扁平苔藓皮损中CD95配体、颗粒酶B和半胱氨酸蛋白水解酶-3的检测及其意义

扁平苔藓是一种常见的累及皮肤和黏膜的慢性炎症性疾病，组织病理表现为真皮上部许多淋巴细胞浸润，形成致密的淋巴细胞浸润带。许多研究提示，浸润的CD8^＋T细胞（CTL）的细胞毒作用可能参与杀伤抗原特异性角质形成细胞。CTL主要通过颗粒胞吐分泌穿孔素、颗粒酶和通过表达CD95配体——FasL两种主要途径特异性杀伤靶细胞。颗粒酶B（granzyme B）是CTL分泌的颗粒酶家族中最有效的致凋亡成员。

P38通路对帕金森病小鼠模型黑质环氧合酶-2、半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的研究P38MAPK通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致亚急性帕金森病(PD)小鼠模型中对黑质环氧合酶-2(COX-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达调控作用。方法采用MPTP制备PD小鼠模型,观察行为学、免疫组化和免疫蛋白印记法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)、COX-2、caspase-3和磷酸化P38MAPK(p-P38MAPK)的变化,及给予P38MAPK抑制剂SB203580后对上述变化的影响。结果模型7d组小鼠出现典型的PD样症状,黑质区TH阳性神经元和蛋白水平分别下降约65%和75%(P<0.01);模型3d组小鼠黑质区COX-2、p-P38MAPK、caspase-3阳性细胞数及蛋白水平显著增加,TH阳性神经元明显丢失;经P38MAPK抑制剂SB203580处理后,上述变化均显著减轻(P<0.01)。结论在MPTP所致亚急性小鼠PD模型中,P38MAPK通路对黑质区炎症与凋亡可能有重要调控作用,SB203580对PD小鼠具有一定神经保护作用。

西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=16)、缺血模型对照组(n=48)及治疗组(n=48)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予1次西洛他唑,以后每隔24h在相应时间点给药,其它各组灌胃给予等量二甲基亚砜。缺血模型对照组和治疗组于缺血10min再灌注0h、1h、12h、24h、72h、7d后断头取脑,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区p-Akt和再灌注后caspase-3表达水平的变化。结果全脑缺血后0h、1h,治疗组海马CA1区p-Akt平均光密度值明显高于模型组(P<0.01;P<0.05)。缺血后24h、72h、7d,治疗组海马CA1区caspase-3平均阳性细胞数明显低于模型组(P<0.05)。结论西洛他唑可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区caspase-3表达水平,并可抑制再灌注后p-Akt水平的急剧降低。

2型糖尿病肾病血清几丁质酶-3样蛋白-1、同型半胱氨酸水平的变化

(1)目的通过检测2型糖尿病肾病(DN)患者血清几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)及同型半胱氨酸(Hcy)水平,分析其在疾病发生和发展中的作用。(2)方法 2型糖尿病住院患者121例,依照尿微量白蛋白排泄率(UAER)水平分为三组:糖尿病非肾病组(DM组)43例、早期糖尿病肾病组(DN1组)40例、临床糖尿病肾病组(DN2组)38例。收集患者的年龄、病程、身高、体质量、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、UAER,检测YKL-40和Hcy水平。(3)结果 DN1组、DN2组血清YKL-40和Hcy水平显著高于DM组,差异均有统计学意义(P<0.05);DN2组显著高于DN1组,差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病患者病程、体质量、BMI、SBP、HbA1c、TC、TG、BUN、Cr、Hcy、YKL-40水平与UAER水平均呈正相关(r=0.247、0.191、0.288、0.425、0.344、0.309、0.149、0.385、0.611、0.270、0.522,P均<0.05);Logistic回归分析结果显示:SBP、TC、Cr、Hcy及YKL-4是2型DN的危险因素。(4)结论 YKL-40、Hcy与2型DN相关,可能参与了2型DN的发生、发展。

深低温停循环不同时间点犬脑皮质半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3mRNA的表达

目的利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3 mRNA(Caspase-3 mR-NA)在深低温停循环(DHCA)过程中的表达,探讨DHCA对神经细胞凋亡的影响,为深低温停循环后脑损害的研究和防治提供资料。方法选择健康成年杂种犬10只,建立DHCA模型,分别于体外循环0 min、停循环0 min、停循环30 min、停循环60 min、复温再灌注45 min取脑皮质迅速冻存,待全部动物实验结束后统一行实时荧光PCR定量检测Caspase-3mRNA的表达情况。结果体外循环后特别是降温后Caspase-3 mRNA的拷贝数先下降,DHCA 0 min达最低值,随着DHCA过程的延长,Caspase-3 mRNA的表达逐渐增强,复温再灌注45 min达最大值,不同时间点Caspase-3 mRNA的拷贝浓度间差异有显著性意义(F=42.71,P<0.001)。复温再灌注45 min后Caspase-3 mRNA的拷贝数均显著高于此前各时间点(P<0.01)。结论DHCA中随着缺氧的加重可诱导Caspase-3 mRNA的表达,随着DHCA时间的延长,Caspase-3 mRNA表达升高。复灌后表达达最高值。

右美托咪定对老年小鼠海马和杏仁核半胱氨酸蛋白酶-3基因表达影响的实验研究

目的:探讨右美托咪定对老年小鼠海马和杏仁核半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)基因表达的影响。方法:48只老年(18月龄)小鼠随机平分为三组:对照组、舒芬太尼组与右美托咪定组。舒芬太尼组与右美托咪定组分别给予5μg/kg舒芬太尼与5μg/kg右美托咪定进行腹腔注射,对照组给予等容量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,每周1次,持续8周,检测Caspase-3表达变化情况。结果:舒芬太尼组与右美托咪定组干预第4周与第8周的逃避潜伏期低于对照组(均P<0.05),穿越平台次数与处于平台所在象限时间高于对照组(P<0.05),舒芬太尼组与右美托咪定组对比差异有统计学意义(P<0.05)。舒芬太尼组与右美托咪定组干预第4周与第8周的血清去甲肾上腺素含量高于对照组(均P<0.05),TNF-α含量低于对照组(P<0.05),舒芬太尼组与右美托咪定组对比差异有统计学意义(P<0.05)。舒芬太尼组与右美托咪定组干预第8周的海马和杏仁核Caspase-3基因、蛋白表达水平低于对照组(均P<0.05),舒芬太尼组低于右美托咪定组(P<0.05)。结论:右美托咪定在老年小鼠的应用能抑制海马和杏仁核Caspase-3基因与蛋白表达,也可抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放,提高血清去甲肾上腺素含量,从而有利于小鼠的认知功能恢复。

eNOS、CAV1、PI3K/Akt信号通路在同型半胱氨酸促进大鼠血管平滑肌细胞迁移、增殖中的作用研究

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、小凹蛋白-1(CAV1)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在同型半胱氨酸(Hcy)促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖中的作用。方法 2016年1—6月采用组织贴块法分离SDF级SD大鼠胸主动脉中膜并传代培养VSMCs,取4~7代细胞用于实验。细胞分为4组,分别为空白对照组、100μmol/L Hcy组、200μmol/L Hcy组、500μmol/L Hcy组,使用相应浓度Hcy(0、100、200、500μmol/L)进行干预培养,采用Transwell法检测VSMCs迁移能力、MTT法检测VSMCs增殖情况[以光密度(OD)值表示],硝酸还原酶法测定VSMCs释放NO情况,Western blotting检测VSMCs e NOS、CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达情况。结果 VSMCs穿膜细胞数与Hcy浓度呈正相关(r=0.582,P=0.020)。OD值与Hcy浓度呈正相关(r=0.620,P=0.015)。100、200、500μmol/L Hcy组释放NO低于空白对照组(P<0.05)。NO(r=-0.479,P=0.028),e NOS蛋白表达水平(r=-0.544,P=0.033)与Hcy浓度呈负相关。NO与e NOS蛋白表达水平呈正相关(r=0.721,P=0.009)。100、200、500μmol/L Hcy组VSMCs CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05)。CAV1蛋白表达水平(r=0.505,P=0.042),PI3K蛋白表达水平(r=0.428,P=0.030)、p-Akt蛋白表达水平(r=0.389,P=0.047)与Hcy浓度均呈正相关。结论 Hcy可能通过促进CAV1蛋白表达,抑制e NOS活性和NO释放,活化PI3K/Akt信号通路,从而诱导VSMCs的迁移和增殖,导致动脉粥样硬化。

心理护理对老年乳腺癌化疗患者血清PARP-1和Caspase-3蛋白表达水平的影响

目的观察心理护理对老年乳腺癌化疗患者血清中PARP-1和Caspase-3蛋白表达水平的影响。方法 80例老年乳腺癌化疗患者,随机分为常规护理组和心理护理组;两组乳腺癌患者均于化疗第1天及化疗21 d后采血,采用ELISA方法检测血清中PARP-1和Caspase-3蛋白含量;采用实时荧光定量法检测PARP-1和Caspase-3 mRNA的表达水平。结果与化疗前比较,化疗后两组PARP-1蛋白含量及mRNA的表达水平均降低(P<0.05)(P<0.01),且Caspase-3蛋白含量及mRNA的表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)化疗后常规护理组PARP-1蛋白含量及mRNA的表达水平高于心理护理组(P<0.05),Caspase-3蛋白含量及mRNA的表达水平低于心理护理组(P<0.05)。结论心理护理能减轻老年乳腺癌患者化疗的负反应,提高术后生活质量。

SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达及相关性

目的探究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、成纤维细胞活化蛋白-α(fibroblast activation protein-α,FAP-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3)在结直肠癌中的表达及相关性。方法收集2021年4月至2022年4月整理归档较为完整的45例为结直肠癌组织石蜡标本,另外选取45例为距离癌组织边缘5 cm的癌旁组织石蜡标本。采取免疫组化法检测SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达,分析SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达变化及与预后的相关性。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达量均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤位置、远处转移无关,与淋巴结转移、肿瘤的直径、组织学类别、浸润程度、TNM分期、脉管瘤栓、分化程度有关相关,差异有统计学意义(P<0.05)。SIRT1、FAP-α、caspase-3之间Pearson相关性分析显示,SIRT1、FAP-α之间呈正相关(r=0.534,P=0.001);FAP-α、caspase-3之间呈正相关(r=0.556,P=0.001);SIRT1、caspase-3之间呈正相关(r=0.585,P=0.001)。ROC曲线显示,三项联合对结直肠癌的诊断价值高于SIRT1、FAP-α、caspase-3单项诊断(P=0.001)。结论结直肠癌患者机体内SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达上升,可看出其水平变化与结直肠癌患者产生病症有密切的关联,因此三者可作为预测结直肠癌患者治疗的重要依据。

基于P53、Bax、Caspase-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的基于P53、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度竹节参水提取物(0、50、100、150μg/ml)进行培养(分别为A、B、C、D组),MTT法检测HeLa细胞增殖抑制情况;TUNEL法对比HeLa细胞凋亡率;流式术观察HeLa细胞周期;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;RT-PCR法测定P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果与A组相比,B组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞增殖活力减弱。与A组相比,B组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。HeLa细胞周期在竹节参水提取物的作用下G0/G1期上升,S期下降。A组未添加竹节参水提取物,HeLa细胞细胞核形态为卵圆状,染色也较为均匀;B组添加竹节参水提取物后,部分HeLa细胞细胞核形态改变,出现缩小和浓缩现象,荧光现象也增强;C、D组细胞因提取物浓度增加,细胞核形态改变加剧,荧光亮度攀升,细胞核边缘破碎。宫颈癌Hela细胞中P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达随竹节参水提取物浓度的增加而增加。结论竹节参水提取物可以降低体外宫颈癌细胞的增殖活力,并诱导其自噬和凋亡,这可能是通过竹节参水提取物调控P53、Bax、Caspase-3基因表达来实现的。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3炎症小体的活化调节与牙周疾病的关系

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员(NLRP)3炎症小体是一种位于细胞质内的多蛋白质复合体,由其核心成分感知病原体和宿主危险信号后组装而成,通过激活半胱氨酸天冬酰胺特异蛋白酶-1致促炎因子白细胞介素(IL)-1β成熟与分泌参与免疫炎症反应。牙周病是由宿主和微生物因素相互作用导致的局部炎症反应,而IL-1β又是牙周炎发病的关键因素之一。IL-1β的成熟和分泌与NLRP3炎症小体密切相关,且牙周致病菌可调节该炎症小体的表达及活化,因此NLRP3炎症小体对牙周疾病的发生发展和治疗具有重要意义。本文就NLRP3炎症小体的生物学功能、活化机制及其在牙周病学领域的研究进展作一综述。

麻黄水提物调控ROS/NLRP3/Caspase-1通路对肺炎链球菌肺炎大鼠肺损伤的影响

目的研究麻黄水提物通过调控活性氧(ROS)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)通路减轻肺炎链球菌肺炎大鼠肺损伤的作用及机制。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、麻黄水提物低、中、高剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)组、溶剂对照组(110 ml/kg DMSO)、模型+溶剂组、麻黄水提物高剂量+溶剂组、麻黄水提物高剂量+三甲胺N-氧化物(TMAO,110 mg/kg)组。采用气管滴入肺炎链球菌液的方式建立肺炎模型,造模后24 h各组给予药物灌胃、连续10 d。末次灌胃后24 h,检测肺组织病理改变,血清及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,肺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量、ROS活力及NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N表达水平。结果模型组大鼠出现肺泡间隔增厚、炎症细胞浸润等肺损伤病理改变,血清及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α含量、肺组织中MDA含量、ROS活力、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N表达水平均高于对照组,肺组织中SOD含量低于对照组(P<0.05);麻黄水提物低、中、高剂量组大鼠的肺损伤减轻,血清及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α含量、肺组织中MDA含量、ROS活力、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N表达水平均低于模型组,肺组织中SOD含量高于模型组(P<0.05);麻黄水提物高剂量+TMAO组大鼠的肺损伤加重,血清及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α含量、肺组织中MDA含量、ROS活力、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N表达水平均高于麻黄水提物高剂量+溶剂组,肺组织中SOD含量低于麻黄水提物高剂量+溶剂组(P<0.05)。结论麻黄水提物通过抑制ROS/NLRP3/Caspase-1通路介导的炎症反应、氧化应激及细胞焦亡减轻肺炎链球菌肺炎大鼠的肺损伤。

染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化

目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。

宫颈癌患者核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体的表达变化及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者组织和血清中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的表达水平,分析NLRP3炎症小体在宫颈癌发生、进展和治疗中的潜在作用。方法选取2019年1月至2020年6月海南省人民医院收治的50例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者作为实验组,均行手术治疗,术中留取癌组织和未被肿瘤浸润的癌旁正常宫颈组织;同时选取50例健康女性作为对照组。所有研究对象均留取外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中NLRP3、丙氨酸-丝氨酸半胱氨酸-1(ASC-1)、半胱氨酸酶-1(Caspase-1)、白介素-1β(IL-1β)、C-反应蛋白(CRP)、白介素-18(IL-18)和白介素-6(IL-6)的表达水平,采用旋转式血液流变仪检测红细胞沉降率(ESR),采用流式细胞仪检测白细胞数量;采用免疫组化染色法检测实验组癌组织和癌旁组织中NLRP3、ASC-1、Caspase-1的表达情况。结果实验组白细胞数量、ESR、CRP、IL-6、NLRP3、ASC-1、Caspase-1、IL-1β、IL-18水平明显高于对照组(P<0.05)。实验组癌组织中NLRP3、ASC-1和Caspase-1水平明显高于癌旁组织;NLRP3水平与CRP、IL-1β、IL-18、白细胞数量、ESR和IL-6呈显著正相关,IL-1β水平与白细胞数量、CRP、ESR、IL-18和IL-6呈显著正相关,IL-18的水平与白细胞数量、CRP、ESR、IL-1β和IL-6呈显著正相关(P<0.05)。结论NLRP3炎症小体的激活可能参与了宫颈癌的发生和进展,提示NLRP3炎症小体可作为治疗宫颈癌的潜在靶点。

血清caspase-3 NSE联合O_(2)UCc早期预测急性一氧化碳中毒迟发性脑病的价值

目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、早期脑氧利用率(O_(2)UCc)在早期预测急性一氧化碳中毒迟发性脑病的价值。方法:选取我院2019年1月至2020年12月经收治的125例急性一氧化碳中毒患者,根据患者中毒后60d内是否发生一氧化碳中毒迟发性脑病,将患者分为脑病组34例和对照组91例,对比两组患者入院后24h内的血清caspase-3、NSE及患者的O_(2)UCc水平,并采用受试者工作曲线(ROC)分析各项指标在预测急性一氧化碳中毒患者发生迟发性脑病的价值,采用Logistic多因素模型分析caspase-3、NSE、O_(2)UCc与患者发一氧化碳中毒迟发性脑病的关系。结果:脑病组患者的caspase-3、NSE测定值显著的高于对照组,脑病组患者O_(2)UCc测定值显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);caspase-3、NSE、O_(2)UCc、caspase-3+NSE+O_(2)UCc预测急性一氧化碳中毒迟发性脑病灵敏度分别为63.41%、57.52%、62.77%、92.33%,特异度分别为85.28%、80.66%、82.94%、78.58%,ROC曲线下面积AUC值分别为0.802、0.797、0.798、0.936;采用Logistic多因素模型分析:年龄增大、CO暴露时间延长、意识障碍≥10h、重度中毒、caspase-3升高、NSE升高、O_(2)UCc降低是急性一氧化碳中毒迟发性脑病发的独立危险因素(P<0.05)。结论:急性一氧化碳中毒迟发性脑病患者早期的caspase-3、NSE水平显著升高,O_(2)UCc水平显著降低,并且与急性一氧化碳中毒患者发生迟发性脑病具有明显的关系。

结直肠癌组织中TAZ表达与Bcl-2、Bax、Caspase-3的关系及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中TAZ蛋白与临床病理特征的关系及其与具有凋亡调节作用的Bcl-2、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的相关性。方法免疫组化法检测96例结直肠癌组织石蜡标本及其中50例癌旁组织的TAZ、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,分析这4种蛋白的相关关系。记录患者完整的临床病理资料,分析TAZ与结直肠癌临床病理特征的关系。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中TAZ、Bcl-2表达明显增强(均P<0.05);Caspase-3在结直肠癌组织中表达强度明显低于癌旁组织(P<0.05);Bax在两种组织中表达无明显差异(P>0.05)。TAZ表达与肿瘤浸润深度、临床分期、淋巴结转移、脉管瘤栓有关(均P<0.05)。肿瘤组织中TAZ与Bcl-2表达存在正相关关系,与Caspase-3表达存在负相关关系(P<0.05);Bcl-2与Bax表达存在负相关关系(P<0.05);TAZ与Bax、Bcl-2与Caspase-3、Bax与Caspase-3无明显相关关系(均P>0.05)。结论 TAZ蛋白可能作为肿瘤标志物,其在结直肠癌中的作用可能与调控Bcl-2、Caspase-3有关。

Livin、Caspase-3、MTA1在结肠癌组织中的表达及相关性的研究

目的探讨Livin、Caspase-3及MTA1蛋白的表达与结肠癌的临床病理学特征的关系,以及它们三者之间的相互关系。方法采用免疫组织化学染色方法检测88例结肠癌组织中Livin,Caspase-3及MTA1的表达情况。结果(1)结肠癌组织中Livin的阳性表达率显著高于癌旁组织,且Livin的表达与结肠癌的组织分化程度及淋巴结转移程度显著相关。(2)结肠癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织,且Caspase-3蛋白的表达与结肠癌的组织分化程度显著相关。(3)结肠癌组织中MTA1的阳性表达率显著高于癌旁组织,且MTA1的表达与结肠癌的组织分化程度及淋巴结转移程度显著相关。(4)Caspase-3蛋白的表达又与Livin的表达呈显著负相关。结论(1)Livin在结肠癌组织中过表达,它可能是促进结肠癌发生的重要因素之一。(2)Caspase-3蛋白在结肠癌组织中表达被抑制而降低,且与Livin的表达呈负相关。因此,抑制Caspase-3蛋白的活性是Livin促进结肠癌发生的途径之一。(3)MTA1对结肠癌的组织分化及淋巴转移发挥重要作用。

PUMA、COX-2、Caspase-3在结直肠癌中的表达及临床意义

目的进一步探讨结直肠癌的发生机制。方法选择手术切除的结直肠癌标本60份(结直肠癌组)、腺瘤组织20份(腺瘤组),另取癌组织切缘正常黏膜44份(正常组),采用免疫组化法检测其p53上调凋亡调控因子(PUMA)、环氧合酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达情况,采用计数资料列联表的相关分析法分析三指标间及与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组PUMA、COX-2、Caspase-3阳性表达率分别为31.7%7、8.3%6、6.7%,腺瘤组分别为30.0%、75.0%、70%,正常组分别为63.6%、84.1%、95.5%,结直肠癌和腺瘤组PUMA、Caspase-3阳性表达率明显低于正常组,P均<0.01;COX-2阳性表达率亦低于正常组,P均>0.05;结直肠癌组和腺瘤组三指标间阳性率比较均无统计学差异。PUMA的表达与结直肠癌肿瘤直径相关,与其他临床病理特征无关;Caspase-3和COX-2的表达均与结直肠癌中临床病理参数无关。PUMA与Caspase-3表达呈正相关。结论 PUMA和Caspase-3的表达下调可能在结直肠癌发生的早期阶段起作用。

Caspase-3激活的DNA酶与局灶性脑缺血神经元再灌注损伤的关系研究

目的在半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂的干预下,探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶-3激活的DNA酶(caspase-activated DNase,CAD)表达变化与神经元损伤的关系。方法线拴法建立大鼠大脑中动脉闭塞及再通模型,侧脑室给予抑制剂,应用HE、免疫组化、原位末端标记(TUNEL)染色及电镜观察大鼠大脑中动脉栓塞1 h后再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h时caspase-3和CAD蛋白的表达及神经元凋亡程度的变化。结果模型组蛋白与凋亡细胞的时空动态变化趋势基本一致;干预组各指标趋于平坦,6 h后波峰均有下降。结论caspase-3后继CAD的激活参与了鼠脑再灌注神经元的凋亡,caspase-3抑制剂能一定程度降低缺血再灌注后神经元凋亡,起到神经保护作用。

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和β-连环蛋白、糖原合成激酶-3β在体外培养保存关节软骨组织中的表达及其相关性

目的体外培养保存关节软骨组织，探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）和Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔，切取膝骨软骨柱100枚，随机分为5组（n=20）。对照组：取材2h内的新鲜软骨；实验组：分为4组，将软骨柱浸入MEME培养液中保存，第14、21、28、35天时各取一组检测指标。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V—FITC）细胞凋亡检测法测定凋亡率，Western blot检测Caspase-3、糖原合酶激酶-38（GSK-3B）表达，免疫组织化学法检测β-catenin表达。结果随着保存时间延长，软骨细胞凋亡率逐渐增加，Caspase-3、GSK-3β表达逐渐上调，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05），各组软骨细胞凋亡率为：对照组（6．04±1．09）％、14d（12．75±0．40）％、21d（21．90±0．57）％、28d（30．44±0．79）％、35d（40．70±0．43）％，Caspase-3表达量为：0．078±0．032、0．193±0．026、0．327±0．041、0．510±0．023、0．719±0．063，GSK-3β表达量为：0．162±0．025、0．242±0．019、0．493±0．012、0．717±0．020、0．905±0．011；免疫组织化学结果显示，细胞质与细胞核中B-catenin阳性染色逐渐增强，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；细胞凋亡率与Caspase-3、GSK-3β、β—Catenin表达呈高度正相关（r=0．695、0．702、0．682，P〈0．01）；Caspase-3与GSK-3β、β—catenin表达呈高度正相关（r=0．713、0．661，P〈0．01）。结论体外培养保存关节软骨组织过程中，软骨细胞凋亡伴有Wnt／β-catenin信号通路关键蛋白β—catenin和GSK-3β表达的显著上调。