人重组骨形态发生蛋白7通过下调半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D信号通路抑制高糖诱导的近曲小管上皮细胞的焦亡

目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞模拟糖尿病肾病模型。分为正常浓度葡萄糖对照组(Control)、高浓度葡萄糖组(HG)、Control+rhBMP-7组、HG+rhBMP-7组。采用免疫荧光方法检测HK-2细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SAM)、焦孔素D(gasderminD, GSDMD)蛋白和焦孔素E(gasderminE, GSDME)蛋白;TUNEL染色检测细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-4(caspase-4)、半胱氨酸蛋白酶-5(caspase-5)、 N-GSDMD和GAPDH的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HK-2细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 与Control组相比,高糖组HK-2细胞Tunel染色的阳性率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.000 1),α-SMA蛋白和α-SMA mRNA表达量也显著增加(P<0.000 1),E-cadherin蛋白和Ecadherin mRNA表达量显著下降(P=0.000 6,P<0.000 1);HG组添加rhBMP-7后α-SMA蛋白和m RNA水平显著下降(P=0.011 7, P=0.002), E-cadherin蛋白和m RNA水平明显升高(P=0.001 5,P<0.000 1)。与对照组比较,HG组HK-2细胞GSDME/GSDMD蛋白的荧光信号明显增强。进而,HG组添加rhBMP-7后GSDME/GSDMD蛋白荧光信号显著减弱。同样,HG组HK-2细胞中焦亡相关蛋白caspase-1、caspase-4、caspase-5以及GSDMD的表达量显著高于对照组,差异明显(均P<0.001)。HG组添加rhBMP-7后焦亡相关蛋白的表达明显下降(分别P<0.001,P=0.002,P<0.001)。与对照组比较,HG组HK-2细胞培养上清液中IL-1β和IL-18蛋白浓度显著增加(均P<0.001)。进而导致rhBMP-7干预后HG组细胞上清液中IL-10和IL-1β蛋白浓度明显减少(P<0.001)。结论 rhBMP-7具有抑制HK-2细胞焦亡的作用,其通过调控caspase-1/GSDMD信号通路减缓高糖诱导的HK-2细胞焦亡。

温针灸对兔膝骨关节炎软骨中ASC、Caspase-1和P2X7蛋白表达的影响

目的 观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)模型兔关节软骨组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)表达的影响,研究温针灸治疗KOA的作用机制。方法 取40只雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、抑制剂组和温针灸组,每组10只。除空白组外,其余各组采用经典右后肢膝关节伸直位,用石膏管型固定4周制备兔KOA模型。造模成功后,各组给予相应干预措施。应用Lequesne MG评分量表评估兔膝关节状态改变与行为学改变,HE染色观察膝关节软骨病理形态学改变,免疫组织化学法和Western blot法检测软骨组织中ASC、Caspase-1、P2X7蛋白的表达,免疫荧光检测Caspase-1蛋白的表达。结果 造模前,各组实验兔Lequesne MG评分差异无统计学意义(P>0.05);造模后,与空白组相比,其余组Lequesne MG评分均上升(P<0.05);干预治疗后,与模型组比较,温针灸组和抑制剂组评分降低(P<0.05)。HE染色显示,空白组软骨表面结构完整,软骨细胞排列均匀;模型组软骨表面粗糙不平,软骨受损明显,软骨细胞形态大小不一,排列紊乱;抑制剂组和温针灸组软骨表面相对光滑、完整,软骨细胞分布较为均匀,软骨层结构相对清晰。与空白组比较,模型组Mankin’s评分升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组Mankin’s评分降低(P<0.05)。免疫组织化学法、免疫荧光及Western blot检测结果显示,与空白组比较,模型组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均降低(P<0.05);温针灸组和抑制剂组相比,ASC、Caspase-1、P2X7表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 温针灸可减轻兔KOA软骨损伤,其机制可能与ASC、Caspase-1、P2X7表达降低及细胞焦亡抑制有关。

同型半胱氨酸对A_7r_5细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的：观察同型半胱氨酸（Hcy）对大鼠胸主动脉平滑肌细胞（A7r5细胞）增殖及基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。方法：分别用0、0.25、0.5、1 mmol/L Hcy作用A7r5细胞48 h后,细胞计数及MTT法检测A7r5细胞的增殖情况,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测MMP-2 mRNA的表达,免疫印迹法（Western blot）检测MMP-2蛋白的表达。结果：随着Hcy浓度的增加,A7r5细胞数目和吸光度（OD）值呈剂量依赖性增加,其中0.25、0.5、1 mmol/L Hcy组与对照组差异均有统计学意义（P〈0.05-P〈0.01）。MMP-2 mRNA的表达随着Hcy浓度的增加而增加,呈剂量依赖性,各实验组与对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）。Hcy呈剂量依赖性上调A7r5细胞MMP-2蛋白的表达,各实验组与对照组差异均有统计学意义（P〈0.05-P〈0.01）。结论：Hcy在一定范围内呈剂量依赖性促进A7r5细胞增殖,可在蛋白及mRNA水平使A7r5细胞MMP-2表达呈剂量依赖性增加,这一效应可能是Hcy致动脉粥样硬化的分子机制之一。

同型半胱氨酸对A7r5细胞增殖及MMP-9表达的影响

观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。0.25、0.50和1.00 mmol/LHcy分别作用A7r5细胞48 h,倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-9蛋白的表达。随着Hcy浓度的升高,细胞数目逐渐增多,体积增大,生长旺盛,呈增殖表现。不同浓度Hcy处理组MMP-9 mRNA及蛋白的表达均逐渐增加,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。同时显示正常对照组中MMP-9表达相对较少,为(3.60±1.42)%、(1.60±0.82)%。Hcy能促进A7r5细胞增殖,正常A7r5细胞中MMP-9表达较少;Hcy可诱导A7r5细胞MMP-9的表达,这一效应可能是Hcy致心血管疾病的分子机制之一。提示MMP-9可能成为干预心血管疾病的靶点。

氯化镁对同型半胱氨酸诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9表达的影响

观察MgCl2对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达的影响,旨在探讨镁剂治疗心血管疾病的分子机制。采用细胞培养、MTT法、Western印迹以及RT-PCR等方法,研究0.5mmol/LHcy分别与不同浓度的MgCl2共同作用A7r5细胞48h后,MgCl2对Hcy诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9的mRNA及其蛋白质表达的影响。MTT法结果显示,随着MgCl2浓度增加,吸光度值逐渐减少,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);MgCl2使Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白质表达均减少,其中2.0、3.0mmol/LMgCl2组抑制作用显著(P<0.05)。研究结果表明Hcy促进A7r5细胞增殖的效应能被MgCl2抑制;MgCl2能抑制Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的表达。这一效应可能是镁剂治疗心血管疾病的分子机制之一。

同型半胱氨酸对A7r5细胞凋亡及相关凋亡因子Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对体外培养的大鼠胸主动脉平肌滑细胞(A7r5细胞)凋亡的影响及相关机制。方法体外培养A7r5细胞,给予Hcy干预,采用Annexin V-PE/7-AAD双染流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫印迹法(Western Blot)检测相关凋亡因子Bcl-2和Bax的表达。结果给予Hcy干预后,在Hcy不同浓度下(0、200、500、1 000μmol/L)培养24 h后A7r5细胞的凋亡率分别是(1.69±0.19)%、(5.72±1.29)%、(9.42±2.51)%、(17.34±2.86)%;用终浓度(1 000μmol/L)的Hcy培养液分别培养0、12、24、48 h后A7r5细胞的凋亡率分别是(1.78±0.33)%、(8.27±1.45)%、(17.34±2.86)%、(23.72±3.21)%;Hcy诱导A7r5细胞凋亡呈时间及浓度依赖性。给予Hcy干预24 h后,Bcl-2蛋白表达减少,同时Bax蛋白表达增多。结论 Hcy可以诱导A7r5细胞的凋亡,其机制可能与激活线粒体凋亡途径有关。

外源性硫化氢调节TGF-β1/Smad7信号通路改善高同型半胱氨酸血症所致的大鼠心肌纤维化

目的:观察外源性硫化氢(hydrogen suifide,H2S)对高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)诱导的大鼠心肌纤维化及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Smad7蛋白表达的影响。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机均分为对照(Control)组、模型(HHcy)组、H2S干预模型(HHcy+H2S)组和H2S对照(H2S)组,每组10只。本实验模型大鼠的建立通过将L-蛋氨酸(10 g/L)加入大鼠的饮用水,持续10周喂养建立。建模成功后,HHcy+H2S组及H2S组大鼠每日经腹内注射硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)溶液,持续干预4周。各组大鼠心肌胶原纤维沉积情况由Masson染色法观察,心肌组织中Ⅲ型胶原的表达情况由免疫组织化学染色法检测,CBS、TGF-β1和Smad7蛋白的表达情况通过Western blot检测。结果:与对照组相比,模型组心肌细胞排列紊乱、胶原沉积明显增加,心肌组织中Ⅲ型胶原沉积明显增加(P=0.000),TGF-β1蛋白表达明显升高(P=0.004),CBS(P=0.006)及Smad7(P=0.001)蛋白表达水平明显下调;与模型组相比,HHcy+H2S组大鼠心肌细胞排列相对整齐、胶原沉积相对减轻,组织中Ⅲ型胶原沉积减轻(P=0.003),TGF-β1蛋白表达相对下调(P=0.006),CBS(P=0.005)及Smad7(P=0.000)蛋白表达水平增加。结论:外源性硫化氢可以改善HHcy诱导的大鼠心肌纤维化,其调节机制可能与TGF-β1/Smad7信号通路有关。

硒-甲基硒代半胱氨酸对MCF-7细胞抗氧化及Survivin基因表达的影响

目的探讨硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)对乳腺癌MCF-7细胞抑制及其诱导凋亡的作用机制。方法采用不同浓度(12.5、25、50、100、200μmol/L)MSC作用于MCF-7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定MSC对细胞增殖的抑制作用;Hoechst染色法观察细胞凋亡形态;氮蓝四唑(NBT)显色法检测MSC对细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响;硫代巴比妥酸法(TBA)法检测MSC对细胞内丙二醛(MDA)水平的影响;RT-PCR法检测细胞Survivin基因的表达。结果 MSC对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用,细胞存活率随其浓度的增加而逐渐降低;荧光染色可见,MSC干预组细胞变圆、胞核皱缩、染色质浓缩,与对照组比较差异有统计学意义;MSC降低MCF-7细胞内SOD的活性,升高细胞内MDA水平(P<0.01);同时,MSC能下调Survivin mRNA的表达(P<0.01)。结论 MSC可通过调节乳腺癌细胞内氧化还原状态及Survivin基因的表达抑制乳腺癌细胞的体外增值和诱导凋亡,MSC作为一种新型营养强化剂有望开发其预防和辅助乳腺癌治疗的新用途。

莲心碱促进膀胱癌5637细胞凋亡增强Caspase-7表达及活化

目的研究莲心碱(Liensinine)对膀胱癌细胞株5637凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法使用CCK-8法及克隆形成实验检测莲心碱对5637细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测定莲心碱对5637细胞凋亡的影响;采用Western blot技术分析细胞凋亡相关基因Caspase-7表达状况。结果 CCK-8法及克隆形成实验结果均表明莲心碱对膀胱癌细胞5637增殖有明显的抑制作用,并呈剂量-效应关系。流式细胞术结果提示莲心碱可使膀胱癌5637细胞发生早期凋亡;Western blot检测结果显示莲心碱增强5637细胞Caspase-7表达并促进其活化。结论莲心碱可抑制5637细胞增殖,使其发生早期凋亡,其作用机制可能与促进Caspase-7表达及活化有关。

温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织Caspase-3和BMP-7表达的影响

目的:观察温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织Caspase-3和BMP-7表达的影响,探讨温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病的肾保护机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为5组:(1)正常对照组(n=8):予生理盐水灌胃;(2)模型组(n=10):按关木通水煎液10mL.kg-1.d-1(相当于关木通40g.kg-1.d-1,马兜铃酸A 2.6mg.kg-1.d-1)给大鼠灌胃;(3)中药组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30g.kg-1.d-1灌胃;(4)西药组(n=10):在模型组基础上,再予科素亚33.3mg.kg-1.d-1灌胃;(5)中西药结合组(n=10):在模型组基础上,再予(温阳活血方30g.kg-1.d-1+科素亚33.3mg.kg-1.d-1)灌胃。20周末,检测大鼠尿蛋白、肾功能,光镜和电镜观察肾脏病理,采用免疫组化检测肾组织Caspase-3和BMP-7的表达。结果:与正常组和治疗组比较,模型组大鼠24h尿蛋白、Scr、BUN均明显升高(P<0.01);肾脏病理显示治疗组较模型组肾损害明显减轻;与正常对照组和治疗组比较,模型组大鼠肾组织Caspase-3表达明显升高(P<0.05),BMP-7的表达减少(P<0.01)。结论:温阳活血方能有效防治慢性马兜铃酸肾病,其机制可能与降低Caspase-3升高BMP-7有关。

羊水过少对妊娠结局及胎盘组织中Cx43、Caspase7蛋白表达的影响

目的探讨羊水过少对母婴妊娠结局的影响,并检测胎盘组织中缝隙连接蛋白43(Cx43)、半胱氨酸肽酶7(Caspase7)蛋白阳性表达情况,分析羊水过少与Cx43、Caspase7蛋白表达之间的关系。方法选择本院2016年1月至2018年12月羊水过少的孕产妇110例作为研究组,选取同期羊水正常的产妇110例作为对照组。记录两组孕产妇围产期结局,观察新生儿不良结局情况,检测胎盘组织中Cx43、Caspase7蛋白表达水平。结果研究组的阴道顺产率(17.27%)显著低于对照组(56.36%)(P<0.05);研究组产妇的剖宫产率、产程异常发生率、新生儿不良结局总发生率分别为74.55%、16.36%、15.45%,显著高于对照组的37.27%、3.64%、5.45%(P<0.05)。研究组产妇胎盘Cx43蛋白阳性率及阳性评分分别为21.45%、(2.42±0.71)分,显著低于对照组的67.64%、(7.69±0.83)分,蛋白表达的阳性程度亦显著低于对照组(P<0.05)。研究组产妇胎盘Caspase7蛋白阳性率及阳性评分分别为65.64%、(7.69±0.83)分,显著高于对照组的18.73%、(2.42±0.71)分,蛋白表达的阳性程度亦显著高于对照组(P<0.05)。结论羊水过少产妇剖宫产率增加,产妇产程异常、新生儿不良结局总发生率上升;产妇胎盘Cx43蛋白表达下调,而Caspase7蛋白表达呈现上升趋势,可能与羊水过少有关。

复方氨基酸注射液中乙酰半胱氨酸含量测定方法的研究

目的：建立复方氨基酸注射液中乙酰半胱氨酸的含量测定方法。方法：采用分光光度法，以4-氯代-7-硝基苯并呋喃的碱性缓冲液(pH=8．3)为显色剂；检测波长423nm。结果：乙酰半胱氨酸在0．04-0．17mg．mL-1浓度范围内呈良好线性关系，r=0.9999(n=5)；平均回收率(n=3)为99．1％～101．9％，RSD<0．60％，。结论：方法简便、快速、准确；适用于产品的质量控制。

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸对糖尿病心肌病大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法用链脲佐菌素建立糖尿病模型,50只雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、糖尿病组、N-乙酰半胱氨酸低、中及高剂量组,N-乙酰半胱氨酸低、中及高剂量组分别按50、100及200 mg/(kg·d)灌胃12周。测定大鼠心功能、心脏质量指数及左心室质量指数、血清和左心室心肌组织中超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活力;Masson染色观察形态学变化及测量心肌胶原容积分数;免疫组织化学法检测转化生长因子β1、SMAD3、SMAD7的蛋白表达水平。结果与正常组相比,糖尿病组大鼠左心室舒张期末压显著升高,左心室收缩压和±dp/dtmax显著降低,心脏质量指数及左心室质量指数明显增高,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力明显下降,心肌胶原容积分数明显升高,转化生长因子β1和SMAD3蛋白的表达增加,SMAD7蛋白的表达减少(P均<0.01)。与糖尿病组相比,N-乙酰半胱氨酸各剂量组灌胃12周后以上指标均得到改善,以高剂量组改善最为明显(P<0.01)。结论 N-乙酰半胱氨酸对糖尿病心肌有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激,下调转化生长因子β1、SMAD3表达及上调SMAD7表达有关。

半胱氨酸蛋白酶激动剂、X连锁凋亡抑制蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中的表达

现代肿瘤学认为肿瘤的发病与细胞凋亡数量的减少密切相关,第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激动剂（second mitochondria-derived activator of caspase,Smac）、X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cysteine containing aspartate specific protease,caspase-3）在细胞凋亡过程中起着重要的调控及效应作用。本研究采用免疫组化方法观察三者在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌（nasal squamous cellcarcinoma,NSCC）及不同病理分期中的表达情况。

乙型肝炎肝硬化患者血清Hcy、SF、B7-H3及IL-18的水平与肝功能Child-Pugh分级的相关性

目的:探讨乙型肝炎(乙肝)肝硬化患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、血清铁蛋白(SF)、B7-H3和血清白细胞介素-18(IL-18)水平的变化与肝硬化功能Child-Pugh分级的相关性。方法:选取2018年7月~2019年6月来同济大学附属东方医院胶州医院进行诊治的乙型肝炎(乙肝)肝硬化患者164例为试验组,并根据Child-Pugh改良分级法按照严重程度将其分为三组,选择同期健康体检人群60例作为对照组,检测试验组和对照组Hcy、SF、B7-H3和IL-18水平,通过单因素方差分析比较各组之间的差异,并采用spearman相关分析Hcy、SF、B7-H3、IL-18水平与肝硬化分级之间的相关性。结果:研究发现对照组和试验组之间Hcy、SF、B7-H3及IL-18的水平不完全相等,差异具有统计学意义(P<0.05);血清Hcy、SF、B7-H3、IL-18的水平,与对照组相比,三个试验组均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,B组和C组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),C组较B组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。血清Hcy、SF、B7-H3、IL-18的水平与肝硬化Child-Pugh分级呈正相关(P<0.05)。结论:乙肝肝硬化患者血清Hcy、SF、B7-H3和IL-18水平显著升高,并与患者肝功能Child-Pugh分级呈正相关,从一定程度上可以反映患者肝硬化程度,临床工作中可以作为判断乙肝肝硬化患者病情和监测预后的参考指标。

表没食子儿茶素没食子酸酯对同型半胱氨酸促血管平滑肌细胞增殖的抑制效应

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在同型半胱氨酸(Hcy)促血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用,了解其对VSMCs增殖的保护作用,并初步探讨相关机制。方法:以人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)为研究对象,分为对照组(control)、Hcy组(Hcy100μmol/L、Hcy200μmol/L、Hcy500μmol/L、Hcy1 000μmol/L)、EGCG组(EGCG5μmol/L、EGCG10μmol/L、EGCG20μmol/L)、Hcy+EGCG组(Hcy500μmol/L、Hcy500μmol/L+EGCG5μmol/L、Hcy500μmol/L+EGCG10μmol/L、Hcy500μmol/L+EGCG20μmol/L);在培养的第24 h,采用CCK-8法测定细胞增殖情况,Brd U染色法标记增殖细胞,ELISA方法测定Hcy+EGCG组中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)水平。结果:Hcy可促进HASMCs增殖,EGCG可抑制HASMCs增殖,EGCG可抑制Hcy促HASMCs的增殖作用,其发挥作用与其抑制HASMCs分泌AngⅡ、诱导HASMCs分泌Ang1-7有关。结论:EGCG可通过调节局部AngⅡ/Ang1-7平衡来抑制Hcy诱导的HASMCs增殖。

2型糖尿病合并颈动脉斑块与同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白的关系

目的:观察糖尿病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)和C反应蛋白(CRP)与颈动脉斑块的关系,探讨其对糖尿病患者大血管并发症的影响机制及临床意义。方法:选择30例健康对照者与240例2型糖尿病患者,后者根据颈动脉超声结果分为斑块组140例(IMT≥1.5mm)和非斑块组100例(IMT<1.5mm),测定各组间血脂、血糖、HbA1c、血浆Hcy、CRP的水平,进行比较分析。结果:糖尿病组Hcy、CRP显著高于健康对照组。糖尿病斑块组Hcy、CRP高于无斑块组。2型糖尿病患者斑块组和非斑块组Hcy与CRP明显相关,与TC、TG无明显相关。结论:血Hcy和CRP在预测2型糖尿病患者大血管并发症有重要的临床意义,炎症反应可能是高Hcy引起糖尿病大血管并发症的发生、发展重要的机制之一。

柴胡疏肝散精简方对慢性疼痛抑郁共病大鼠中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1β表达的影响

目的观察柴胡疏肝散精简方对慢性疼痛抑郁共病大鼠行为学及中缝核P2X7受体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β表达的影响,探讨其抗疼痛抑郁共病的机制。方法将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组,每组10只。除空白组外,其余3组予利血平腹腔注射造模,氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组分别予氟西汀和柴胡疏肝散精简方灌胃,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃,连续14 d。测量大鼠体质量、强迫游泳不动时间、旷场实验运动行为和热缩足阈值;ELISA检测血清IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;PCR检测中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达;Westernblot检测中缝核IL-6、TNF-α蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增量明显减少,强迫游泳不动时间明显增加,旷场实验运动总距离和穿格次数明显减少,热缩足阈值明显降低(P<0.05);血清IL-6、TNF-α含量明显增加(P<0.05),中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达明显升高(P<0.05),IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组大鼠体质量增量明显增加,强迫游泳不动时间明显减少,旷场实验运动总距离和穿格次数明显增加,热缩足阈值明显升高(P<0.05);血清IL-6、TNF-α含量明显减少(P<0.05),中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达明显降低(P<0.05),IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论柴胡疏肝散精简方可改善慢性疼痛抑郁共病大鼠行为学及疼痛阈值,其作用机制可能与抑制中缝核P2X7受体表达,进而下调Caspase-1、IL-1β、IL-6和TNF-α表达,减轻炎症反应有关。

cIAP与Caspase-7在子宫内膜腺癌组织中的表达及其与预后的关系研究

目的：探索细胞凋亡抑制蛋白cIAP和凋亡蛋白Caspase‐7在子宫内膜癌组织中的表达及与预后的关系。方法选取2009～2010年在河南科技大学第一附属医院行子宫内膜癌根治且术后病理证实为子宫内膜腺癌患者55例，统计发病时组织学分类、病理分期、淋巴结转移、年龄等参数，电话随访无瘤生存期及总生存期，取病理标本石蜡切片行免疫组化，观察cIAP与Caspase‐7的表达，并分析其与各参数的关系。结果cIAP与Caspase‐7的表达水平与子宫内膜癌组织学分类、病理分期、淋巴结转移相关（P＜0．05），而与肌层浸润、年龄无关（P＞0．05）。cIAP与Caspase‐7阳性表达和阴性表达的患者总生存期之间差异有统计学意义（P＜0．05）。结论子宫内膜腺癌患者cIAP与Caspase‐7的表达水平与肿瘤分级、总生存期具有相关性，或可作为子宫内膜腺癌预后检测指标。

BMP-7对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中Bcl-xl和Caspase-3表达影响

目的探讨骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Bcl-xl和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspases-3)表达的影响。方法成年健康雄性SD大鼠38只,应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、BMP-7治疗组(C组),C组于再灌注后立即尾静脉注射BMP-7(0.1mg/kg),A组和B组同步给予等量生理盐水,于再灌注24h后行神经功能缺陷评分,原位末端标记(TUNEL)法检测梗死脑组织细胞凋亡情况,免疫组化方法检测脑组织中Bcl-xl和Caspase-3的表达。结果缺血2h再灌注24h后,与B组相比,C组大鼠神经功能缺陷评分明显降低(t=3.35,P<0.01);TUNEL检测阳性细胞数明显减少(F=409.95,P<0.01);缺血侧脑组织Bcl-xl的表达明显增强(F=229.31,P<0.01),而Caspase-3的表达明显减弱(F=848.38,P<0.01)。结论 BMP-7可能通过增强Bcl-xl的表达和抑制Caspase-3的表达对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤发挥一定的保护作用。