消水散对人胃癌小鼠腹膜移植模型B7/CD28/CTLA-4协同刺激通路及腹水微环境的影响

目的 研究消水散对人胃癌小鼠腹膜移植模型B7/CD28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)协同刺激通路及腹水微环境的影响。方法 2019年4月至2020年5月,在湖南省中医药研究院动物中心实验室,采用腹腔注射人胃癌细胞MGC803建立人胃癌小鼠腹膜移植模型,共分为模型组、消水散低、中、高剂量组,另取正常小鼠为对照组,每组10只。通过行为学观察及测定血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)含量评估模型质量,影像学方法评估恶性腹水情况,流式细胞仪及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测B7-1、B7-2、CD28及CTLA-4表达量及其mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹膜组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果 正常小鼠的阳虚症状积分为(0.00±0.00)分,血清ACTH水平为(103.46±10.13)ng/L、CORT水平为(81.34±9.21)μg/L、T3含量为(178.52±15.86)ng/L、T4含量为(213.59±16.97)μg/L和TSH含量为(10.84±1.15)mIU/mL。与对照组相比,模型小鼠阳虚症状积分[(7.84±1.59)分]显著增加(P<0.05),血清ACTH[(71.09±6.42)ng/L]、CORT[(43.42±7.14)μg/L]、T3[(103.77±13.24)ng/L]、T4[(127.64±13.25)μg/L]、TSH含量[(8.14±1.02)mIU/mL]显著降低(P<0.05)。模型组小鼠的腹水量为(5.18±0.46)mL、瘤体积为(1.23±0.12)cm3、瘤重为(1.73±0.15)g、B7-1 mRNA水平为(1.06±0.10)、B7-2 mRNA水平为(1.04±0.11)、CD28 mRNA水平为(0.97±0.08)、CTLA-4 mRNA水平为(1.03±0.09)、TGF-β1含量为[(181.73±15.26)pg/g]和IL-10水平为[(68.74±6.03)pg/g]。与模型组相比,消水散低、中、高剂量组小鼠的腹水量[(4.03±0.41)、(3.24±0.25)、(2.33±0.27)mL]、瘤体积[(0.93±0.09)、(0.49±0.05)、(0.16±0.02)cm3]、瘤重[(1.42±0.13)、(0.79±0.11)、(0.27±0.08)g]、CTLA-4 mRNA水平[(0.83±0.07)、(0.42±0.05)、(0.16±0.02)]、TGF-β1[(152.69±12.39)、(131.45±11.68)、(107.26±10.52)pg/g]、IL-10[(51.65±5.38)、(34.28±2.73)、(27.13±2.64)pg/g]表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05),B7-1[(2.13±0.22)、(4.56±0.51)、(7.29±0.68)]、B7-2[(1.95±0.14)、(4.32±0.41)、(6.83±0.63)]、CD28[(2.02±0.15)、(3.94±0.28)、(7.11±0.84)]mRNA水平逐渐增加(P<0.05)。结论 消水散可抗人胃癌移植瘤恶性腹水作用,可能与抑制CTLA-4表达,促进T细胞激活,改善机体免疫抑制及腹腔免疫微环境有关。

OX40/OX40L协同刺激通路在支气管哮喘中的作用

支气管哮喘(简称哮喘)是一种由T细胞介导的慢性气道炎症性疾病。T细胞活化需要两个不可或缺的刺激信号,即识别信号和协同刺激信号。OX40/OX40配体(OX40L)是T细胞激活通路中一对重要的协同刺激分子,参与T细胞的活化、增殖、迁移以及记忆性T细胞的形成,在哮喘的发生和发展过程中起重要作用。以OX40/OX40L信号通路作为靶点,有望为哮喘免疫治疗开辟新的途径。

消水散对人肠癌小鼠腹腔移植模型B7/CD28/CTLA-4协同刺激通路及腹水微环境的影响

目的:研究消水散对人肠癌小鼠腹腔移植模型B7/CD28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)协同刺激通路及腹水微环境的影响。方法:采用腹腔注射人肠癌细胞株HCT116细胞建立人肠癌小鼠腹腔移植模型,分为模型组,消水散低、中、高剂量组,另设正常小鼠为对照组,每组各10只。观察阳虚症状积分,血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)含量,腹水量,瘤体积,瘤重,B7-1、B7-2、CD28、CTLA-4表达量及其mRNA表达水平,腹膜组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果:与正常组比较,模型组阳虚症状积分显著增加(P<0.01),ACTH、CORT、T3、T4、TSH含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,消水散呈剂量依赖性降低小鼠腹水量、瘤体积、瘤重、CTLA-4水平、TGF-β1、IL-10表达水平(P<0.05),增加B7-1、B7-2、CD28水平(P<0.05)。结论:消水散具有抗人肠癌移植瘤恶性腹水作用,这可能与抑制CTLA-4表达,促进T细胞激活,改善机体免疫抑制及腹腔免疫微环境有关。

口腔扁平苔藓的特异性免疫机制研究进展

口腔扁平苔藓的发生与机体的免疫机制密切相关,特异性免疫机制尤为重要。特异性免疫主要是指基底角质细胞表达相关抗原和CD8+细胞毒性T细胞杀伤抗原特异性角质细胞,并在过程中释放相应的细胞因子引起黏膜的损伤。本文综述了口腔扁平苔藓与特异性免疫机制之间的关系,展示其研究现状和前景。

布地奈德抑制哮喘小鼠肺组织OX40、气道炎症和气道高反应性的研究

目的:研究布地奈德对哮喘模型小鼠肺组织OX40(CD134)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用。方法:18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组。卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24 h后,测定气道反应性,HE染色观察炎症细胞浸润,ELISA法分别检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的IL-4和IL-13。Western blot检测肺组织OX40蛋白表达。结果:随着氯化乙酰胆碱(Ach)浓度的增加,哮喘组小鼠气道阻力明显增加,正常组仅轻度增加,布地奈德组小鼠气道阻力的增加程度低于哮喘组小鼠(P<0.05);在BALF中炎症细胞总数和嗜酸性粒细胞分类计数方面,哮喘组小鼠高于正常组小鼠(P<0.05),布地奈德组小鼠与哮喘组小鼠相比明显降低(P<0.05);在BALF中IL-4、IL-13和血清总IgE、OVA-sIgE方面,哮喘组高于正常组(P<0.05),布地奈德组低于哮喘组小鼠(P<0.05);哮喘组小鼠肺组织OX40高于正常组(P<0.05),布地奈德组与哮喘组相比小鼠肺组织OX40降低(P<0.05)。结论:布地奈德可抑制哮喘模型小鼠气道炎症和气道高反应性,可能与抑制OX40/OX40L协同刺激通路有关。

协同刺激分子调节机制在移植免疫耐受中的应用研究

目前,很多器官移植的实验研究集中在利用协同刺激分子通路的免疫调节机制来诱导免疫耐受,不少实验达到了良好的耐受效果。这些协同刺激分子的单克隆抗体、融合蛋白和它们的转基因修饰的细胞或组织所诱导的移植免疫耐受具有简便经济实用的独特优势,在将来一定会有巨大的临床应用价值和前景。本文就这些通路的研究成果和进展作一回顾和总结,以便更好地应用于器官移植的科研和临床。