P2X4调控NLRP1/Caspase-1通路在脑出血炎性损伤中的作用机制

目的探讨嘌呤能受体2X4(P2X4)调控含NLR家族pyrin结构域蛋白1(NLRP1)/半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)通路在脑出血炎性损伤中的作用机制,为寻找脑出血治疗新措施提供实验依据。方法选取100只8~10周C57BL/6雄性小鼠建立脑出血模型,采用随机数字表法分为对照组、模型组、P2X4激动剂组、P2X4拮抗剂组、NLRP1激动剂组,每组各20只。对照组、模型组经小鼠经腹腔给予15μl生理盐水,P2X4激动剂组给予15μl胞苷5′-三磷酸(5′-CTP);P2X4拮抗剂组小鼠经腹腔注射15μl P2X4特异性拮抗剂5-BDBD;NLRP1激动剂组给予15μl胞壁酰二肽(MDP)。在实验第1、3、5、7天进行改良神经功能缺损评分(mNSS),采用ELISA法测量炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定P2X4、NLRP1、Caspase-1蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法测定P2X4、NLRP1、Caspase-1 mRNA表达,并进行组间比较。结果建模后第1、3、5、7天,模型组的mNSS评分高于对照组,P2X4激动剂组、NLRP1激动剂组的mNSS评分高于模型组,而P2X4拮抗剂组的mNSS评分低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。建模后第1、3、5、7天,模型组的IL-1β、TNF-α水平高于对照组,P2X4激动剂组、NLRP1激动剂组的IL-1β、TNF-α高于模型组,而P2X4拮抗剂组的IL-1β、TNF-α低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组的P2X4、NLRP1、Caspase-1 mRNA和蛋白表达高于对照组,P2X4激动剂组、NLRP1激动剂组的相应指标均高于模型组,而P2X4拮抗剂组的相应指标低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论P2X4通过调控NLRP1/Caspase-1通路参与脑出血炎性损伤的发生发展,抑制该通路对改善炎症反应有一定积极作用,值得深入研究。

血清CRISPLD2水平对脓毒症患者的诊断及预后评估价值

目的 探讨血清半胱氨酸富集分泌蛋白含LCCL结构域2（CRISPLD2）水平对脓毒症的诊断及预后预测价值.方法 回顾性分析2014年12月至2016年12月入住河北医科大学第一医院重症加强治疗病房（ICU）成人脓毒症患者的临床资料,根据其病情严重程度分为脓毒症组、严重脓毒症组、脓毒性休克组;同时以100例健康体检者作为健康对照组.收集研究对象入院24 h内血清CRISPLD2、降钙素原（PCT）、C-反应蛋白（CRP）、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）和序贯器官衰竭评分（SOFA）,以及28 d预后;分析脓毒症患者CRISPLD2与PCT、CRP、APACHEⅡ和SOFA评分的相关性;用受试者工作特征曲线（ROC）评估CRISPLD2对脓毒症诊断及预后的预测价值.结果 共入选115例脓毒症患者,其中脓毒症52例,严重脓毒症48例,脓毒性休克15例;28 d死亡29例,病死率为25.2%.脓毒症患者CRISPLD2水平与健康对照组差异无统计学意义（mg/L：204.1±74.5比211.3±12.0,P〉0.05）;但脓毒性休克组CRISPLD2水平明显低于脓毒症组和严重脓毒症组（mg/L：139.0±55.0比240.2±89.6、233.0±8.9,均P〈0.05）.脓毒症患者PCT、CRP、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显高于健康对照组,且随病情程度加重呈递增趋势.脓毒症死亡者CRISPLD2水平与存活者相比差异无统计学意义,PCT、CRP水平则明显升高.脓毒症患者血清CRISPLD2水平与PCT、CRP、APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈负相关（r值分别为-0.089、-0.431、-0.115、-0.201,均P〈0.05）.ROC曲线分析显示,CRISPLD2、PCT、CRP诊断脓毒症的ROC曲线下面积（AUC）和95%可信区间（95%CI）分别为0.907（0.871-0.944）、0.922（0.886-0.958）、0.916（0.878-0.954）,均P=0.000;当CRISPLD2截断值〉216.0 mg/L时诊断脓毒症的敏感度为96.7%,特异度为92.6%,介于PCT与CPR之间.CRISPLD2评估预后的AUC明显低于PCT〔0.617（0.507-0.727）比0.786（0.668-0.903）,P〈0.01〕;当CRISPLD2截断值为103.5 mg/L时,敏感度为100%,但特异度为25.6%.结论 CRISPLD2可作为诊断脓毒症的潜在生物标志物之一,但不能预测脓毒症患者的预后.