华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库的构建及鉴定

目的 构建华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础。方法提取华支睾吸虫囊蚴总RNA;用Clontech公司SMARTTM cDNA文库构建试剂盒并按其操作方法进行,进行反转录合成双链cDNA。PCR产物经蛋白酶K消化、纯化后,进行SfiI酶切;用ChromaSpin 400柱将酶切产物进行分级分离,经1.1％琼脂糖凝胶电泳鉴定,回收0.4～4kb的组分,并与λTriplEx2载体连接;连接产物经体外蛋白包装,产生未扩增文库;检测未扩增文库滴度和重组效率后,进行文库的扩增,并测定扩增文库的滴度;随机挑取9个噬菌斑,用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建的cDNA文库的质量。结果 未扩增文库滴度达7.0×107pfu/ml,扩增文库滴度达2.5×108pfu/ml;用载体两端的引物进行PCR鉴定,结果显示:扩增文库中,含1kb以上的占30％左右,1kb～500bp占69％。结论已成功地获得一高质量的华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库。

物理处理鱼体内华支睾吸虫囊蚴感染兔实验观察

为研究钴 - 6 0辐照和 - 18℃～ - 2 0℃冷冻对鱼肉中华支睾吸虫囊蚴感染的影响 ,设立A、B 2个实验组。一组用 0 0 5、0 10、0 15、0 2 0、0 2 5kGy钴 - 6 0对含华支睾吸虫囊蚴的鱼肉进行辐照 ;另一组将感染了华支睾吸虫囊蚴的鱼肉于 - 18～ - 2 0℃冷冻 3、7、14、2 1、2 8d。用两组处理过囊蚴的鱼肉灌喂家兔 ,用粪检虫卵和解剖动物检查虫体的方法判定结果。囊蚴感染家兔 4 5d后解剖 ,0 15、0 2 0、0 2 5kGy组及冷冻组鱼肉饲喂的动物内均未找到华支睾吸虫成虫、童虫、和虫卵 ,肝胆器官未见病变。鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴经钴 - 6 0 0 15kGy以上剂量辐照或存放于 - 18℃～- 2 0℃冷冻 3d以上 ,便失去感染力。

荆州市7种淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染调查分析

目的:了解荆州市淡水鱼类华支睾吸虫囊蚴感染状况,为该病的预防提供科学依据。方法:取7种常见淡水鱼668条,采用压片法和消化法检测华支睾吸虫囊蚴感染情况分析,并从阳性鱼中分离出的华支睾吸虫囊蚴感染家兔。结果:检出华支睾吸虫囊蚴有4种鱼,以麦穗鱼检出率最高(33.33%),余依次为鳑鮍鱼(25.00%)和白鲢(25.00%)、棒花鱼(23.33%),平均18.86%,鳊鱼、鲤鱼、鲫鱼等未检出;从阳性鱼中分离出的华支睾吸虫囊蚴感染家兔,35d后肝脏镜检均获华支睾吸虫成虫。结论:荆州市部分淡水鱼存在华支睾吸虫囊蚴感染。

武昌区市售淡水鱼类华支睾吸虫囊蚴感染情况的初步调查

目的 调查武昌区市售淡水鱼类华支睾吸虫囊蚴的感染情况。方法 取武昌区市售的淡水鱼类 ,用直接压片法和人工消化法检查囊蚴。结果 所查样品华支睾吸虫囊蚴感染率为 35 .6 %。结论 武昌区市售淡水鱼类有较高的华支睾吸虫囊蚴感染率 。

关于华支睾吸虫囊蚴在鱼体内分布情况的研究

目的 观察麦穗鱼体内不同部位华支睾吸虫囊蚴的大小及其分布情况。方法 从沈阳地区麦穗鱼体不同部位分离华支睾吸虫囊蚴，对其的大小及其分布进行观测。结果与结论 囊蚴的大小为(142．39±8．21)μm×(117．23±2．68)μm。囊蚴在鱼体各部位的分布：肌肉91．65％；头部4．97％；鳞3．39％。鱼体各部位囊蚴的大小无明显差异。后尾蚴的长、宽为(367．20±108．44)μm×(123．93±26．62)μm。

广东部分地区淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况

目的了解淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法取淡水鱼肉、鱼鳃及鱼鳞,采用人工胃液消化法,镜下检查华支睾吸虫囊蚴。结果鲩鱼肉平均感染度每克含囊蚴0.8个,鱼鳞0.05个,鱼鳃0.28个,鳊鱼肉平均感染度每克含囊蚴0.33个,野鲮未查出囊蚴。结论佛山市南庄、九江和龙江,广州市增城和从化淡水鱼含有华支睾吸虫囊蚴,提示这些地区存在华支睾吸虫人畜传染源。

华支睾吸虫囊蚴标本制作新法

华支睾吸虫囊蚴标本制作新法许正敏（湖北囊凡市卫校）作者在华支睾吸虫囊蚴检查过程中，发现本地区该虫在鱼皮分布最多［１］。华支睾吸虫囊蚴标本传统制作方法是先用人工胃液消化分离出囊蚴──脱水──甘油透明──封片或染色封片［２，３］，此法繁杂染色及分色观察不...

唐山市淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染状况调查

目的了解唐山市淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法用直接压片法和人工消化法对唐山市集贸市场的7种淡水鱼进行检查。结果共调查陡河水库淡水鱼563条,阳性267条,感染率为47.42%,其中以麦穗鱼感染率最高,为83.41%(191/229),白条鱼感染率为40.00%(70/175),褐菖蚰为12.82%(5/39),鲫鱼为2.20%(1/45),黄颡鱼、鲤鱼和银飘鱼未检出华支睾吸虫囊蚴感染。结论唐山市淡水鱼有不同程度的华支睾吸虫囊蚴感染。

咸宁市淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴情况调查

目的了解目前咸宁市常见食用淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴的情况,为华支睾吸虫病的预防和健康教育工作提供依据。方法从咸宁市区不同的方位随机选取4个集贸市场,在每个市场购买市民经常食用的淡水鱼进行检测,包括:鳙鱼、鲫鱼、团头鲂(武昌鱼)、麦穗鱼,用胃蛋白酶消化法检测鱼肉中华支睾吸虫囊蚴。结果共检查鳙鱼76尾、鲫鱼87尾、团头鲂(武昌鱼)92尾、麦穗鱼189尾,华支睾吸虫囊蚴阳性率分别为23.68%、43.68%、39.13%和75.13%,阳性鱼平均感染度(个/尾)分别为15.11、9.97、10.06和48.25。结论咸宁市区的淡水鱼中存在一定程度的华支睾吸虫感染,其中麦穗鱼的感染情况较严重。

天津市主要河道中麦穗鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

华支睾吸虫（肝吸虫）是一种主要分布于亚洲东部地区的人体寄生虫，感染人体的阶段是囊蚴，寄生于第二中间宿主淡水鱼、虾体内，其中以麦穗鱼为主要宿主。为了解天津地区麦穗鱼感染情况，于2006年10—12月对天津市8条主要河道麦穗鱼感染情况进行了调查。麦穗鱼标本采用鱼肉压片法。分别捕获滦河、潮白河、浑河、州河、于桥水库、西青区王兰庄稻地沟河、子牙河、

金华市野生淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染状况调查

目的了解金华市野生淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法按金华市主要水系分布特点采集3个县的河道、水库、池塘随机捕获的野生淡水鱼虾,用直接压片镜检法检测野生淡水鱼虾肌肉中华支睾吸虫囊蚴。结果在18种野生淡水鱼虾中检出华支睾吸虫囊蚴的有11种,占61.11%;检测鱼虾2 326尾,其中阳性131尾,总感染率为5.63%。鱼类感染率为8.24%,高于虾类感染率2.96%(P<0.01)。不同调查县感染率不尽相同(P<0.01),其中以处于水系下游的婺城区水域鱼虾感染率最高为12.92%。不同水域环境感染率差异有统计学意义(P<0.01),以池塘感染率为高10.18%。不同种类野生淡水鱼的感染率差异有统计学意义(P=0.00),以旁皮鱼(17.65%)和麦穗鱼(17.65%)为最高。结论金华市野生淡水鱼虾有不同程度的华支睾吸虫囊蚴感染,生食或半生食淡水鱼虾,存在感染华支睾吸虫病的风险。

华支睾吸虫囊蚴三种鉴定方法的比较

为了比较华支睾吸虫囊蚴三种鉴定方法的优缺点,收集淡水鱼体内华支睾吸虫囊蚴,分别采用形态学观察、动物感染试验和分子生物学方法进行鉴定。结果表明:形态学观察法操作简单、用时仅为30 min,但不够准确;动物感染试验耗时长约40 d,但准确性最高;分子生物学方法耗时长约6 d,准确率高,但技术要求较高。因此建议在通常情况下采取形态学观察与分子生物学相结合的方法,即形态初步鉴定后再进行分子生物学试验来保证检验的准确性,但当鱼体内有形态相似的囊蚴同时寄生时,建议采取动物感染方法进行鉴定。