677纯合突变频率为16.7％和20.9％,与中国北方人群的总体水平基本一致,而维吾尔族人群纯合突变频率(5.3％)低于其它民族,但差异无显著性(P>0.05);朝鲜族人群CBS基因T833 C纯合突变频率(7％)低于其它两个民族(15.8％～16.7％)。结论 CBS T833 C位点多态性也可能存在群体差异。

同型半胱氨酸代谢酶基因多态性与脑血栓形成的关系

目的 探讨同型半胱氨酸 (Hcy)代谢酶、N5,1 0 -亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)及胱硫醚 β合成酶 (CBS)基因多态性与脑血栓形成的关系。方法 应用聚合酶链 -限制性内切酶片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)和扩增阻滞突变体系法检测 87例脑血栓形成患者和 80例对照者MTHFR和CBS基因型。结果 两组基因型分布、纯合子突变率及等位基因频率差异无显著性 (P >0 0 5 )。

同型半胱氨酸代谢酶基因多态性与汉族多发性骨髓瘤预后的关系

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)代谢酶基因多态性与汉族多发性骨髓瘤(MM)预后不良的关系。方法选取河北北方学院附属第一医院2018年2月至2020年3月收治的128例汉族MM患者(疾病组)和同期招募的120例汉族健康志愿者(对照组)为研究对象,两组均检测血浆Hcy水平及Hcy代谢酶基因多态性,包括亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、MTHFR A1298C、蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G、胱硫醚β合成酶(CBS)844ins68、蛋氨酸合成酶(MS)A2756G。疾病组采用常规方法治疗,于治疗后跟踪随访1年并统计预后不良的发生情况,采用Logistic多元回归分析Hcy代谢酶基因多态性与疾病组预后不良的关系。结果疾病组血浆Hcy水平高于对照组[(15.01±2.98)μmol/L比(8.45±1.69)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.05)。疾病MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率分别为26.56%、29.30%,高于对照组的6.67%、16.25%,CT基因型频率为5.47%,低于对照组的19.17%,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组其余基因位点基因型分布和等位基因频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。疾病组预后不良的发生率为49.22%(63/128),年龄、血小板计数和血清β2微球蛋白、κ轻链、血浆Hcy水平及MTHFR C677T位点TT基因型均是疾病组预后不良的影响因素(OR=7.286、0.545、6.841、6.284、8.117、8.440,P<0.05)。结论汉族MM患者血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率均高于健康人群,CT基因型频率低于健康人群,且汉族MM患者预后不良与血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型有关。

同型半胱氨酸及其代谢酶基因多态性与脑梗死的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚合成酶(CBS)基因T27796C、蛋氨酸合成酶(MS)基因A2756G 3种基因突变及血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与脑梗死的关系,进一步确定遗传因素对血浆Hcy水平的影响,以及遗传因素在脑梗死发病中的意义。方法选择年龄与性别基本匹配的脑梗死组62例,健康对照组30名。采用高效液相色谱法测定受检者血浆Hcy水平,并应用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测基因表型。计量资料用x±s表示,比较采用t检验和方差分析。基因型和等位基因频率分布采用2χ检验。应用Logistic回归分析筛选脑梗死的危险因素。结果脑梗死组血浆Hcy水平明显高于健康对照组[(23±12)与(11±14)μmol/L,P<0.05],脑梗死组MTHFR基因TT纯合基因型和T等位基因频率(分别为56.5%,71.8%)均明显高于健康对照组(分别为16.7%,35.0%)。MTHFRC677T基因型和等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。MTHFR基因C677T纯合子基因型血浆Hcy水平显著高于野生型[(21±11)与(14±3)μmol/L,P<0.01]。CBS T27796C基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05),但CBS基因T27796C纯合子基因型血浆Hcy水平显著高于杂合子基因型[(23±11)与(15±6)μmol/L,P<0.01],又高于野生型[(23±11)与(15±5)μmol/L,P<0.01]。MS A2756G基因型和等位基因频率分布组间差异无统计学意义,血浆Hcy水平组间差异无统计学意义。Logistic回归分析显示脑梗死的危险因素为血浆Hcy水平和MTHFR C677T纯合子基因型。结论血浆Hcy水平与脑梗死的发生有一定联系。MTHFR基因C677T位点纯合子突变、CBS基因T27796C位点纯合子突变可引起血浆Hcy水平升高。MTHFR C677T纯合子突变致血浆Hcy水平增高,可能是引起脑梗死发病的重要遗传因素。

半胱氨酸代谢关键酶基因DNA甲基化与动脉粥样硬化性缺血性脑卒中的相关性研究

目的:探讨半胱氨酸代谢关键酶基因表观遗传学改变与汉族人群缺血性脑卒中(IS)的发病关系。方法:采用病例-对照研究设计,以动脉粥样硬化性脑梗死(ATS)患者30例为病例组,另选择同期体检健康人群30例为对照组。寻找目的基因(基因上游5 kb的区域一直到第2外显子区域)的CpG岛区域,使用重亚硫酸盐修饰直接测序技术进行样本DNA甲基化检测,运用单因素或Logistic回归分析检测2组间DNA甲基化分布差异。结果:胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因4个CpG岛同源性非常高,放弃甲基化分析;5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因有2个CpG岛;半胱氨酸合成酶(MTR)基因有1个CpG岛。结果显示,2组这2个基因所有CpG岛都未发现DNA甲基化情况。结论:未发现MTHFR和MTR基因DNA甲基化改变与汉族人群ATS相关。

单纯收缩期高血压患者同型半胱氨酸代谢关键酶基因多态性相关因子研究

目的探究在单纯收缩期高血压(ISH)患者之中,同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶即亚甲基-4-氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因多态性及代谢相关因子所具有的临床价值,并探寻ISH的易感基因。方法择取2013-03—2015-12间于深圳市宝安区中心医院就诊并确诊为单纯ISH的59例患者,设为研究组;择取同期接受临床检查的59例健康受检者,设为对照组。组间对比两组患者的高同型半胱氨酸血症发生率,MTHFR等位基因占比,CBS阳性等位基因占比,叶酸与维生素B浓度以及Hcy水平。结果 (1)两组受检者在MTHFR、CBS基因构成上差异有统计学意义(P<0.05);研究组MTHFR等位基因T占比64.41%、基因C占比35.59%,对照组则分别占比37.29%、62.71%;研究组CBS阳性等位基因占比分别为66.10%、33.90%,对照组则依次为88.14%、11.86%。(2)研究组在Hcy水平上高于对照组,在叶酸和维生素B6、B12等代谢相关因子上均要低于对照组。(3)高同型半胱氨酸血症:研究组有突变型16例,野生型6例,总发生率37.29%(22/59),对照组有突变型6例,野生型3例,总发生率为15.25%(9/59)。就上述指标而言,研究组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在Hcy的代谢过程中,关键酶基因的多态性可导致相关酶出现活性变化,高Hcy酸血症可以提高ISH的发生率,MTHFR、CBS均为ISH的易感基因,作为ISH的中间表型,Hcy可以通过补充维生素B与叶酸来实现有效的降低,ISH的发生也将被延缓。

单纯收缩期高血压患者同型半胱氨酸代谢关键酶基因多态性相关因子研究

目的 研究同型半胱氨酸代谢关键酶亚甲基 4 氢叶酸还原酶 (MTHFR)及胱硫醚 β 合成酶 (CBS)基因多态性及其代谢相关因子在收缩期高血压 (ISH)发病中的作用 ,寻找ISH的易感基因及中间表型。方法 从天津高血压防治区选取ISH患者 5 5例 ,对照组 46例 ,应用分子生物学方法对其进行MTHFRC6 77,CBSG919,T833,C341位点基因多态性检测 ,并同时测定血中同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸、维生素B6 、维生素B1 2 浓度 ,并对结果进行相关性分析。结果 ISH组中MTHFR及CBS基因构成与对照组不同存在统计学差异 (P <0 0 5 )。ISH组中MTHFRT等位基因为 6 9 1% ,其发生率高于对照组 (P <0 0 1) ;CBS阳性等位基因发生率为 15 2 % ,与对照组不同。ISH组Hcy水平 [( 17 70± 8 5 0 ) μmol L]高于对照组 [( 10 6 5± 3 10 ) μmol L](P <0 0 5 )。而叶酸、维生素B6 、维生素B1 2 浓度与对照组相比明显降低 (P <0 0 5 )。ISH组中高同型半胱氨酸血症的发生率高于对照组 ,具有统计学差异 (P <0 0 5 ) ,ISH组及对照组三种基因型血浆Hcy水平的改变存在着相同的趋势 ,即突变型高于杂合型与野生型。但血压升高的水平与Hcy浓度之间并无同向性变化。Hcy水平的增高可以增加ISH的发病 ,叶酸在ISH的发病中具有负性作用。

缺血性心脑血管病患者血浆同型半胱氨酸水平及其代谢相关酶基因多态性分析

目的 了解缺血性心脑血管病患者血浆同型半胱氨酸 (Hcy)水平的变化 ,分析该变化与Hcy代谢相关酶基因变异的相关性。方法 用高效液相色谱结合荧光检测法测定 80名正常人 ,86例脑梗死 ,6 6例心肌梗死患者血浆总同型半胱氨酸 (tHcy)浓度 ,分析血浆tHcy水平与缺血性心脑血管疾病与胱硫醚 β 合成酶 (CBS)基因 844ins6 8、甲硫氨酸合成酶 (MS)基因A2 75 6G、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C6 77T三种Hcy代谢相关酶基因突变之间的相关性。结果 缺血性心脑血管病患者血浆tHcy水平 [脑梗死组 (19.5 9± 10 .6 5 ) μmol/L ,心肌梗死组 (2 1.13± 9.5 7) μmol/L]较正常对照组[(13.73± 4.78) μmol/L]显著升高 (P <0 .0 5 ) ;MTHFRC6 77T纯合突变者血浆tHcy水平无论在正常对照组或患者组均较野生型及杂合突变者明显升高 (P <0 .0 5 )。MSA2 75 6G ,CBS 844ins6 8基因突变者血浆tHcy水平差异无显著性。结论 高Hcy血症是缺血性心脑血管病的重要危险因子 ,MTHFRC6 77T纯合突变可能是导致血浆Hcy水平轻、中度增高的遗传决定簇。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C667T多态性与冠状动脉慢血流现象的关系研究

目的观察亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与中国南方汉族人群中冠状动脉慢血流现象(CSFP)的关系,进一步探讨遗传因素在CSFP发病中的意义。方法收集经冠状动脉血管造影证实冠脉正常的患者214例作为研究对象,并利用校正的TIMI帧数法(CTFC)分组为慢血流组(143例)和对照组(71例),应用焦磷酸测序法(Pyrosequencing)检测患者C677T基因表型,分析MTHFR基因C677T多态性与CSFP的关系。结果慢血流组MTHFR基因(TT+TC)基因型和T等位基频率均明显高于对照组(69.2%、49.3%。x^2=8.05,P<0.01;4217%、296%,x^2=6.87,P<0.01)。慢血流组男性比例明显高于对照组(59.4%、36.6%,x^2=9.90,P<0.01),同型半胱氨酸(Hcy)和尿酸(UA)水平明显高于对照组(P<0.05或0.01),慢血流组叶酸(FA)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(P<0.05),Logistic回归分析均显示(TT+TC)基因型[OR=1.962,95%CI(1.049~3.669),P<0.05]、Hcy水平升高[OR=1.087,95%CI(1.012-1.168),P<0.05]、男性[OR=2.507,95%CI(1.347~4.664),P<0.01]和UA水平升高[OR=1.008,95%CI(1.003~1.013),P<0.01]患者CSFP发病风险增加。结论MTHFR基因C677T多态性与CSFP发病相关,携带下等位基因可能是中国南方汉族人群冠状动脉慢血流现象发病的危险因素之一。

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。