血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白18预测慢性乙型肝炎转归

目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白18(CK18)对慢性乙型肝炎肝病严重程度的预测价值。方法选取2017年3月至2018年3月府谷县人民医院收治的122例慢性乙型肝炎患者。按照METAVIR评分系统肝纤维化分期分为轻度肝纤维化组(n=69)、重度肝纤维化组(n=53);根据METAVIR评分系统肝脏炎症活动度分级分为轻度肝脏炎症组(n=76)、重度肝脏炎症组(n=46)。通过酶联免疫吸附试验测定血清CK18水平。结果轻度肝纤维化组血清CK18[167.86(89.54~274.65)U/L]水平显著低于重度肝纤维化组[231.98(132.09~564.38)U/L],差异有统计学意义(Z=12.765,P=0.002)。轻度肝脏炎症组血清CK18水平[138.23(165.34~677.46)U/L)]显著低于重度肝脏炎症组[337.43(82.87~234.15)U/L],差异有统计学意义(Z=15.917,P=0.001)。血清CK18预测慢性乙型肝炎患者严重肝脏炎症程度的预测效能更佳。结论血清CK18水平可用于预测慢性乙型肝炎重度肝脏组织炎症。

新生儿缺氧缺血性脑病血清半胱氨酸蛋白酶-1、白细胞介素-1β、-18测定的意义

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)血清半胱氨酸蛋白酶 1(caspase 1)、IL 1β、IL 18的变化及其与脑组织损伤程度的关系。方法 采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测HIE患儿 70例 (分轻、中、重 3组 )及正常对照组 2 2例新生儿d3血清cas pase 1、IL 1β和IL 18的水平。结果 1.与对照组比较 ,HIE各组血清caspase 1水平均显著增高 (P分别 <0 .0 5 ,<0 .0 1,<0 .0 1) ;HIE组间两两比较 ,中度与轻度组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ;重度组与其他两组比较血清caspase 1水平均显著升高 (P <0 .0 1)。2 .HIE组血清IL 1β、IL 18与对照组比较 ,中、重度HIE组均显著增高 (P <0 .0 1) ;轻度HIE组与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 )。HIE组间血清IL 1β、IL 18两两比较 ,中度与轻度组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;重度组与其他两组比较均显著升高 (P均 <0 .0 1)。 3 .血清caspase 1与IL 1β及IL 18均呈显著正相关 (γ =0 .793 4 P <0 .0 0 0 1;γ =0 .6677,P <0 .0 1)。结论 血清caspase 1、IL 1β和IL 18测定有助于HIE的早期诊断及临床分度。

半胱氨酸蛋白酶-1激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎肝损伤中的作用

目的:研究半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1)激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎(SAP)肝损伤中的作用。方法:SD大鼠32只,随机分为四组:正常对照组、SAP 6 h组、SAP 12 h组和SAP 18 h组。采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发大鼠SAP模型。通过H ITACH I-7150型自动生化分析仪检测大鼠血清谷丙转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);采用ELISA法测定血清白细胞介素(IL)-1β水平;酶化学法测定肝组织髓过氧化物酶(MPO)活性;半定量RT-PCR检测肝内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达。结果:造模后血清ALT、AST和IL-1β水平显著升高,并伴有肝组织MPO显著增加,与正常对照组相比,其差异均具有显著性意义(P<0.01)。正常对照组肝内可见Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA表达;SAP各组肝内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达显著上调(P<0.01),而且与肝损伤的严重程度相一致。结论:Caspase-1激活的细胞因子IL-1β及IL-18的过度表达在SAP肝损伤发病机制中发挥重要的作用。

尿IL-18、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在窒息新生儿急性肾损伤早期诊断中的价值

目的探讨尿白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)对窒息新生儿急性肾损伤(AKI)早期诊断的价值。方法选取2017年1月-2019年2月住院治疗的足月窒息新生患儿65例(其中轻度窒息38例、重度窒息27例)作为窒息组;选择同期正常的足月新生儿65例(均经超声检查无先天性泌尿系统疾病)为对照组。收集新生儿出生后6、24、48 h的新鲜尿液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定新生儿尿液标本中IL-18及Cys-C水平;应用Logistic回归分析法分析校正混杂因素后尿IL-18及Cys-C水平与窒息新生儿AKI的相关性。应用受试者工作特征(ROC)曲线与其曲线下面积(AUC)评估新生儿尿液标本中IL-18及Cys-C水平对窒息新生儿AKI的早期预测价值。结果窒息组新生儿出生后6、24、48 h的尿液样本中IL-18及Cys-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);重度窒息组、轻度窒息组、对照组新生儿出生后24 h尿液标本中IL-18、Cys-C水平与血液Cys-C、血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。Logistic回归分析表明,校正胎龄、日龄、出生时身体质量及急性生理学(SNAP)评分等因素,尿液样本中IL-18及Cys-C水平与AKI间有明显相关性;尿液标本中IL-18及Cys-C的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.691(95%CI:0.688~0.871)与0.898(95%CI:0.789~0.939)。结论检测尿液标本中IL-18及Cys-C水平在新生儿AKI早期诊断中具有重要意义,IL-18及Cys-C可作为窒息新生儿AKI早期临床诊断的可靠指标。

胆石症患者血清微小RNA-122、高迁移率族蛋白1和角蛋白-18水平及其临床意义

目的探讨胆石症患者血清微小RNA-122(miR-122)、高迁移率族蛋白1(HMGB 1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶裂解角蛋白-18(CCK-18)水平变化及其临床意义。方法 2015年1月～2018年2月我院收治的201例胆石症患者和健康体检者103例,比较两组人群血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平差异。采用Logistic回归分析影响单纯性胆石症进展为复杂性胆石症的相关因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析血清指标诊断复杂性胆石症的效能。结果胆石症患者血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平分别为4.7(0.9,14.3)、(2.5±0.7) ng/mL和(126.8±20.5)U/L,显著高于健康人【0.9(0.4,3.1)、(2.1±0.4) ng/mL和(101.4±18.7) U/L,均P<0.05】;97例单纯性胆石症组血清miR-122、HMGB 1和CCK-18分别为3.5(0.7,8.5)、(2.2±0.5)ng/m L和(112.4±19.4)U/L,显著低于104例复杂性胆石症组【分别为5.8(0.9,16.2)、(2.8±0.8) ng/m L和(140.2±23.5) U/L,均P<0.05】;单因素和多因素Logistic回归分析显示,肝硬化、腹腔积液、血清miR-122、HMGB 1和CCK-18为单纯性胆石症进展为复杂性胆石症的危险因素;血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平三者联合检测诊断复杂性胆石症的AUC为0.819(0.758～0.962),显著高于miR-122【0.724(0.657～0.815)】、HMGB 1【0.701(0.633～0.804)或CCK-18【0.767(0.702～0.873)】单指标检测。结论对血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平升高的胆石症患者,应想到复杂性胆石症的可能,而给予更仔细的检查和特别处理。

血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5在创伤性骨关节炎早期软骨细胞凋亡中作用机制

目的探究血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5(ADAMTS-5)基因对小鼠创伤性骨关节炎(PTOA)早期软骨细胞凋亡的影响及其具体的作用机制。方法分别随机选择3只8周龄转基因雌性C57BL/6小鼠(实验组),3只8周龄普通雌性C57BL/6小鼠(对照组),构建小鼠双侧膝关节骨折PTOA模型,术后4周取样。采用番红O染色、Mankin评分评估软骨损伤情况,通过TUNEL染色、免疫荧光染色检测软骨细胞凋亡情况,以明确ADAMTS-5对PTOA早期软骨细胞凋亡的影响。此外,利用ADAMTS-5体外转染ATDC5小鼠成软骨细胞系,通过干扰及过表达慢病毒转染方法构建过表达稳转株组、过表达对照组、干扰稳转株组、干扰对照组。采用MTT法检测软骨细胞增殖情况,通过免疫荧光染色观察ADAMTS-5、Caspase-9蛋白的表达情况,以明确ADAMTS-5影响软骨细胞凋亡的分子机制。结果番红O染色及Mankin评分显示,相较于对照组,实验组小鼠在骨折部位的软骨损伤较轻;TUNEL染色显示,相较于对照组,实验组绿色荧光染色更弱、数量更少;免疫荧光染色显示,相较于对照组,实验组Caspase蛋白红染更弱、数量更少。MTT法显示,第72 h时,与干扰稳转株组及过表达稳转株组相比,干扰对照组及过表达对照组光密度(OD)值显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色显示,过表达稳转株组与干扰稳转株组的ADAMTS-5及Caspase-9蛋白表达明显高于过表达对照组及干扰对照组,即随着ADAMTS-5基因的表达,Caspase-9蛋白的含量逐渐增加,最终促使软骨细胞发生凋亡。结论ADAMTS-5对小鼠PTOA早期软骨细胞凋亡具有促进作用,其可通过促进Caspase-9蛋白的生成加速软骨细胞发生凋亡。

子宫内膜异位症患者异位子宫内膜组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达变化观察

目的 观察子宫内膜异位症(EMs)患者异位子宫内膜组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18表达变化,分析NLRP3、Caspase-1与EMs患者临床病理特征的关系,以探讨炎症与EMs发生发展中的作用。方法 取80例EMs患者(EMs组)异位子宫内膜组织及80例同期住院子宫肌瘤患者(非EMs组)正常子宫内膜组织,采用免疫组织化学染色法检测组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18;收集上述受试对象中的30例EMs患者和30例子宫肌瘤患者腹腔冲洗液,采用酶联免疫吸附法检测腹腔冲洗液中IL-1β、IL-18。结果 EMs组异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达阳性者分别为46(57.50%)、52(65.00%)、59(73.75%)、55例(68.75%),非EMs组正常子宫内膜组织中分别为32(40.00%)、36(45.00%)、44(55.00%)、42例(52.50%)。两组比较,P均<0.05。EMs组腹腔冲洗液中IL-1β、IL-18水平高于非EMs组(P均<0.01)。不同临床分期及是否存在痛经的EMs患者异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达阳性率比较,P均<0.05。结论 EMs患者异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18高表达,NLRP3、Caspase-1表达水平与患者病情有关。

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘合体滋养细胞中白细胞介素18和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1表达及其意义

目的通过检测妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘合体滋养细胞中白细胞介素18(IL-18)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的定位和表达及caspase-1的生物学活性,探讨其与ICP发病的关系。方法 2011年3月至11月在重庆医科大学附属第一医院选择ICP孕妇40例为研究对象,包括ICP轻度组(20例),ICP重度组(20例),以同期行择期剖宫产术的20例正常孕妇为对照组。采用免疫组化检测IL-18和caspase-1的表达。结果 ICP重度组孕妇血清中IL-18及丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平显著高于轻度组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP重度组胎盘合体滋养细胞中IL-18和caspase-1表达水平显著高于轻度组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-18和caspase-1信号通路介导的免疫损伤可能参与了ICP孕妇的肝功能损害。

IL-18/IL-18BP介导NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的初步研究

目的探讨白细胞介素(IL)-18/IL-18结合蛋白(BP)介导自然杀伤(NK)-92MI细胞杀伤α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)猪内皮细胞的效应及可能机制。方法将NK-92MI细胞分为NK组、NK+IL-18组、NK+GTKO组、IL-18+NK+GTKO组和IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NK-92MI细胞中炎症相关基因的信使核糖核酸(mRNA)表达,乳酸脱氢酶(LDH)法检测NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤效应,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测GTKO猪内皮细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测具有杀伤效应的蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果与NK组、NK+IL-18组以及NK+GTKO组比较,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8、IL-3、IL-6和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的mRNA表达水平均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组NK-92MI细胞中IFN-γ、TNF-α、IL-8、IL-3、IL-6和GM-CSF的mRNA表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与NK+GTKO组相比,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ蛋白表达水平均升高,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率增加,GTKO猪内皮细胞凋亡率增加,GTKO猪内皮细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2和裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的比例均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组穿孔素、颗粒酶B、IFN-γ蛋白表达水平均降低,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率降低,GTKO猪内皮细胞凋亡率下降,GTKO猪内皮细胞中Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3的比例均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论IL-18BP可阻断IL-18诱导的NK-92MI细胞中炎症相关基因表达和NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的效应。

脑室周围白质软化早产儿血清半胱氨酸蛋白酶-1和白细胞介素-18水平的变化

目的研究脑室周围白质软化(PVL)早产儿血清半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-18水平的变化及二者的相关性,探讨PVL的发病机制及Caspase-1、IL-18的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测日龄48～72 h的13例PVL早产儿(PVL组)、17例脑室内出血(IVH)早产儿(IVH组)及20例健康对照早产儿(对照组)出生第3天血清Caspase-1和IL-18的水平。采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果 PVL组早产儿血清Caspase-1和IL-18均明显高于IVH组和对照组早产儿,两组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);IVH组和对照组早产儿血清Caspase-1和IL-18比较差异无统计学意义(P>0.05);PVL组早产儿血清Caspase-1和IL-18呈正相关(r=0.965,P=0.000)。结论 Caspase-1和IL-18参与了早产儿PVL的发病机制,联合测定Caspase-1和IL-18可作为早期诊断早产儿PVL的方法之一。

颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平变化及意义

目的探讨颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白-18(CCCK-18)、神经轴突向导因子-1(Netrin-1)、乙酰肝素酶(HPA)水平变化及意义。方法选取200例颅内动脉瘤破裂后蛛网膜下腔出血患者,根据患者血管内介入术后是否发生慢性脑积水分为发生组52例与未发生组148例。比较两组临床资料及血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平,Logistic回归分析颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价CCCK-18、Netrin-1、HPA对颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水的预测价值,比较不同血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平患者生存预后情况。结果发生组年龄、Hunthess分级及Fisher分级与未发生组比较差异有统计学意义(P均<0.05);发生组术后第1、3、7天血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平均高于对照组(P均<0.05);Logistic回归分析结果显示,CCCK-18、Netrin-1、HPA均为颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水发生的影响因素(P均<0.05);CCCK-18、Netrin-1、HPA联合预测颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水的AUC为0.927,较单一指标预测AUC大(P均<0.05);术后第3天CCCK-18、Netrin-1、HPA高水平患者30 d内病死率高于低水平患者(P均<0.05)。结论颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平较高,联合检测有助于慢性脑积水预测及预后评估。

密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺组织细胞Caspase-1和IL-18的影响

目的观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺组织细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteine aspartic protease-1,Caspase-1)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)表达的影响。方法将30只新西兰长耳白兔随机分为5组,分别为空白组(不灌胃)、模型组(不灌胃)、密蒙花颗粒剂组(灌胃药物为密蒙花颗粒剂)、安慰剂组(灌胃药物为生理盐水)、睾酮组(在兔大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液)。除空白组外,所有兔子的造模方式均为双侧睾丸及附睾切除术。干预30 d后,将所有兔子处死,摘取泪腺组织进行免疫组化染色观察泪腺组织细胞结构并检测泪腺组织中Caspase-1和IL-18的表达。结果免疫组化染色显示:模型组兔子泪腺组织排列不整齐,细胞破碎;密蒙花颗粒剂组与睾酮组兔子泪腺组织排列整齐,细胞结构清晰。与空白组相比,模型组Caspase-1、IL-18平均光密度差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,安慰剂组Caspase-1、IL-18平均光密度差异无统计学意义(P>0.05);密蒙花颗粒剂组与睾酮组Caspase-1、IL-18平均光密度值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与睾酮组相比,密蒙花颗粒剂组Caspase-1、IL-18平均光密度差异无统计学意义(P>0.05)。结论密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞Caspase-1、IL-18表达具有抑制作用,密蒙花颗粒剂可能通过抑制泪腺组织中Caspase-1、IL-18的表达,减少泪腺组织细胞的焦亡,从而达到治疗干眼的目的。

骨髓间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠Caspase1和IL-18表达的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠的疗效、移植途径.方法:用D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠ALF模型.72只大鼠随机分为ALF对照组、尾静脉移植组、门静脉移植组.于BMSCs移植后24、72、120、168 h取血清和肝组织,分别检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);采用TUNEL法检测肝细胞凋亡;采用免疫组织化学、Western blot方法检测肝组织中半胱氨酸蛋白酶1(cysteinecontaining aspartate-specific proteases 1,Caspase1)和白介素18(interleukin-18,IL-18)蛋白的表达情况.结果:ALF对照组大鼠血清ALT、AST水平随病程逐渐升高.在移植后120、168 h,BMSCs移植组的血清ALT、AST与对照组相比差别有统计学意义(P<0.05);尾静脉、门静脉移植组细胞凋亡指数分别为28.17%±17.08%、20.67%±12.68%、19.67%±11.82%、13.00%±6.84%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).BMSCs移植组Caspase1、IL-18蛋白表达水平逐渐降低,在移植后120、168 h与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);且二者的表达有明显的相关性(P<0.01).尾静脉、门静脉移植途径对ALF大鼠均有治疗作用,但二种途径相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:BMSCs能够改善ALF肝衰竭大鼠的肝功能,抑制肝细胞凋亡、降低Caspase1、IL-18蛋白水平.Caspase1和IL-18在肝衰竭的发病过程中起重要作用;Caspase1和IL-18可望成为急性肝衰竭的预测因子和未来的治疗靶点.

白细胞介素-18与缺氧缺血性脑损伤的关系

白细胞介素-18(IL-18),最初被称为干扰素诱导因子(IGIF),它在结构上与IL-1同源,被半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)催化成熟,是一种重要的前炎性细胞因子。在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后其表达明显增强,促进了HIBD后炎性反应的发生及损伤的发展。近年来,IL-18在HIBD中的作用被广泛关注。本文主要就IL-18与HIBD的关系作一综述。

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1抑制剂VX-765对急性胰腺炎的保护作用及其机制

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1抑制剂VX-765对急性胰腺炎的保护作用及其分子机制。方法将60只SD大鼠(2019年8月购自河南省实验动物中心)按照随机数字表法分为假手术组、模型组和VX-765组,模型组和VX-765组经手术注射5%牛黄胆酸钠制备急性胰腺炎模型,对照组只进行手术不注射5%牛黄胆酸钠。建模24 h后对照组和模型组大鼠经腹腔注射生理盐水,VX-765组大鼠经腹腔注射50 mg/kg VX-765,治疗48 h后,观察3组大鼠存活率,采用自动生化仪检测血清淀粉酶活性;采用苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺病理学变化;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析3组大鼠外周血白细胞介素(IL)-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达水平,计量资料比较采用单因素方差分析。结果VX-765组大鼠血清淀粉酶活性[(1530.40±280.45)U/L]低于模型组血清淀粉酶活性[(2910.43±429.12)U/L],差异有统计学意义(t=4.891,P<0.05)。VX-765组大鼠病理学评分(4.09±0.17)分低于模型组大鼠病理学评分(9.56±2.61)分,差异有统计学意义(t=3.018,P<0.05)。VX-765组大鼠胰腺组织中IL-1β和IL-18 mRNA表达水平(1.96±0.14、1.47±0.17)低于模型组大鼠胰腺组织中IL-1β和IL-18 mRNA表达水平[(3.18±0.21)、(2.67±0.17)],差异有统计学意义(t=2.999、2.104,P<0.05)。VX-765组大鼠外周血清IL-1β和IL-18水平[(159.43±7.09)、(99.50±5.09)ng/L]低于模型组大鼠外周血清IL-1β和IL-18水平[(310.48±25.55)、(190.65±10.43)ng/L],差异有统计学意义(t=2.801、2.466,P<0.05)。结论VX-765通过抑制Caspase-1活性,降低IL-1β和IL-18等炎性因子水平,进而缓解急性胰腺炎。

老年病毒性心肌炎患者外周血NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路的变化及意义

目的探究老年病毒性心肌炎患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3-凋亡相关斑点样蛋白(ASC)-半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1-白细胞介素(IL)-18/IL-1β-转化生长因子(TGF)-β信号通路的变化及意义。方法选择140例老年病毒性心肌炎患者,根据病程分为急性期和恢复期,另选择同期50例健康体检者,均采用聚合酶链反应检测外周单个核细胞(PBMCs)中NLRP3炎性小体、ACS、Caspase-1 mRNA水平,Western印迹检测上述三者蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测外周血IL-18、IL-1β和TGF-β水平,分析检测结果。结果140例患者检出病毒140株,其中RNA病毒86株,DNA病毒54株,主要病毒为柯萨奇病毒B、柯萨奇病毒A和疱疹病毒1型;病毒性心肌炎急性期患者NLRP3、ACS、Caspase-1 mRNA及其蛋白表达水平和血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均显著高于恢复期和对照组(P<0.05),恢复期和对照组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);病毒性心肌炎急性期患者NLRP3 mRNA及其蛋白表达与ACS、Caspase-1 mRNA表达和ACS、Caspase-1蛋白表达及血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均呈正相关(P<0.05)。结论老年病毒性心肌炎急性期患者NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路被激活,参与病理过程,可为疾病诊疗提供指导。

细胞焦亡因子Caspase-1、IL-1β与IL-18在子宫内膜息肉组织中的表达和意义

目的检测细胞焦亡相关因子Caspase-1、IL-1β与IL-18在子宫内膜息肉组织中的表达情况,探讨细胞焦亡与子宫内膜息肉发病的关系,为深入研究子宫内膜息肉的发病机制提供依据。方法选取2020年1月至2021年1月在昆明医科大学第一附属医院妇科行宫腔镜探查术+诊刮术的60例患者,将术后病检为子宫内膜息肉的30例患者纳入观察组,术后病检为增生期子宫内膜的30例患者纳入对照组。采用免疫组化法检测Caspase-1、IL-1β与IL-18在观察组和对照的表达情况。结果Caspase-1主要表达于胞浆内,观察组的IRS得分为:(4.88±1.8)分,对照组的IRS得分为:(1.37±1.13)分,Caspase-1在观察组的表达高于对照组(t=8.95,P<0.05)。IL-1β在2组中均不表达。IL-18主要表达于胞浆和胞核内,观察组的IRS得分为:(6.84±2.41)分,对照组的IRS得分为:(1.73±0.90)分,IL-18在观察组的表达高于对照组(t=10.87,P<0.05)。结论Caspase-1和IL-18在子宫内膜息肉组织中高表达,这两种细胞焦亡相关因子可能参与子宫内膜息肉的发生。

HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用

目的探讨HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用。方法采用剂量递增方法,建立二乙酰吗啡成瘾大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为3组,正常组(Control,n=10)皮下注射等量生理盐水;模型组(Model,n=15)首次皮下注射二乙酰吗啡剂量为5 mg/kg,以后逐日递增剂量2.5 mg/(kg·d),连续注射20 d;模型+10 D组(Model+10D,n=15)在模型组基础上继续递增剂量至第10天。采用ELISA法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)含量;采用HE染色观察各组心肌组织病理变化;采用TUNEL染色检测各组心肌组织细胞凋亡;采用免疫组化、RT-qPCR和Western blot检测HK2、VDAC1及凋亡相关因子的mRNA和蛋白的表达变化。结果HE染色发现随着二乙酰吗啡干预时间的延长,心肌组织表现出不同程度的损伤。与正常组相比,模型组中血清LDH、GOT含量及心肌凋亡率升高,HK2和抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白水平下降,VDAC1和促凋亡因子Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白水平升高,Clevead Caspase-3蛋白水平升高;与正常组相比,模型+10 D组中以上指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二乙酰吗啡可导致心肌细胞凋亡,HK2和VDAC1可能参与了二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡的过程。

急性缺血性脑卒中患者血清CCCK-18、CTRP3水平变化及临床意义

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白-18(CCCK-18)、补体1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)水平变化及临床意义。方法选取163例AIS患者为AIS组,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)将患者分为轻度缺损组(49例)、中度缺损组(76例)、重度缺损组(38例),治疗3个月后根据改良Rankin量表(mRS)将患者分为预后不良组(66例)和预后良好组(97例),另选取同期72例体检健康者为对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清CCCK-18、CTRP3水平。结果AIS组血清CCCK-18水平明显高于对照组,CTRP3水平明显低于对照组(P<0.05)。轻、中、重缺损度组血清CCCK-18水平逐渐提升,CTRP3水平逐渐降低(P<0.05)。血清CCCK-18水平与NIHSS评分呈正相关;CTRP3水平与NIHSS评分呈负相关(P<0.05)。多因素Logistics回归分析显示,大面积梗死、高NIHSS评分、高CCCK-18水平为AIS患者预后不良独立危险因素,高CTRP3水平为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,CCCK-18联合CTRP3预测AIS患者预后不良的AUC明显大于CCCK-18、CTRP3单独预测(P<0.05),敏感度、特异度为86.36%、81.44%。结论AIS患者血清CCCK-18水平上调,CTRP3水平下调,与病情严重程度和预后不良有关,联合检测二者能提升预后不良预测价值。

Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肝IL-18表达的影响

目的观察Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝组织及肝内IL-18表达的影响。方法采用4%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发SAP模型。SD大鼠42只,随机分为3组:对照组(HC组,n=6);SAP造模+生理盐水组(SAP-S组,n=18);SAP造模+Caspase-1抑制剂组(SAP-ICE-I组,n=18)。SAP-S组于造模后2h腹腔注射生理盐水1ml,12h后重复1次;SAP-ICE-I组于造模后2h腹腔注射ICE抑制剂,12h后重复1次。HC组模拟胰胆管穿刺操作,但不注射药物。SAP-S组与SAP-ICE-I组于造模后6、12、18h心脏穿刺抽血,测血清淀粉酶(AMY)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,并测定腹水量,留取标本在光镜下观察胰腺及肝组织病理学改变,采用免疫组化方法检测IL-18在肝脏中的表达和定位,并用Western blotting方法检测肝内成熟IL-18蛋白的表达。结果与HC组比较,SAP-S组与SAP-ICE-I组血清AMY、ALT、AST水平明显升高,腹水量明显增多(P<0.01);与SAP-S组相比,SAP-ICE-I各组血清AMY、血清ALT、AST水平和腹水量有显著下降(P<0.01)。光镜下,SAP-S组胰腺和肝组织病理损害程度随时间明显加重,与SAP-S组相比,SAP-ICE-I组对应时间点胰腺病变程度有所减轻,而肝组织损伤未见明显变化。免疫组化结果显示,Kupffer细胞胞质中IL-18的表达在SAP-S组和SAP-ICE-I组较HC组明显增多,而SAP-ICE-I组较SAP-S组明显减少。Western blotting结果显示,成熟的IL-18表达在SAP-S组各时间点明显升高,与HC组相比均具有显著性差异(P<0.01),SAP-ICE-I组各时间点较SAP-S组显著减少(P<0.01),除6h组外均较HC组无显著差异(P>0.05)。结论Caspase-1抑制剂可以抑制成熟的IL-18蛋白的表达,可以有效改善SAP时受损的肝脏功能。