孔雀石绿褪色分光光度法测定半胱氨酸

根据硼砂-氢氧化钠缓冲溶液中半胱氨酸与碱性三苯甲烷染料孔雀石绿的加成反应,首次提出加成反应褪色分光光度法测定半胱氨酸含量。反应前后体系的最大吸收波长均为616 nm,选择616 nm为测定波长。由于反应生成了无色硫醚衍生物,使得溶液褪色,体系吸光度降低,据此建立分析方法。半胱氨酸在质量浓度2.00~12.0 mg·L^(-1)范围内,与吸光度差值ΔA呈线性关系,相关系数r=0.9993,表观摩尔吸光系数为1.006×10^(4) L/(moL·cm),方法检出限为0.089 mg·L^(-1)。该法用于复方氨基酸注射液、半胱氨酸胶囊中半胱氨酸含量的测定,测定值的相对标准偏差(n=6)均在3%以内,方法快速简便、灵敏度高,结果满意。

甲基蓝褪色光度法测定酱油中半胱氨酸含量

在碱性硼砂-氢氧化钠缓冲溶液中,半胱氨酸能与酸性三苯甲烷染料甲基蓝发生加成反应,形成无色的硫醚衍生物,体系的吸光度降低,溶液褪色,最大吸收波长和最大褪色波长均为592 nm。于波长592 nm处测定体系的吸光度,确定最佳反应条件后建立标准曲线,用对照品标准曲线法测定样品中半胱氨酸的含量。半胱氨酸在质量浓度在0.20~2.40 mg/L内,与吸光度差值ΔA呈现良好的线性关系,相关系数r=0.9995,表观摩尔吸光系数为6.752×10^(4) L/(mol·cm)。该方法用于市售酱油和半胱氨酸护肝胶囊样品中半胱氨酸含量的测定,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于3%,加标回收试验平均回收率为100.4%(一级酱油)、98.08%(三级酱油),护肝胶囊中测定值与标示量基本一致。建立的方法快速简便、专属性强,结果准确可靠。

超分子双波长共振光散射法测定半胱氨酸含量

对半胱氨酸-孔雀石绿体系的反应条件进行优化,建立孔雀石绿单波长、双波长共振光散射光谱法检测半胱氨酸的新方法。结果表明:在硼砂-氢氧化钠缓冲溶液中,孔雀石绿与硼酸结合产生共振光散射,在波长285、338 nm处有2个较强烈的共振光散射峰;加入半胱氨酸后,共振光散射更加强烈,且共振光散射强度随着半胱氨酸浓度增加而增强。在波长285、338 nm处,半胱氨酸在0.10~0.60 mg/L范围内与体系共振散射强度差值(ΔI)呈线性关系,检出限分别为10.7、13.3μg/L;双波长叠加法的检出限为3.23μg/L。本方法可应用于半胱氨酸护肝胶囊和酱油中半胱氨酸的含量测定,测定值的相对标准偏差(n=6)均在3%以内,符合定量分析的要求。