电凝法与线栓法制备大脑中动脉缺血模型在脑卒中后中枢痛研究中的应用对比

目的采用电凝法与线栓法分别造成小鼠大脑中动脉缺血,建立脑卒中后中枢痛(central post-stroke pain,CPSP)模型,探究更贴近临床的造模方法。方法选择6~8周龄(20~25g)健康雄性C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组(Naive组)、电凝组(dMCAO组)和线栓组(tMCAO组),进行不同造模处理。在造模后行Longa神经功能缺陷评分,利用TTC染色评估大脑梗死体积,通过机械性缩足阈值和热缩足潜伏期评估小鼠的疼痛状态,旷场实验评估小鼠的运动功能。结果与Naive组相比,电凝组和线栓组小鼠造模后神经功能缺陷评分均升高(均P<0.01),TTC染色可观察到不同程度的脑缺血(P<0.05,P<0.01);与Naive组相比,电凝组和线栓组在造模后的第7、14、21、28天均表现出机械性痛觉超敏和热痛觉过敏,两组差异无统计学意义;与Naive组相比,电凝组小鼠在造模后第29天的运动功能无显著差异,而线栓组小鼠的运动功能下降(P<0.01)。结论电凝法和线栓法均可诱发脑卒中后中枢痛,但电凝法更贴近CPSP的临床表征,更具复制意义。

普瑞巴林联合小剂量奥氮平对卒中后中枢痛的临床观察

目的观察普瑞巴林联合小剂量奥氮平对卒中后中枢痛的疗效。方法选取60例符合卒中后中枢痛病人,根据就诊顺序分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组给予普瑞巴林联合小剂量奥氮平,对照组给予普瑞巴林治疗,疗程4周,评估病人对疼痛缓解程度,以及睡眠改善情况,对日常生活能力改善情况。结果治疗后治疗组以及对照组对卒中后中枢痛均有不同程度缓解,两组治疗后VAS评分分别为(2.21±1.80)分与(3.10±2.38)分,均较治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),且治疗后组间比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组对睡眠改善以及日常生活能力方面改善较治疗前差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组治疗后PSQI评分优于对照组[(5.92±4.44)分与(7.00±3.42)分,P<0.05]。结论普瑞巴林联合小剂量奥氮平对卒中后中枢痛疗效优于单用普瑞巴林治疗,提示联合用药可以改善病人预后。

金黄散联合TDP照射治疗脑卒中后中枢痛20例

脑卒中后中枢痛（central post-stroke pain,CPSP）是神经内科的常见病症,西药多采用抗癫痫、抗抑郁治疗,但疗效不佳,副作用大。我科采用中药金黄散外敷联合TDP照射治疗CPSP能明显缓解患肢疼痛,收到较好临床效果。

卒中后中枢痛的研究进展

卒中后中枢痛是卒中后发生的中枢性神经病理性疼痛综合征,主要表现为与脑损伤区域相对应的躯体部位的疼痛与感觉异常。目前由于临床对卒中后中枢痛缺乏重视,致使患者长期遭受疼痛困扰,严重影响生活质量。为更全面了解卒中后中枢痛,本文对其流行病学、临床特点、病理生理及治疗进展等进行综述。

基于TLR4/NF-κB信号通路研究右美托咪定对脑卒中后中枢痛大鼠的镇痛机制

目的观察腹腔注射右美托咪定通过TLR4/NF-κB信号通路对脑卒中后中枢痛(CPSP)大鼠的镇痛作用。方法90只SD大鼠随机选取30只为假手术组,剩余60只进行丘脑腹后外侧核(VPL)注射Ⅳ型胶原酶造模,造模后3 d测定热缩足反射潜伏期(TWL),采用随机数字表法将TWL降低的大鼠分为模型组和干预组,每组30只。干预组连续7 d腹腔注射右美托咪定50μg/kg,模型组注射等量的生理盐水。于造模前1 d(T_(0))、造模后10 d(T_(1))、造模后17 d(T_(2))、造模后31 d(T_(3)),测定大鼠TWL;在T_(3)时采用Western blot检测VPL中蛋白表达;免疫荧光观察VPL小胶质细胞及神经元的变化;酶联免疫吸附试验检测VPL中炎症介质的释放水平。结果模型组、干预组T_(1)~T_(3)时TWL低于T_(0)时,T_(2)~T_(3)时TWL低于T_(1)时,T_(3)时TWL低于T_(2)时(P<0.05);模型组T_(1)~T_(3)时TWL值低于假手术组,干预组T_(1)~T_(3)时TWL高于假模型组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组VPL中TLR4及pNF-κB的表达升高(P<0.05);与模型组比较,干预组VPL中TLR4及pNF-κB的表达降低(P<0.05);三组VPL中NF-κB表达差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组VPL神经元数量均减少(P<0.05);与模型组比较,干预组VPL神经元数量差异无统计学意义(P>0.05)。模型组VPL中Iba-1及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β和IL-6水平较假手术升高(P<0.05),干预组VPL中Iba-1及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平较模型组降低(P<0.05)。结论右美托咪定可能通过TLR4/NF-κB信号通路抑制小胶质细胞增殖活化及神经炎症进展治疗CPSP。

卒中后中枢痛胶质细胞的作用和分子机制

中枢性卒中后疼痛(central post stroke pain,CPSP)是一种脑血管意外后的慢性神经性疼痛综合征[1],多在出血或缺血性脑卒中后6个月出现,CPSP约占卒中患者发病率的1%~14%[2],由相应的缺血或出血性病变影响脊髓丘脑通路而引起的神经性疼痛综合征[3],发病机制尚不清楚。其临床特征通常表现为感觉障碍、持续性或间歇性疼痛以及痛觉过敏、超敏,且缺乏有效治疗手段[4]。

阿米替林治疗脑卒中后中枢痛的疗效和耐受性分析

目的 观察阿米替林治疗脑卒中后中枢痛的效果和不良反应,分析其耐受性。方法 入组90例2014年1月～2015年1月在我院治疗的脑卒中患者,所有患者疼痛持续时间均超过3个月,随机分为观察组（n=45）和对照组（n=45）。观察组患者给予阿米替林25mg（2次/d）,对照组患者给予复合维生素B片3片（3次/d）,疗程4周。所有患者治疗前和治疗后3d、1周、2周、4周分别进行视觉模拟评分（VAS）和疼痛缓解度（PAR）测定,比较两组患者治疗前后VAS评分、疼痛缓解总有效率和不良反应耐受情况。结果 两组患者治疗后第4周VAS评分均较治疗前显著降低（P均〈0.05）;观察组患者治疗后1周、2周、4周VAS评分较对照组显著降低（P〈0.05）;观察组患者第4周疼痛总缓解率为84.4%,显著高于对照组第4周疼痛总缓解率35.6%（P〈0.05）;观察组不良反应主要为头晕、口干和视物模糊,对症治疗后,不良症状均可快速缓解。结论 阿米替林治疗脑卒中后中枢痛疗效显著,耐受性良好。

如意珍宝丸干预卒中后中枢痛小鼠痛觉过敏及脊髓中枢敏化的药效特点及神经炎症机制

目的:明确如意珍宝丸(RYZBW)干预卒中后中枢痛(CPSP)小鼠痛觉过敏及脊髓中枢敏化的药效特点及神经炎症机制。方法:SPF级雄性8周龄ICR小鼠,分为假手术组(Sham)、模型组(CPSP)、如意珍宝丸低(RYZBW-L)、中(RYZBW-M)、高(RYZBW-H)剂量组和普瑞巴林组(PGB)。在第1天进行丘脑腹后外侧核Ⅳ型胶原酶注射以构建CPSP模型。第14~17天进行灌胃给药,其中Sham及CPSP给予等体积生理盐水,RYZBW-L/M/H组给予0.303、0.607、1.214 g·kg^(-1)如意珍宝丸,PGB给予0.046 g·kg^(-1)普瑞巴林;分别于第0、3、4、7、10、14、17天进行机械痛敏检测,第18天取脊髓L5段采用免疫炎症芯片检测炎症因子、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测CXC型趋化因子配体16(CXCL16)、免疫组化法检测降钙素基因相关肽(cGRP)、荧光双标分析CXCL16、树突状细胞标记物CD11c、巨噬细胞标记物CD68、小胶质细胞标记物TMEM119、内皮细胞标记物CD31、CXCR6及T细胞标记物CD3的表达情况。结果:与Sham组比较,CPSP组在第3~17天的机械痛阈值显著低于Sham组,具有稳定的痛觉过敏症状。第7天PGB组的机械痛阈值显著高于CPSP组,具有明显镇痛效果(P<0.01)。第10~17天,RYZBW-H组的机械痛阈值明显高于CPSP组,展现出稳定的镇痛效果(P<0.05)。第17天,如意珍宝丸的镇痛效果呈量效相关(R^(2)=0.3037);第4~17天,RYZBW-H组机械痛阈值与时间正相关(R^(2)=0.1115),上述结果提示RYZBW的镇痛呈时效相关。第17天CPSP小鼠脊髓背角内中枢敏化标志物cGRP表达量相比于Sham组明显增加(P<0.05),RYZBW以剂量依赖的方式将其下调(R^(2)=0.5008),提示如意珍宝丸显著抑制CPSP导致的脊髓中枢敏化。第17天的脊髓炎症芯片结果显示,与CPSP组比较,RYZBW-H组抑制CXCL16表达(P<0.01)。基于独立重复样品的ELISA结果表明,如意珍宝丸对CXCL16的蛋白脊髓表达的抑制呈剂量依赖性(R^(2)=0.2504);免疫荧光双标结果显示,与Sham组比较,CPSP组CD11c阳性的树突细胞内CXCL16表达量增加,CD68阳性细胞数量增加(P<0.05),与CPSP组比较,RYZBW将其下调:CD31阳性的内皮细胞、CD68阳性的巨噬细胞、TMEM119阳性的小胶质细胞内,CXCL16表达量均增加,TMEM119阳性的小胶质细胞细数量、胞体面积均显著增加(P<0.05);CD3阳性的T细胞数量(P<0.05)及其中CXCR6表达量增加。如意珍宝丸以剂量依赖性抑制内皮细胞、巨噬细胞的激活,减少小胶质细胞、T细胞浸润(R^(2)=0.6914,R^(2)=0.5515,R^(2)=0.6532,R^(2)=0.1806,R^(2)=0.2875,R^(2)=0.2986,R^(2)=0.5116)。结论:RYZBW可有效缓解CPSP小鼠卒中后中枢痛痛觉过敏及脊髓中枢敏化,其机制与调控CXCL16-CXCR6配体-受体、抑制小胶质细胞及巨噬细胞浸润及激活、树突状细胞、内皮细胞及T细胞活化有关。

脑卒中后中枢痛的临床研究

目的探讨脑卒中后中枢痛(CPSP)的临床特点并观察黛力新的治疗效果。方法回顾性分析15例脑卒中后中枢痛患者的临床资料。结果CPSP均伴有躯体感觉异常,疼痛的部位基本上与感觉异常的分布一致,疼痛性质不具有特征性,患者之间的变异很大,疼痛的强度变化范围很大,均有不同程度的感觉减退。黛力新治疗后4周视觉模拟评分比治疗前降低。结论沿着轴索影响脊髓-丘脑-皮层通络的任何水平的病变都会引起CPSP,黛力新治疗有效。

如意珍宝丸干预出血性脑卒中小鼠继发性脑损伤及中枢痛的作用及免疫炎症机制

目的:评价如意珍宝丸(RYZBW)对出血性脑卒中小鼠继发性脑损伤及中枢痛的干预效果,并从神经炎症角度探索其修复神经-血管单元的药理机制。方法:以Ⅳ型胶原酶丘脑腹后外侧核区显微注射的方式构建小鼠卒中后中枢痛(CPSP)模型,构建当天记为D1并分为假手术组(Sham)、模型组(CPSP)、如意珍宝丸低(RYZBW-L)、中(RYZBW-M)、高(RYZBW-H)剂量组和普瑞巴林(PGB)组。模型构建后第4天(D4),进行2次/d的灌胃给药。Sham及CPSP给予等体积生理盐水,RYZBWL、RYZBW-M、RYZBW-H组给予1.214、1.821、2.428 g·kg^(-1)如意珍宝丸,PGB组给予0.046 g·kg^(-1)普瑞巴林;分别于建立模型前1 d(D0)、建立模型后第3天(D3)及D4第1次灌胃给药后检测机械痛敏,D1及D4第2次灌胃给药后评价神经损伤。D4取外周血进行血常规检测,取丘脑进行免疫炎症芯片分析。在独立样品中,以免疫荧光双标染色及酶联免疫吸附测定法(ELISA)、蛋白免疫印迹法(Western blot)对相关免疫炎症因子-受体-细胞定位进行定量分析。结果:与Sham组比较,CPSP小鼠具有显著的继发性神经损伤,卒中后中枢痛行为(P<0.05,P<0.01),外周血红细胞分布宽度(RDW)明显增高(P<0.05),血红蛋白浓度(HGB)明显下降(P<0.05)。炎症芯片结果显示,与Sham组比较,CPSP组CC趋化因子配体2(CCL2)明显增加(P<0.05),而CX3C趋化因子配体1(CX3CL1)明显降低(P<0.05),上述结果在ELISA及免疫荧光统计中被证实。Western blot结果显示,与Sham组比较,CPSP组CX3CL1受体CX3CR1的蛋白表达量显著降低(P<0.01)。免疫荧光双标染色结果显示,与Sham组比较,CPSP组Ly6C+CX3CR1+标记的非典型单核细胞数量无显著变化,CX3CR1-Ly6C+标记的典型单核细胞的数量显著增加(P<0.01),CX3CR1在小胶质细胞内表达显著增加(P<0.01)。与CPSP组比较,RYZBW剂量依赖性地改善神经损伤(R^(2)=0.3679)及中枢痛症状(R^(2)=0.5019);RYZBW-H明显改善外周血RDW及HGB(P<0.05);免疫炎症芯片及ELISA结果显示,RYZBW-H显著抑制CCL2表达(P<0.01)并提高CX3CL1表达(P<0.05)。Western blot实验结果显示RYZBW-L/H组明显提高CX3CR1蛋白表达(P<0.05)。免疫荧光双标染色结果显示,与CPSP组比较,RYZBW剂量依赖性地升高CX3CR1总体表达量(R^(2)=0.6196),抑制小胶质细胞上CX3CR1表达,降低小胶质细胞数量(R^(2)=0.4945)及胞体面积(R^(2)=0.5717)。同时,RYZBW剂量依赖性地增加CX3CR1+Ly6C+(R^(2)=0.6353)的非典型核细胞浸润,并有效抑制Ly6C+CX3CR1-(R^(2)=0.4836)的典型单核细胞浸润。结论:RYZBW可有效缓解CPSP小鼠继发性损伤及中枢痛,其机制与调控CX3CL1-CX3CR1轴、抑制小胶质细胞浸润及激活、促进血管修复性的非典型单核细胞浸润并抑制炎症吞噬性的典型单核细胞浸润有关。

脑卒中后疼痛的诊疗进展

约有70%的脑卒中患者每天忍受着疼痛,疼痛的持续存在不仅使患者无法有效配合功能康复训练,还严重影响着患者的生活质量。文章对脑卒中后疼痛(post⁃stroke pain,PSP)的常见类型、流行病学、发病机制进行简述,并对各类型PSP[卒中后肩痛(post⁃stroke shoulder pain,PSSP)、卒中后中枢痛(central post⁃stroke pain,CPSP)、痉挛性疼痛、复杂性区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)和卒中后头痛]的诊断及治疗等方面进展进行综述。使临床医务工作者能更有效识别和治疗PSP。

如意珍宝丸对小鼠丘脑出血后中枢痛的干预作用

目的:观察如意珍宝丸(RYZBW)对小鼠丘脑卒中后中枢痛的干预作用,并初步探索其作用机制。方法:利用Ⅳ型胶原酶立体定位注射小鼠下丘脑诱导小鼠卒中后中枢疼痛(CPSP)模型,将小鼠分为假手术组、模型组、RYZBW低、中、高(0.65、1.3、2.6 g·kg^(-1))剂量组和阳性药普瑞巴林组(0.075 g·kg^(-1))。给药组造模小鼠术后7 d开始按照体质量每天1次灌胃给药,共给药25 d,假手术组及模型组小鼠给予等体积生理盐水;期间检测不同时间点的机械痛敏、冷痛敏,原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡状态,液相悬浮芯片技术对36种经典广谱炎症因子进行定量分析,筛选差异分子,并采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)对其验证。结果:与假手术组比较,模型组机械痛阈值、冷敏痛阈值显著改变(P<0.01),TUNEL结果反映脑细胞凋亡明显,Western blot和ELISA结果显示下丘脑组织和血清中白细胞介素^(-1)α(IL^(-1)α)和趋化因子配体5(CCL5)表达增加,而促血管生成素-2(Ang-2)、粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)和IL-4的表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,RYZBW各剂量组可显著升高脑卒中后小鼠的机械痛阈值,降低冷敏痛阈值,降低下丘脑细胞凋亡比例(P<0.01),下丘脑组织和/血清中IL^(-1)α和CCL5表达降低,而Ang-2、G-CSF、IL-4的表达均明显升高(P<0.05)。结论:RYZBW可缓解CPSP小鼠的痛觉过敏,其机制与调节促炎/抗炎因子IL^(-1)α、CCL5、IL-4、G-CSF和Ang-2的表达有关。