直立型半野生大豆叶绿体基因组分析

采用Illumina高通量测序技术对直立型半野生大豆(Glycine gracilis)叶绿体基因组(Chloroplast DNA,cpDNA)进行测序和组装,获得完整基因组,以探究其结构特征,为后续基于cpDNA的相关分析以及大豆资源多样性保护和系统发育等研究提供基础或依据。结果表明,直立型半野生大豆cpDNA全长148320 bp,为典型四分体结构,注释基因108个,包含66个蛋白编码基因、29个tRNA基因和4个rRNA基因。基因组序列上共检测到87个SSR位点,其中与单核苷酸、双核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸对应的位点分别为55,19,4,7,2个。在系统发育上,直立型半野生大豆与已公布的普通型一年生半野生大豆(Glycine gracilis)、栽培大豆(Glycine max)及野大豆(Glycine soja)亲缘关系较近。

西藏半野生小麦LMW-GS基因的克隆及序列分析

根据小麦低分子量谷蛋白基因序列保守区设计的引物W12 2 7/ 12 2 8对特异种质资源 西藏半野生小麦(Triticumaestivumssp .tibetanumShao)AS90 8总DNA进行PCR扩增 ,得到约 95 0bp的DNA片段 ,分离纯化后连接到pBluescriptSK(+/ )T载体上 ,转化、筛选后选取 3种不同类型的阳性克隆进行测序 ,获得 3个不同的基因序列 ,Ti bet1、Tibet2和Tibet3。其中 ,Tibet1(GenBank登录号 :AY2 994 5 7)、Tibet2 (GenBank登录号 :AY2 994 5 8)的编码区长度分别为 10 4 1bp和 90 6bp ,可编码 32 6和 2 81个氨基酸残基的成熟蛋白。Tibet3(GenBank登录号 :AY2 994 5 9)由于编码区内有 2个提前终止密码子而为不可编码成熟蛋白的假基因。序列比较显示AY2 994 5 7、AY2 994 5 8和AY2 994 5 9分别与GenBank中Glu D3、Glu A3和Glu A3位点编码的LMW GS基因AY2 14 4 5 0、AJ2 930 99和AB0 6 2 871有较高的一致性 ,且序列结构非常相似 ,因而推测它们与之有类似的品质功能 。

小麦杂种优势群研究 Ⅵ.普通小麦与穗分枝小麦、轮回选择后代材料、西藏半野生小麦和斯卑尔脱小麦早熟诱变系的SSR分子标记遗传差异研究

为分析小麦杂种优势群,采用微卫星(SSR)分子标记对中国北方冬麦区普通小麦(20份)、穗分枝小麦(4份)、轮回选择后代(14份)、西藏半野生小麦(3份)和斯卑尔脱小麦Hubel早熟诱变系(4份)共45份材料的遗传多样性进行了分析。结果表明,所用23个SSR引物在45个材料间共检测出226个等位变异,每个引物检测出5-16个等位变异,平均为9.82个。普通小麦群体与轮回选择后代、穗分枝小麦、西藏半野生小麦和Hubel诱变系间的遗传距离分别为0.7715、0.8145、0.9087和0.9217,均明显高于普通小麦群体内的0.6622;在聚类结果上,普通小麦、穗分枝小麦、轮回选择后代、西藏半野生小麦和Hubel诱变系也被明显地划分为五大不同类群,说明普通小麦群体与穗分枝小麦、轮回选择后代、西藏半野生小麦和Hubel诱变系间存在着较大的遗传差异。其中,轮回选择后代、穗分枝小麦和Hubel诱变系与普通小麦杂交F1代育性正常,且为普通小麦表型,可用作杂交小麦的亲本。西藏半野生小麦成熟时期穗轴自然断落,不利于收获,在用于小麦杂种优势利用时须先进行遗传改良。

红外三级鉴定法快速鉴别栽培与半野生黄芪

采用红外光谱的三级鉴定法分析鉴别了栽培黄芪和半野生黄芪。所获得的一维红外光谱、二阶导数谱和二维红外相关谱,能逐步提高红外谱图的分辨率,并从不同的角度上体现了两者的差异性。结果显示,黄芪的红外光谱主要由有机酯类化合物、醌类化合物及糖苷类物质的振动吸收带组成。两类黄芪样品的一维红外光谱和一阶导数谱整体上十分相似,只是在多糖吸收区域(1160—925cm-1)略有差异,对比该区域的二维相关红外光谱,差异主要表现在1100—1000cm-1和1150—1050cm-12个吸收带。结果表明,红外三级鉴定法可以对栽培黄芪和半野生黄芪进行快速、无损、简便的分析与鉴定。

海南羊山地区半野生荔枝种质的ISSR分析

对海南岛羊山地区半野生荔枝种质的遗传多样性进行分析,旨在为该地区荔枝核心种质的保护提供理论依据。从74条引物中筛选出23条多态性引物,用ISSR方法对115份海南羊山地区半野生荔枝种质进行遗传多样性分析。结果表明,115份种质的遗传距离在0.04～0.66之间,平均为0.28。在遗传距离为0.53的水平上,115份荔枝种质被分为5个类群,美品村、儒道村荔枝基因型分别单独为1个类群,苍道村、杨南村荔枝基因型覆盖其它3个类群,应作为核心种质的村庄开展进一步研究。

野生大豆、半野生大豆和栽培大豆对苗期干旱胁迫的生理反应

以野生、半野生和栽培大豆为材料,在旱棚盆栽条件下进行苗期干旱胁迫试验。对叶绿素含量、光合速率、脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量、相对电导率、可溶性糖(WSS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性进行测定。结果表明,在干旱胁迫下,叶绿素含量、光合速率、可溶性糖含量、脯氨酸含量及SOD活性表现为野生大豆>半野生大豆>栽培大豆;而丙二醛含量、相对电导率、POD活性则表现为野生大豆<半野生大豆<栽培大豆。干旱胁迫下不同类型材料各生理指标与正常供水条件相比都发生不同程度的变化,叶绿素含量、光合速率降幅为野生大豆<半野生大豆<栽培大豆;脯氨酸含量增幅为野生大豆>半野生大豆>栽培大豆;而丙二醛(MDA)含量、相对电导率、SOD活性、POD活性、CAT活性增幅变化顺序为野生大豆<半野生大豆<栽培大豆。在干旱胁迫下,野生大豆、半野生大豆和栽培大豆的生理指标发生显著变化,3种类型大豆的变化幅度差异显著。野生大豆在干旱胁迫下生理指标的表现优于半野生大豆和栽培大豆。

半野生大豆种质资源SSR位点遗传多样性分析

利用 1 2对 SSR引物对 67份半野生大豆种质进行了遗传多样性的检测分析。结果表明 ,1 2个位点共检测到 1 84个等位基因变异 ,平均每个位点等位基因数目为 1 5.41个。平均多态性信息量、平均遗传多样性指数、平均遗传距离分别为 0 .849、0 .70 6、0 .1 1 8。根据 SSR分析结果 ,按欧式距离将 67份半野生大豆种质聚类并划分为

中国半野生小麦的酯酶同工酶分析

对 2 8份中国特有半野生小麦的幼苗、剑叶及幼穗的酯酶同工酶分析表明 :酯酶在这些材料中存在组织特异性。幼苗电泳出 10条带 ,8种酶谱类型 ;剑叶 15条带 ,7种类型 ;幼穗 18条带 ,2 0种类型。幼穗的酯酶同工酶在材料个体间类型最为丰富 ,更能反映个体间的遗传多样性。聚类分析结果表明 ,云南小麦和西藏半野生小麦亲缘关系较近 。

半野生与野生冬虫夏草化学成分的比较

对半野生和野生冬虫夏草的主要化学成分——腺苷、氨基酸、微量元素、甘露醇、冬角甾醇的含量作了比较分析,结果表明,二者之间无显著差异。

不同海拔高度对半野生栽培猪苓产量的影响

以当地野生灰苓和人工培养的蜜环菌材为材料,采用海拔高度为600～800、800～1 000、1 000～1 200和1 200～1 400m的4个栽种范围,随机区组设计,研究猪苓半野生栽培的适宜海拔高度。结果表明:猪苓栽种在海拔高度800～1 200m产量与经济效益均较好;栽种在海拔高度1 000～1 200和800～1 000m林区的猪苓产量显著高于1 200～1 400和600～800m的产量,其经济效益高近1倍。因此,猪苓半野生栽培时,建议在海拔高度800～1 200m范围内的丘陵地区栽培。

栽培大豆、半野生大豆、野生大豆比较胚胎学研究

通过对栽培大豆、半野生大豆和野生大豆比较胚胎学研究,指出了三种类型大豆具有相同的胚胎学发育特征,这些特征如下:1.雄性孢原为表皮下多细胞;小孢子母细胞减数分裂的胞质分裂为同时型;四分孢子主要为正四面体形,少数为左右对称形;成熟花粉粒为二细胞型;花药壁的发育属基本型;绒毡层细胞单核,属分泌型绒毡层。2.单室子房;弯生胚珠,双珠被,厚珠心;胚珠亚表皮下多孢原;多数大孢子四分体线形排列;少数为“T”字形排列,合点端大孢子有功能;胚囊发育为蓼型,反足细胞短命。3.大孢子发生较小孢子发生稍晚,但发育速度较快,后期雌、雄配子体同步成熟。4.自花授粉;受精过程属有丝分裂前配子融合类型。5.胚的发育属柳叶菜型;核型胚乳,胚乳发育中后期胚囊合点端存在胚乳吸器;胚珠合点端具承珠盘结构。

中国樱桃半野生种对樱的茎尖培养

以中国樱桃半野生种对樱茎尖为外植体进行试管繁殖 ,最佳灭菌方法为二次灭菌 (70 %乙醇30s→ 0 1%新洁尔灭 15min→ 0 1%升汞 3min)结合培养基添加抗生素羧苄西林二钠 5 0mg/L。最佳培养条件 :(1)初代培养基为F14+6 BA 0 5mg/L +IBA 0 2mg/L +GA3 0 5mg/L ;(2 )继代培养基为F14+6 BA0 5mg/L +IAA 1 0mg/L +GA3 0 5mg/L ,碳源采用白砂糖 2 0g/L +山梨糖醇 5g/L。同时研究表明 ,外植体种类、茎尖大小及抗氧化剂维生素C均影响茎尖初代培养成活率。

大豆Soja亚属内种子大小的遗传差异及半野生类型分类归属

Soja亚属包括野生、半野生和栽培大豆三种类型,其中半野生型变异丰富,与野生和栽培大豆形态重叠。然而半野生大豆是属于野生种内还是栽培种的变异类型还存在争议。本研究使用421份包括两组野生大豆百粒重类型、三组半野生大豆百粒重类型和小粒秣食豆类型大豆地方品种对Soja亚属内进行了SSR标记的遗传多样性差异评价和对半野生大豆的分类地位归属问题进行了分析。结果显示,小粒组野生大豆（2.5g以下）和大粒组（2.5~3.0g）有明显的分化。大粒野生大豆和小粒半野生大豆（3.01~5.0g）遗传关系密切,百粒重5.01~10.0g和超过10.0g的半野生大豆组遗传关系密切。大粒野生大豆在遗传上与半野生大豆类型密切。从小粒野生大豆到大粒半野生大豆各类型的遗传分化与它们的百粒重大小有密切关联,即使与小粒秣食豆的百粒重相重叠甚至超过小粒秣食豆的半野生大豆都与小粒栽培大豆有显著的遗传差异。我们所获得的结果清楚地表明：半野生大豆属于野生种内的变异而非栽培种内变异。百粒重大小可以当作评价野生大豆物种内的遗传分化或进化程度的主要指标之一有其遗传上的理论依据。

半野生大额牛的研究进展和保护利用现状

大额牛(Bos frontalis)在我国又叫独龙牛,是一种半野生的珍稀牛种。本文较系统地介绍大额牛的起源、繁殖特点、生产性能与杂交利用、疾病调查、迁地保护、饲养管理等研究进展,提出我国独龙牛保护、利用中存在的问题及相应对策和建议。

西藏半野生小麦高分子量麦谷蛋白亚基遗传多样性分析

利用SDS-PAGE技术对142份西藏半野生小麦的HMW-GS的组成进行了遗传多样性分析。结果表明,在供试材料中,Glu-1位点共有12种等位基因,Glu-A1位点的1（2.82%）和null（97.18%）亚基,Glu-B1位点的8（0.7%）、7＋8（80.28%）、6＋8（16.20%）、7＋9（2.11%）、23＋24（0.7%）亚基和Glu-D1位点的2＋12（91.55%）、2＋10（2.11%）、4＋12（2.11%）、2＋12＊（1.41%）、2（2.82%）亚基;其中亚基null、7＋8、2＋12在各自的位点上出现频率最高,分别达到了97.18%、80.28%、91.55%;亚基组合共有12种,主要为null/7＋8/2＋12,频率高达73.24%。根据获得的HMW-GS谱带构建[1,0]矩阵,计算材料间的Nei-Li′遗传相似系数（GS）,发现所有材料间GS值变化范围在0.40~0.66之间,平均值为0.53。在142份供试材料中,共发现12条相对迁移率不同的谱带,频率变异的范围为0.7%~97.18%,Glu-A1、Glu-B1、Glu-D1三个位点的多样性指数分别为0.128、0.632、0.404,平均值为0.388。

栽培大豆×半野生大豆F_1代优势及其与亲本关系的研究

本文对３个栽培大豆与半野生大豆杂交组合进行了分析，结果表明：大豆品种间杂种优势是普遍存在的，而且主要表现在产量性状上，百粒重的杂种优势及超亲优势为负值。超亲优势的表现与杂种优势的表现基本相同。杂种后代植株高、分枝多、籽粒小是半野生大豆在育种工作中利用的障碍。为克服杂种后代的小粒性，必须用大粒亲本进行回交并进行定向选择。利用双亲的平均值可以预测Ｆ１代的株高、主茎节数、有效分枝数、单株荚数、单株粒重、百粒重。Ｆ１代单株粒重的增加主要依赖于单株荚数、单株粒数、百粒重的增加，与栽培大豆亲本（Ｐｃ）、半野生大豆亲本（Ｐｓｗ）和双亲平均值（Ｍｐ）相关不显著。

陆地棉半野生种系的遗传多样性和亲缘关系分析

2009-2010年以陆地棉标准系TM-1和海岛棉标准系3-79作为对照,将陆地棉的7个半野生种系64份种质资源进行了简单重复序列（SSR）分子标记的遗传多样性和亲缘关系研究。112对SSR引物共检测出502个等位位点,其中多态性位点392个,约占总位点数的78%。每对引物扩增出2~10个等位位点,平均约为4.5个,其中多态位点数1~9个,平均约3.5个。供试半野生种系间的遗传相似系数为0.533~0.995,平均0.690,说明陆地棉半野生种系之间存在着丰富的遗传多样性。7个陆地棉半野生种系遗传多样性顺序为：玛利加郎特棉〉尤卡坦棉〉阔叶棉〉帕默尔棉〉莫利尔棉〉雷奇蒙地棉〉尖斑棉。UPGMA聚类结果表明,7个陆地棉半野生种系在相似系数为0.690处被聚为四大类,帕默尔棉和阔叶棉与陆地棉的亲缘关系最近。

西藏半野生小麦高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

应用SDS-PAGE分析了50份西藏半野生小麦(Triticum aestivum ssp.tibetanum Shao)的高分子量麦谷蛋白亚基等位基因组成。结果表明,43份材料的HMW-GS组成是同质的,7份材料为异质。供试材料共有7种HMW GS组合,以Null、7+8、2+12为主要类型,占所分析材料的68．4％。在Glu-1位点共检测到10种等位基因,Glu- A1位点2种,Glu～B1位点4种,Glu～D1位点4种。Null(96％)、7+8(80．4％)和2+12(94．9％)分别是Glu-A1、 Glu-B1和Glu～D1位点上主要的等位基因。在Glu-B1位点还新发现2个亚基,暂时分别命名为8*和7**。说明西藏半野生小麦中存在着较广泛的HMW-GS等位基因变异,是小麦品质育种潜在的可利用的遗传资源。

西藏半野生小麦遗传多样性研究进展以及原位保存的建议

1995—1998年对277份西藏半野生小麦的研究表明:西藏半野生小麦形态类型多样、断穗特征稳定,是六倍体小麦中独特的小穗下节位断裂的裸粒型断穗小麦。在性状聚类中,它与栽培小麦各居一群,泾渭分明,明显特点是断穗性强、成熟早、穗密度偏稀,植株较高,千粒重偏低。通过等电聚焦同功酶分析显示,14个生化位点中有10个位点存在遗传多样性;在 RFLP 分子标记中,第3、4、5、6、7同源群表现多态性,但只有在第5、6、7同源群染色体长臂或短臂上与栽培品种存在不同,因而断穗基因可能存在于5S、5L、6L 或7S 染色体之一上。西藏半野生小麦中有4.5%的材料具有中抗和高抗白粉病能力;蛋白质、赖氨酸含量均超过对照2～5个百分点。建议在不同海拔的加查县和察隅县建立西藏半野生小麦的原位保存点。

皖豫鄂苏四省野生及半野生菊属种质资源的调查研究

为建立菊花基因库和探讨菊花的起源演化取得素材，作者对四省野生及半野生菊属种质资源进行了调查，找到了大量的开淡黄花的毛华菊与野菊（毛×野）的天然杂交种、开纯白花和淡黄花的野菊和毛华菊（野×毛）的天然杂交种、毛华菊和甘菊的天然杂交种、野菊和甘菊的天然杂交种，以及毛华菊、野菊、甘菊、紫花野菊、菊花脑等，再次验证了菊花起源于天然种间杂交的观点，并引种了上述这些菊属种质资源，栽种于北京林业大学菊花基因库中。