负性协同刺激分子B7-H1在食管癌中的表达及临床意义

我们通过构建食管癌组织芯片，检测食管癌组织中负性协同刺激分子B7-H1的表达并探讨其临床意义。

协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌的表达及临床意义

目的研究协同刺激分子B7同源体1(B7-H1)和B7-H3在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测59例乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织中B7-H1、B7-H3表达,并分析其与临床特征的相关性。结果乳腺癌组织中B7-H1和B7-H3阳性表达率分别为47.46%和57.63%,均高于癌旁正常组织(P<0.05)。B7-H1表达与B7-H3表达呈正相关(r=0.917,P<0.01)。乳腺癌组织中B7-H1表达与人类表皮生长因子受体2(Her-2/neu)表达相关(P<0.05),与患者预后无明显相关(P>0.05);而B7-H3表达与患者肿瘤分期及预后均密切相关(P<0.05)。B7-H1/B7-H3双阳性患者5年中位生存率小于B7-H1/B7-H3双阴性患者(61.80%vs.90.10%)(P<0.05)。结论 B7-H1和B7-H3过表达在乳腺癌进展中发挥重要作用,对乳腺癌诊断及预后判断可能具有重要价值。

协同刺激分子PD-L1、B7-H3与B7-H4在卵巢癌中的表达及其意义

协同刺激分子PD-L1、B7-H3与B7-H4可与T细胞及其受体结合并抑制T细胞的增殖和过度活化,在细胞免疫应答过程中起重要的调控作用,已被多项研究证明与肿瘤的免疫原性及肿瘤的发生、发展密切相关。这3种分子在正常卵巢组织中均不表达,而在卵巢癌组织中呈不同程度的高表达,它们可能在促进卵巢癌的发生、转变及病情进展过程中起重要作用,研究其作用机制对卵巢癌的早期诊断及靶向治疗有一定的意义。

共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达水平和分布特征

目的:探讨3种共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在人类血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达及分布特征。方法:分别采用RT-PCR、q PCR、Western blot和流式细胞术检测13株血液肿瘤细胞中B7-H1、B7-H3和B7-H4的表达及亚细胞定位情况,设12例志愿者外周血单个核细胞(PB MNC)为对照。结果:3种共刺激分子的mRNA在12例志愿者PB MNC和13株血液肿瘤细胞中广泛表达,其中B7-H4表达水平相对偏低;3种共刺激分子分别在Maver、Z138和HL-60中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1中不表达。3种共刺激分子的胞核及胞浆蛋白仅在恶性血液肿瘤细胞中异常高表达,分别在U937、Z138和Raji细胞中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1细胞中不表达。在同一肿瘤来源的细胞株中,3种共刺激分子的mRNA和胞核及胞浆蛋白表达均存在差异,且差异不全一致。B7-H3膜蛋白在U937、M aver和Z138中表达丰度较高;B7-H1和B7-H4的膜蛋白在13株细胞中呈不表达或低表达。结论:共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在mRNA水平均广泛表达,但蛋白水平仅在血液肿瘤细胞中异常高表达,且亚细胞定位多在胞核及胞浆,膜蛋白水平普遍低表达或不表达。同一肿瘤来源的细胞株中3种共刺激分子的表达可存在差异。

协同共刺激分子B7-H4参与肿瘤免疫逃逸的研究进展

近年来恶性肿瘤的治疗方法虽然取得了较大进展,但5年生存率仍不理想,寻找新的治疗策略和有效的治疗靶点显得尤为迫切。B7家族是近年来研究较广泛的共刺激分子,其中B7-H4是新近发现的B7家族新成员,对T淋巴细胞介导的免疫应答起重要的负性调节作用。

负性协同刺激分子B7-H4在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨负性协同刺激分子B7-H4在原发性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床病理特征间的关系。方法:选取南通大学第三附属医院胸外科2008年1月至2009年4月手术切除并经病理证实的NSCLC标本52例。免疫组织化学法检测NSCLC组织中B7-H4分子的表达及CD3+T细胞浸润程度,分析B7-H4表达水平与NSCLC组织中CD3+T细胞浸润、临床病理特征间的关系。结果:52例NSCLC组织中B7-H4表达阳性率为48.08%(25/52),正常肺组织不表达或较少表达B7-H4,差异具有统计学意义(P<0.05)。B7-H4表达水平与NSCLC临床分期和淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与CD3+T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.05),与其他临床病理参数无关(P>0.05)。结论:负性协同刺激分子B7-H4在NSCLC发病过程中可能起重要的作用,其阳性表达与NSCLC临床分期及淋巴结转移密切相关,B7-H4为NSCLC的诊断及治疗提供参考依据。

共刺激分子配体B7-H1基因真核表达载体和转基因细胞的构建

以PHA刺激的小鼠外周血单核细胞中抽提的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B 7-H 1基因。按常规方法克隆进pEF 6V 5H is A载体,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48 h后进行间接免疫荧光试验,72 h后用B lastic id in进行筛选,挑选出能稳定表达B 7-H 1的细胞株。结果表明:成功地克隆小鼠B 7-H 1基因并构建了用于表达B 7-H 1基因的真核表达载体,经间接免疫荧光试验证明,该基因在CHO细胞中得到表达。经W estern-b lotting检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B 7-H 1基因。

急性脑梗死患者可溶性共刺激分子B7-H3、可溶性细胞间黏附分子-1表达及临床意义

目的 探讨急性脑梗死患者可溶性共刺激分子B7-H3(soluble costimulatory molecule B7-H3,sB7-H3)、可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)表达及临床意义。方法 选取2019年3月至2021年3月南京医科大学附属淮安第一医院收治的伴颈动脉粥样硬化斑块的急性脑梗死患者118例,根据颈部血管超声影像结果 将其分为易损斑块组42例和非易损斑块组76例。采用单因素分析两组患者基本资料和实验室指标,对影响急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块易损性的因素进行logistic回归分析,采用受试者工作特征(receiver operating curve,ROC)曲线分析血清sB7-H3、sICAM-1预测急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化易损性斑块的价值。结果 单因素分析显示,易损斑块组男性占比及纤维蛋白原、同型半胱氨酸、sB7-H3、sICAM-1水平均高于非易损斑块组(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示同型半胱氨酸、sB7-H3、sICAM-1均是影响急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化易损性斑块的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清sB7-H3、sICAM-1预测急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化易损性斑块的最佳截断点分别为21.16 ng/ml,342.50 ng/ml,灵敏度分别为83.33%和80.95%,特异度分别为67.11%和76.32%,ROC曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.806和0.845,二者联合的特异度和AUC分别为96.05%和0.882。结论 急性脑梗死患者血清sB7-H3、sICAM-1表达水平与颈动脉粥样硬化斑块易损性有关,临床检测急性脑梗死患者血清sB7-H3、sICAM-1可以作为预测颈动脉粥样硬化易损性斑块的敏感指标。

共刺激分子B7-H3对食管癌细胞Eca-109生物学特性的影响

背景与目的:食管肿瘤严重威胁着人类健康,认识食管癌的发生、发展机制和寻找治疗方法已经成为遏制肿瘤的研究热点。近年来,作为B7免疫球蛋白超家族的新成员,共刺激分子B7-H3在多种肿瘤中异常高表达,被认为可能是一种新的肿瘤标志物和潜在的治疗靶点。本研究旨在检测食管癌细胞株TE-1、TE-13、Eca-109细胞中B7-H3的表达,并通过靶向干扰B7-H3基因表达来研究B7-H3对食管癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响。方法:运用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测B7-H3分子在食管癌细胞TE-1、TE-13、Eca-109中的表达。通过LipofectamineTM2000体外转染B7-H3 siRNA、control siRNA至食管癌Eca-109细胞,采用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测Eca-109细胞中B7-H3 mRNA和蛋白的表达。采用MTT实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭小室实验检测B7-H3 siRNA对Eca-109细胞增殖能力、平面迁移能力及体外侵袭能力的影响。结果:共刺激分子B7-H3在食管癌细胞TE-1(0.382±0.008)、TE-13(0.399±0.008)、Eca-109(0.428±0.012)中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。转染B7-H3 siRNA后Eca-109细胞B7-H3 mRNA和蛋白表达水平显著低于未转染组(0.128 5±0.000 2 vs 0.540 3±0.001 3,0.421 4±0.004 8 vs 0.492 1±0.014 8,P均<0.05)以及空载体转染组(0.128 5±0.000 2 vs 0.532 4±0.000 7,0.421 4±0.004 8 vs 0.500 6±0.012 9,P均<0.05)。与对照组细胞相比,转染B7-H3 siRNA后Eca-109细胞的平面迁移能力和侵袭力明显下降(P<0.05),然而其增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:食管癌细胞TE-1、TE-13、Eca-109均组成性表达B7-H3分子。沉默B7-H3基因表达能明显抑制Eca-109细胞的体外迁移、侵袭能力,提示B7-H3基因可能参与调节食管癌的侵袭转移能力,为免疫治疗提供潜在的治疗靶点。

协同刺激分子B7-H4与肿瘤微环境的研究进展

协同刺激分子B7-H4是B7家族新成员,具有负性T淋巴细胞免疫调节作用。B7-H4在肿瘤微环境中的表达、调控和功能对肿瘤免疫逃逸起到重要的作用。研究B7-H4在肿瘤微环境的表达及意义,不仅有助于阐明肿瘤免疫逃逸机制,更为肿瘤免疫治疗提供新的靶点和策略。

协同刺激分子B7-H4在恶性肿瘤中的表达意义

协同刺激分子B7-H4是B7家族中的一个新成员,它能通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的产生和细胞周期负性调控T细胞的免疫应答,同时大量表达B7-H4可以促进上皮细胞的恶性转化,保护表皮细胞免于失巢凋亡,在肿瘤的发生、进展和转归中发挥重要作用。研究B7-H4在恶性肿瘤中的表达及意义对于临床诊断具有重要作用,也为新的分子靶点治疗恶性肿瘤提供新的策略。

共刺激分子4-1BBL和B7-1对人T淋巴细胞的协同激发作用

目的 :探讨 4 1BBL和B7 1这 2种共刺激分子在人外周血T淋巴细胞活化、增殖中的作用和机制。方法 :采用免疫磁珠阴性选择方法分离纯化人外周血T淋巴细胞 ;单向混合淋巴细胞反应 (MLR)分析共刺激分子对T细胞的激发作用 ;3H TdR掺入法测定细胞增殖 ;免疫荧光标记和流式细胞仪表型分析 ;ELISA检测细胞因子。结果 :经免疫磁珠阴性选择分离获外周血单个核细胞中的T细胞纯度 >90 %;人多发性骨髓瘤细胞株 (XG细胞 )转染 4 1BBL和B7 1cDNA后 ,细胞膜表面能稳定高表达这 2个分子 ,4 1BBL和B7 1转基因细胞也均能使同种异体T细胞发生活化、增殖、存活时间延长和介导细胞因子IL 2的分泌 ,且 2种共刺激分子具有一定的协同效应。结论 :4 1BBL和B7 1分子具有赋予XG细胞对T细胞的体外激发、促增殖和分泌IL 2的作用 ,4 1BBL和B7 1分子能产生协同效应。

协同刺激分子B7-H3与泌尿系统肿瘤研究进展

B7-CD28家族是重要的协同刺激分子家族之一,B7-H3是新近发现的B7家族分子,既有研究显示其具有共刺激和共抑制双重免疫学效应,在包括泌尿系统肿瘤在内的人体恶性肿瘤中广泛表达,并与肿瘤进展、转移、复发等不良临床病理指标密切相关,泌尿系统肿瘤是人体重要的恶性肿瘤类型,发病率逐年提高。

乳腺癌组织中免疫共刺激分子B7-H1与受体酪氨酸激酶EphA4蛋白的表达及意义

目的探讨乳腺癌组织中免疫共刺激分子B7-H1与受体酪氨酸激酶Eph A4蛋白的表达及意义。方法 82例病理诊断为乳腺癌患者,乳腺癌TNM分期Ⅰ期23例、Ⅱ期38例、Ⅲ期15例、Ⅳ期6例,分析B7-H1、Eph A4蛋白与乳腺癌TNM分期的相关性。以同期良性乳腺病变55例患者为对照,观察B7-H1、Eph A4蛋白的阳性率。结果与乳腺良性病变患者相比,乳腺癌患者B7-H1阳性率高(P<0.05)、Eph A4蛋白阳性率低(P<0.05)。Spearman分析发现B7-H1与TNM分期呈正相关(r=0.4682,P<0.05),Eph A4蛋白与TNM分期呈负相关(r=-0.3402,P<0.05)。结论 B7-H1促进肿瘤细胞免疫逃逸、Eph A4蛋白抑制癌细胞活化增殖能力降低,均参与了乳腺癌病理发展,均可作为乳腺癌诊断和治疗的潜在靶点。

协同刺激分子B7-H3在自发性流产患者中的表达及生物学意义

目的研究可溶性B7-H3(sB7-H3)在正常、妊娠、自发性流产和复发性流产外周血血清中的含量,同时研究B7-H3在正常妊娠行人工流产者(孕3个月内)和自发性流产者(流产后3个月内)的绒毛膜和蜕膜表达情况,探讨协同刺激分子B7-H3在妊娠免疫中的生物学意义。方法利用ELISA的方法分析sB7-H3在正常未孕者、正常妊娠者、自发性流产者、复发性流产者血清含量。收集正常妊娠行人工流产术组的绒毛膜和蜕膜以及自发性流产组的绒毛膜和蜕膜,通过免疫组化的方法,分析B7-H3在不同组织中的表达情况。结果 sB7-H3在正常对照组、妊娠组、自发性流产组、复发性流产组的血清标本的平均含量之间差异有统计学意义(P<0.05)。人工流产组和自发性流产组中B7-H3在绒毛膜的表达差异无统计学意义(P>0.05);在蜕膜上的表达人工流产组明显高于自发性流产组(P<0.05);B7-H3在绒毛膜局部表达,在蜕膜组织各处均有表达。结论 B7-H3参与了妊娠免疫,并与自发性流产的发生相关。

膀胱癌来源外泌体携带程序性死亡配体1和共刺激分子B7-H4的表达及初步鉴定

目的提取并鉴定膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体,检测膀胱癌细胞来源外泌体中程序性死亡配体1(PD-L1)和共刺激分子B7-H4的表达,验证膀胱肿瘤通过外泌体在微环境中传递PD-L1和B7-H4。方法体外培养膀胱尿路上皮癌BIU-87和T24细胞,超速离心法提取细胞上清液中外泌体,透射电子显微镜(TEM)观察外泌体大小及形态,BCA蛋白定量法测定外泌体蛋白浓度,蛋白质印迹法(WB)鉴定两种膀胱癌细胞的外泌体标志蛋白CD63和CD9,检测膀胱癌细胞来源外泌体PD-L1(exo-PD-L1)和外泌体B7-H4(exo-B7-H4)的表达。最后,将膀胱癌细胞外泌体分别与膀胱正常上皮SV-HUC-1细胞共培养48h后,RT-PCR和WB分别检测SV-HUC-1细胞中PD-L1和B7-H4的mRNA和蛋白的表达情况。结果 BIU-87和T24细胞上清外泌体总蛋白浓度分别为1.88μg/μL和1.84μg/μL,总质量分别为169μg和166μg。TEM观察外泌体直径为30~150nm的膜性囊泡,呈典型的"杯盘"形态。两种膀胱癌细胞上清液均检测出外泌体标志蛋白CD63及CD9。且两种膀胱癌细胞来源的外泌体中均携带PD-L1和B7-H4。当膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体分别与SV-HUC-1细胞共培养后,后者PD-L1和B7-H4的mRNA表达阴性,两者蛋白表达阳性。结论成功提取并鉴定了膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体均携带PD-L1和B7-H4,且膀胱癌细胞释放的外泌体能在肿瘤微环境中传递PD-L1和B7-H4,可开展后续膀胱癌来源exo-PD-L1和exo-B7-H4的生物学功能研究。

血常规衍生炎症指标及协同刺激分子B7家族在系统性红斑狼疮患者中的变化

目的:探究血常规衍生炎症指标及协同刺激分子B7家族在系统性红斑狼疮患者中的表达。方法:选取2019年6月—2022年10月当阳市人民医院收治的164例系统性红斑狼疮患者及在本院体检的健康志愿者41例。系统性红斑狼疮疾病活动度指数(SLEDAI)评分≥15分患者为A组(n=41),SLEDAI评分10~14分患者为B组(n=41),SLEDAI评分5~9分患者为C组(n=41),SLEDAI评分0~4分患者为D组(n=41),体检健康者为E组(n=41)。比较五组的血常规衍生炎症指标[中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞和单核细胞之和/淋巴细胞比值(NMLR)及衍生的中性粒细胞/淋巴细胞比值(dNLR)]及协同刺激分子B7家族,采用Pearson相关性分析血常规衍生炎症指标与协同刺激分子B7家族的关系。结果:A组、B组、C组及D组的血常规衍生炎症指标均显著高于E组,A组、B组及C组均显著高于D组,A组及B组均显著高于C组,A组均显著高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组、B组、C组及D组的协同刺激分子B7家族均显著低于E组,A组、B组及C组均显著均低于D组,A组及B组均显著低于C组,A组均显著低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,系统性红斑狼疮患者NLR、PLR、NMLR、dNLR与协同刺激分子B7家族3(B7-H3)、协同刺激分子B7家族4(B7-H4)均呈负相关(P<0.05)。结论:血常规衍生炎症指标及协同刺激分子B7家族在系统性红斑狼疮患者中的表达显著异常,且上述指标之间有密切的关系。

探讨外周血血清协同刺激分子B7家族、白介素-8、可溶性细胞间黏附分子-1对重症急性胰腺炎发生MODS的预测价值

目的:回顾性分析重症急性胰腺炎(SAP)患者外周血血清协同刺激分子B7家族(B7-H3)、白介素-8(IL-8)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)变化,探讨其对SAP患者发生多器官功能障碍综合征(MODS)的预测价值。方法:选取SAP患者32例,根据是否发生MODS分为MODS组20例、非MODS组12例,同时选取20名健康体检者作为对照组,MODS组予以器官支持疗法,非MODS组予以常规方案治疗,分别抽取第1、2、3、5日外周血,监测并统计B7-H3、IL-8、sICAM-1水平。结果:SAP患者外周血B7-H3、IL-8、sICAM-1含量均高于对照组(P<0.05),但MODS组更高。随着治疗的深入、病情的好转,相关指标均逐渐下降。结论:B7-H3、IL-8、sICAM-1对SAP患者早期预测MODS具有一定价值。

协同刺激分子B7-H4在小鼠食管癌前病变中的表达

目的:研究协同刺激分子B7同系物4(B7-H4)在小鼠食管癌前病变中的表达变化,探讨其在食管鳞状细胞癌发生中的作用。方法:133只C57BL/6小鼠,分为对照组42只和诱癌组91只。诱癌组小鼠采用饮水法给予50μg/mL 4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)15周,诱导小鼠食管癌前病变。通过苏木素-伊红(HE)染色法评价食管组织病理变化;免疫组化和Western blot检测B7-H4蛋白在食管组织中的表达,Western blot检测B7-H4蛋白在小鼠血清中的表达。结果:从16~28周,4NQO诱癌组小鼠食管组织出现肉眼可见的增厚、凸起、肿块等病理改变。HE染色结果显示,小鼠食管组织癌前病变级别与诱癌时间呈正相关(r=0.55,P<0.01)。另外,B7-H4在食管组织的表达水平与食管癌前病变级别呈正相关(r=0.57,P<0.01)。与对照组相比,第26周和第28周诱癌组小鼠食管组织B7-H4蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。与正常小鼠相比,高级别上皮内瘤变小鼠血清B7-H4蛋白浓度显著升高(P<0.05)。结论:小鼠食管癌前病变进程中,B7-H4蛋白在血清和食管组织中表达上调,B7-H4可能参与了食管癌前病变的进程。

协同刺激分子B7-H4在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌位于盆腔,由于缺乏早期临床症状及有效的诊断方法,大约70%的患者就诊时已属于晚期,其5年存活率不足30%[1,2],若能早期诊断,其5年存活率将增加至80%[2]。