基于Cytb和ITS1基因的两种不同体型湘华鲮遗传差异研究

研究采用Cytb和ITS1基因序列作为分子标记对平背型和高背型湘华鲮的遗传差异进行分析。研究结果表明,基于Cytb与ITS1基因序列,高背型和平背型湘华鲮在碱基组成上均表现出偏向性,且呈现出高单倍型多样性和低核苷酸多样性的特征。遗传距离分析和NJ系统树构建的结果表明,两种不同体型湘华鲮遗传分化程度低,未达到种群分化的水平。综上所述,高背型和平背型属于同一个种群。研究结果丰富了湘华鲮分子生物学数据,为湘华鲮种质资源保护及产业发展提供了理论依据。

湘华鲮、墨鲮、华鲮遗传多样性的RAPD分析

从40个10 bp随机引物中筛选出12个多态性引物,对湘华鲮、墨鲮和华鲮3个群体共25个个体进行RAPD分析,共检测出81个多态性位点。试验结果表明,3种鲮群体内的遗传分化程度不高,湘华鲮、墨鲮和华鲮群体内的遗传相似性系数分别为0.8777、0.8828、0.9091;湘华鲮与华鲮的亲缘关系最近,其遗传距离为0.3637,湘华鲮与墨鲮的亲缘关系次之,遗传距离为0.5576,墨鲮与华鲮的亲缘关系最远,遗传距离为0.6030。

中华倒刺鲃、黄颡鱼和华鲮消化酶活性的比较研究

对中华倒刺鱼巴(SpinibarbussinensisBleeker)、黄颡鱼(PelteobagrusfulvidracoRichardson)和华鲮(SinilabeorendahliKimura)各消化器官消化酶进行了测定分析。结果表明,3种鱼蛋白酶活性顺序为:黄颡鱼>中华倒刺鱼巴>华鲮,表明食性不同,摄食能力不同,蛋白酶活性也不同;3种鱼淀粉酶的活性顺序为:中华倒刺鱼巴>华鲮>黄颡鱼,其酶活性与鱼类的食性有关;消化酶在肠道分布,不同鱼表现不同特点。

湘华鲮消化系统的形态学与组织学研究

采用活体解剖、测量、HE染色等方法,对10尾体长(28.98±2.69)cm湘华鲮[Sinilabeo decorus tungting(Nichols)]消化系统形态学、组织学特征进行了研究,旨在阐明其消化系统特征,并探讨其食性及消化、吸收机理。结果表明,湘华鲮消化系统具有以下特点:(1)消化系统由消化道与消化腺肝胰脏组成,消化道包括口咽腔、食管和肠3部分,无胃;肠道极长,可分为前肠、中肠和后肠,比肠长21.42±3.51,肠盘旋次数42±5。(2)湘华鲮属于碎屑食性鱼类,其取食方式为刮食。(3)从前肠往后,黏膜皱褶由网状转变为Z形褶,且逐渐变稀疏,至中肠的中后段难于分辨。(4)食道和肠道壁均由黏膜层、黏膜下层、肌肉层和浆膜层4层组成。前肠、中肠、后肠三者相互之间的黏膜下层厚度存在极显著差异(P<0.01),纵肌层的厚度存在显著差异(P<0.05),而在皱褶数量、黏膜皱褶高度、环肌层厚度、浆膜层厚度等方面,前肠、中肠、后肠三者相互之间大部分组织形态指标差异显著。(5)从前咽顶壁开始,经过肠道,至肛门处,湘华鲮消化道各处黏膜中均有黏液细胞的分布,且黏液细胞呈不均匀分布。(6)食管及整个肠道均具有消化吸收功能。湘华鲮消化道利用其罕见的长肠、丰富的黏膜褶皱及黏液细胞来完成对硅藻等低能量食物的充分消化吸收,以与其碎屑食性相适应。

饲料蛋白水平对湘华鲮幼鱼生长性能、体成分及血清生化指标的影响

为研究饲料中不同蛋白水平对湘华鲮[Sinilabeo decorus Tungting(Nichols)]幼鱼形体指标、体成分及血清生化指标的影响,配制蛋白水平为32.57%、37.58%、42.76%、47.83%和52.22%的5种等脂饲料。选取初始质量为(14.40±1.08)g的湘华鲮幼鱼450尾,随机分成5组,每组3个重复,每个重复30尾,进行为期60d的饲养实验。结果表明:(1)饲料不同蛋白水平对湘华鲮的成活率和饲料系数无显著影响(P>0.05);蛋白质效率随饲料蛋白水平的升高显著降低(P<0.05);52.22%蛋白组的增重率和特定生长率均显著低于32.57%和42.76%蛋白组(P<0.05)。(2)随着饲料蛋白水平升高,湘华鲮肥满度呈降低趋势,且52.22%蛋白组显著低于其他组(P<0.05);肝体比呈先降后升的趋势,且37.58%蛋白组显著低于32.57%、47.83%和52.22%蛋白组(P<0.05);肠体比呈降低趋势,且52.22%蛋白组显著低于32.57%蛋白组(P<0.05)。(3)湘华鲮肌肉粗蛋白质含量随着饲料蛋白水平升高而增大,且52.22%蛋白组显著大于32.57%和37.58%蛋白组(P<0.05),42.76%蛋白组显著大于32.57%蛋白组(P<0.05);饲料蛋白水平对全鱼的水分、粗脂肪、粗蛋白质、灰分及肌肉的水分和粗脂肪含量没有显著影响(P>0.05)。(4)肌肉中均检测出17种氨基酸(除色氨酸),其中52.22%蛋白组的必需氨基酸总和(ΣEAA)、非必需氨基酸总和(ΣNEAA)、鲜味氨基酸总和(ΣDAA)及氨基酸总和(ΣTAA)显著大于32.57%蛋白组(P<0.05)。(5)不同蛋白组间甘油三酯(TG)和极低密度脂蛋白(VLDL)水平均表现为37.58%<32.57%<42.76%<47.83%<52.22%,且52.22%蛋白组显著高于37.58%蛋白组(P<0.05)。综合生长性能、形体指标、体成分及血清生化指标,初步认定湘华鲮幼鱼最适蛋白质水平为37.58%—42.76%。通过特定生长率(SGR)和饲料蛋白水平的折线法分析表明,湘华鲮幼鱼达到最大生长时饲料蛋白质水平为42.91%。

华鲮肌肉营养成分与品质的评价

利用常规肌肉营养测试方法测定分析16尾华鲮(Sinilabeo rendahli)的肌肉营养成分。结果表明:华鲮肌肉(鲜样)中各成分的质量分数分别是蛋白质16.69%,脂肪2.91%,水分77.90%,灰分1.82%,无氮浸出物0.68%。肌肉中含有19种氨基酸,总量为56.52%(质量分数,脱脂干样),其中8种人体必需氨基酸总量是25.81%,占氨基酸总量的45.67%;其必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/WHO的标准。华鲮的必需氨基酸指数(EAAI)为57.37。脂肪酸中EPA与DHA质量分数分别为7.41%、28.53%,均比其他一些经济鱼类高,微量元素比值合理。

华鲮烂尾病病原的分离鉴定及药敏分析

从患有烂尾病的华鲮(Sinilabeo rendahli)体内分离到两个优势菌株(编号:BB090516C-1和BB090516C-2),对分离菌株形态特征、主要理化特性等生物学性状鉴定后测定其16S rRNA序列并构建系统发育树,同时采用K-B琼脂扩散法进行药敏实验。结果显示:经人工感染试验,证实分离菌对华鲮有较强的致病性,该菌为革兰氏阴性、兼性厌氧发酵型短杆菌。经形态特征、培养特性和生理生化反应等指标分析鉴定结果显示该菌为维隆气单胞菌温和生物型(Aerom onas veronii biovar sobria)。用16S rRNA基因序列比对结果显示分离菌株与维隆气单胞菌的同源性高达99%,系统进化树中与维隆气单胞菌自然聚为一支,表明该菌为维隆气单胞菌温和生物型。用22种抗菌类药物进行药敏实验发现,该菌对头孢曲松、硫酸庆大霉素等9种抗菌类药物高度敏感,对新霉素等6种药物中敏,对氨苄青霉素等7种药物耐药。

华鲮消化道组织学与组织化学的初步研究

对8尾华鲮(Sinilabeo rendahli Kimurai)消化道的解剖学、组织学和组织化学进行了初步研究。 结果表明：消化道长是体长的11． 1倍。同一性别消化道长与体重、体长呈正相关，不同性别相近体重体长的 个体，雄性消化道长于雌性。整个消化道分为食道、前肠、中肠、后肠四部分。粘膜层由柱状上皮细胞和杯 状细胞构成，其下为基底层细胞。从前肠至后肠前段，杯状细胞的数量、肌肉层的厚度、皱褶的数量和高度 均逐渐减少。食道和前肠纹状缘明显，中肠以后各部分纹状缘不明显。消化道内分泌细胞主要存在于前肠、 中肠和后肠前段，且由前至后分布呈递减趋势，以褶基部分布最多，褶顶端分布次之，其余部位零星分布。 内分泌细胞有 A、B、AB、NP 四种类型，其中主要是 A 型和 B 型。

华鲮外周血细胞显微结构观察

应用常规血涂片Giemsa和Wright染液联合染色,在Nikon-DXM1200数码显微摄影系统下观察华鲮的外周血细胞形态特征。结果表明:(1)红细胞数量最多;未成熟者核较圆,染色相对较浅;有直接分裂现象。(2)嗜中性粒细胞一般呈球形,核形态多变;亦发现有衰老解体者。(3)单核细胞卵圆形或近圆形,核较大,一般占整个细胞的1/3强,较大者可达1/2强。(4)淋巴细胞呈不规则圆形,核质比可达4/5强,细胞表面有伪足状突起。(5)血栓细胞有四种形态,核质比很大,边界不明了;有直接分裂现象。(6)未发现嗜碱性粒细胞。据此可推断:(1)鱼类红细胞比白细胞大的论断并不准确,血细胞的形态和物种的系统发育可能相关;(2)所谓的"大""小"两类淋巴细胞,可能为同种细胞的不同功能或发育状态;(2)鱼类外周血嗜碱性粒细胞存在与否,有待进一步探讨;(3)血栓细胞"形态不同显示了发育时期或者功能状态的不同"的推测。

华鲮精子活力的观察

观察了池塘水、江水、蒸馏水、曝气自来水及不同浓度的生理盐水对健壮华鲮雄鱼的精子活性的影响．精子全长(42．735±5．791)μm,头长(2．668±0．403)μm,尾长(39．938±5．212)μm．鲁哥氏法测得精子密度4．244× 107尾／mL,pH值约为7．5．采用平板载玻片法,低倍镜下对精子活动情况进行观察,结果表明:华鲮在池塘水、江水、曝气自来水中的运动寿命以江水最佳．在氯化钠浓度0．00％-0．50％的范围内．精子快速运动时间和寿命相对延长,但浓度超过0．50％,精子活动开始受到抑制,活动强度减弱,寿命缩短．

湘华鲮暴发性死亡病原菌的分离与鉴定

【目的】查明池塘养殖湘华鲮暴发性死亡的原因,并对分离的病菌进行鉴定和回归感染试验。【方法】取濒死湘华鲮病变组织进行细菌分离纯化,采用细菌形态特征、生化特性及16S rDNA基因系统进化树分析,进行优势菌的鉴定,并通过人工感染和药敏试验评价优势菌的毒力和药物敏感性。【结果】分离获得优势菌XHL-01和XHL-02,经鉴定分别为嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌;感染结果表明:两菌株对湘华鲮均具有致病性,感染发病症状与临床症状类似;药敏结果显示:两菌株对青霉素、氨苄西林、克林霉素和万古霉素产生耐药,对头孢噻肟、头孢他啶和多西环素等9种药物高度敏感。【结论】从发病湘华鲮中分离获得的致病菌XHL-01和XHL-02对湘华鲮都具有致病性,可能为此次暴发性死亡的细菌性病原,药物敏感结果可为该病的防控提供指导。

华鲮泌尿系统组织学的初步观察

2004年3月至9月采用常规组织学方法对华鲮泌尿系统作了研究,结果表明:华鲮泌尿系统包括中肾、输尿管、膀胱。中肾由肾小体和肾小管组成,无皮质、髓质之分,有肾小体聚集现象;肾小管可分为颈段、第一近曲小管、第二近曲小管、远曲小管、集合管。肾中散布有大量淋巴髓样组织,还有甲状腺滤泡和斯坦尼氏小体,显然华鲮的肾脏是一个具有多种生理功能的复合器官。输尿管位于两肾叶腹侧,其上皮为假复层,缺黏膜下层,无纵肌,外膜甚薄。左右输尿管在后端合并,稍微扩大,形成膀胱,膀胱内壁具有发达的绒毛,绒毛表面为变移上皮。

湘华鲮肌肉营养成分分析与品质评价

利用常规方法对湘华鲮(Sinilabeo decorus tungting)的肌肉营养成分进行了测定。结果表明:湘华鲮(鲜样)中粗蛋白、粗脂肪、水分和粗灰分的含量分别为20.03%、0.80%、77.43%和1.31%。肌肉中含有17种氨基酸,占肌肉总量的76.52%(干样),其中7种人体必需氨基酸占肌肉总量的36.22%,占氨基酸总量的47.30%。4种鲜味氨基酸占肌肉总量的25.97%(干样),另外还富含钙、铁、锌等矿物质,微量元素比值合理。结果表明湘华鲮有较高的食用与营养价值。

湘华鲮的生物学特征及资源动态研究

为了解湘华鲮(Sinilabeo decorus tungting)资源动态,统计了1961-2005年沅水流域湘华鲮分布水域和年产量数据,2006-2010年实地调查了湘华鲮历史分布区域(湘江、资江、沅江、澧水流域及洞庭湖)的资源现状。结果表明,湖南境内沅水流域湘华鲮产量在1961-1980年保持较高水平,年均产量在160t以上,此后的产量急剧减少;2006-2010年,年均产量仅0.85t。近5年均在资水新邵段发现了湘华鲮,而在湘江、澧水流域和洞庭湖均未发现,目前湘华鲮主要分布于湖南怀化的沅水干流和资水新邵段中。近5年在湖南境内沅水流域仅发现5个小型的自然产卵场。湘华鲮体重(W)与体长(L)关系为:W=0.0439L2.9026(R2=0.9788);年龄组成为1～6龄,以2龄最多,占总数的27.50%;繁殖群体以3龄鱼为主,占总数的57.75%。雌雄比为0.76∶1,性成熟系数(15.72±2.26)%,相对怀卵量(273±28)粒/g,属1年1次产卵类型。湘华鲮栖息在底质为砂石地带、透明度(175±34)cm、溶解氧(8.84±0.55)mg/L、pH值(7.6±0.3)的流水中,已属濒危物种,其致危因素主要为水利电力拦河建坝与违禁捕鱼。

湘华鲮引种驯养及繁育技术研究

2006～2009年,从湖南怀化和邵阳等地共收集野生湘华鲮(Sinilabeo tungting)17批次、共252尾,采用池塘、水泥池流水和江河网箱3种不同方式中进行驯养,成活率分别为26.92%、78.75%和77.50%;电捕、刺网和电击+鹭鸶3种不同捕捞方法收集湘华鲮的驯养成活率分别为93.85%、37.33%和42.55%。将18批次共37尾雌性湘华鲮亲本(其中2批次、5尾为人工驯养亲本)进行人工催产,有19尾产卵,催产率为51.35%,其中人工驯养亲本催产5尾,4尾产卵,催产率为80%。催产共计获卵35.6万粒,受精率为51%～88%,孵化出苗17.68万尾。采用4种催产药物的多种组合进行湘华鲮催产试验,结果表明,LRH-A25μg/kg+HCG1000IU/kg+PG1.5个/kg、LRH-A25μg/kg+HCG1000IU/kg和LRH-A26μg/kg+HCG800IU/kg+DOM3μg/kg3种药物组合的催产效果较好。采用3种不同培育模式进行苗种培育试验,水泥池流水、江河网箱和池塘的培育成活率分别为25.80%、68.40%和21.70%;池塘培育鱼苗特定生长率最高(4.84%)。

湘华鲮一种急性细菌性肠炎的病原分离及组织病理研究

为鉴定人工养殖的湘华鲮出现大量由急性肠炎引起死亡的病原,本研究取病鱼腹水和肠道粘液进行病原菌分离纯化,获得菌株XHL-03。经人工感染试验验证,人工感染的湘华鲮出现与自然发病相同的症状,初步确定其为该病致病菌株。经细菌形态学、生理生化特征、16S r DNA序列分析及系统发育树聚类和血清凝集试验检测,结果显示致病菌株XHL-03为非O1/非O139型霍乱弧菌,其对诺氟沙星、头孢曲松、新霉素等10种药物高度敏感。病理切片显示,感染病原的湘华鲮肝胰脏细胞出现坏死,有急性胰腺炎和肠炎综合症状。本研究为湘华鲮霍乱弧菌引起的急性肠炎的临床诊断和防控提供参考依据。

人工配合饲料养殖华鲮的肌肉营养成分分析

为了给华鲮种质资源的开发利用及人工养殖提供依据,对在池塘投喂配合饲料进行人工养殖的华鲮肌肉营养成分进行测定,结果表明:含肉率为60.65%;肌肉中蛋白质、脂肪和灰分含量分别为19.99%、5.10%、1.51%;肌肉中18种常见氨基酸总含量(占肌肉干重)为75.23%。必需氨基酸含量为33.36%,占氨基酸总量的44.34%;鲜味氨基酸含量为30.07%,占氨基酸总量的37.40%;必需氨基酸与非必需氨基酸含量的比值为0.80;必需氨基酸指数(WHO/FAO标准为参照)为82.34;色氨酸为第1限制性氨基酸,蛋氨酸+胱氨酸为第2限制性氨基酸。

广西东部野鲮亚科鱼类一新种——长鳍异华鲮(英文)

新种长鳍异华鲮Parasinilabeo longiventralis采国中国南部广西省富川县境内珠江水系的一条支流--贺江。新种与异华鲮属(Parasinilabeo)内的其他种的主要区别特征是:口角须长为吻须长的78.3%-90.4%;腹鳍长度为腹鳍起国和臀鳍起国间的距离的83.7%-89.4%;在侧线鳞的后方有一宽的褐色纵条纹;体上有不规则的斑国。

华鲮幼鱼几种养殖相关生物学参数的测定

报道了华鲮幼鱼的耗氧率昼夜变化规律及其对水温、溶解氧的耐受力.结果表明：水温在21.0～24.0℃时,其耗氧率昼夜变化幅度在0.051 1～0.243 4 mg/g·h,平均耗氧率为0.131 4 mg/g·h;其呼吸高峰在2：20、6：20、8：20、19：20、23：20出现,估计与其觅食活动规律有关;测定华鲮幼鱼生存的临界水温上限值为38.0℃、下限值为5.3℃,适宜生长的水温范围13.0～29.0℃;其窒息点溶解氧为0.13 mg/L,0.51 mg/L时出现浮头现象,建议生产中安全溶氧值应在0.73 mg/L以上.

华鲮鳃表面形态结构扫描电镜观察

应用扫描电镜对华鲮Sinilabeor rendahli鳃耙、鳃弓、鳃丝和鳃小片的形态结构进行了观察。鳃耙和鳃弓表面凹凸不平,分布着大量丘突。鳃丝和鳃耙表面有大量粘液细胞分布,鳃丝上皮细胞表面密布微嵴,氯细胞附着在鳃丝表面和鳃小片侧表面。鳃小片薄、表面凹凸不平,垂直排列在鳃丝上。鳃丝和鳃小片的表面形态结构特征有助于提高鱼鳃的气体交换效率。