固相萃取-气相色谱-质谱法测定利多卡因代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺的血药浓度

建立了固相萃取-气相色谱-质谱（GC-MS）测定利多卡因代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺（MEGX）血药浓度的方法。血清中的MEGX采用固相萃取小柱萃取、GC-MS测定。色谱条件为：HP-5MS毛细管柱（15m×0.25mm×0.1μm）,初始柱温100℃,保持1min后以40℃/min速率升温至200℃,保持0.5min;进样口温度250℃;分流进样,分流比1∶1,进样量2μL;载气为氦气,流量为1.0mL/min。质谱条件为：离子源温度230℃,电子轰击电离,电子能量70eV,选择离子检测（m/z58（MEGX）、m/z86（普鲁卡因,内标））。结果表明,MEGX在血清中的浓度在1.562～25ng/mL范围内的线性关系良好,相关系数0.9981,最低检测限为0.5ng/mL,不同浓度MEGX的萃取回收率在80.1%～85.7%之间。实验证明该方法快速、准确,选择性好,灵敏度高,适合用于血清中微量MEGX的测定。

高效毛细管电泳法测定利多卡因代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺

目的 :建立一种测定利多卡因代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺 (MEGX)含量的高效毛细管电泳法。方法 :用50mmol/L硼酸缓冲液 (pH =8.8)为电泳电解液 ,电压 1 2kV ,运行电流 1 8.8～ 2 3 .2 μA ,检测波长 2 1 4nm ,有效毛细管长度 50cm ,管径 50 μm ,氨茶碱为内标 ,展开 1 2min。 8只昆明种小白鼠腹腔注射 0 .2 %利多卡因 4 0mg/kg ,用本法测定其 5h尿液中MEGX累积排泄量。结果 :MEGX迁移时间 7.8min ,氨茶碱迁移时间 1 0 .7min。MEGX含量为 0 .0 62～1 .0mg/ml时 ,其浓度与色谱峰面积线性关系良好 ,r =0 .9991 ,日内、日间变异系数均小于 7.8% ,回收率为98.4 %～ 1 0 1 .6% ,常用 3 0种药物对其无干扰。 8只小鼠MEGX累积排泄量为 ( 2 95.2± 55.2 ) μg ,其中游离型MEGX为 4 4.7% ,结合型为 55.3 %。结论 :该方法简单、快速、灵敏 ,特异性和重现性良好 ,具有较强实用价值。

单乙基甘氨酰二甲苯胺用于检测肝脏储备功能

利多卡因代谢试验———单乙基甘氨酰二甲苯胺 (monoethylglycinexylidide,MEGX)的检测 ,是近年来开展的一种用于检测肝脏储备功能的较好方法 ,因其准确快捷的特点 ,在国外已被应用于临床肝脏外科及肝移植领域。本文综述国内外文献 ,介绍利多卡因的代谢过程、试验方法。

二甲双胍改善由C9ORF72肌萎缩侧索硬化/额颞叶痴呆相关多聚甘氨酸-精氨酸诱导的线粒体损伤

目的·探索C9ORF72肌萎缩侧索硬化/额颞叶痴呆(amyotrophic lateral sclerosis/frontotemporal dementia,ALS/FTD)相关的多聚甘氨酸-精氨酸(poly-glycine-arginine,poly-GR)对线粒体形态及功能的影响,并分析二甲双胍对由poly-GR诱导的线粒体损伤的修复作用及其可能的机制。方法·采用慢病毒感染法分别构建能够稳定表达50个重复甘氨酸-精氨酸序列[(glycine-arginine)50,(GR)_(50)]和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的SK-N-SH细胞,即(GR)_(50)-SK细胞株和GFP CTRL-SK细胞株。采用蛋白质印迹法(Western blotting)验证已构建细胞中(GR)_(50)蛋白的表达水平,并采用荧光显微镜观察GFP CTRL-SK细胞的GFP表达。采用碘化丙啶(propidium iodine,PI)染色分别检测(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的凋亡水平。利用免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色分析(GR)_(50)蛋白在细胞内的定位情况。采用超氧化物指示剂MitoSOX Red分别对(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的氧自由基进行染色,并利用荧光显微镜观察红色荧光强度以评估线粒体活性氧水平的变化。采用透射电镜分别观察(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的线粒体形态。采用Western blotting检测(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)及其磷酸化水平。利用SC79激活(GR)_(50)-SK细胞中的AKT,并采用MitoSOX Red染色及PI染色实验分析AKT磷酸化后细胞的线粒体活性氧水平及凋亡水平。利用二甲双胍处理(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞,随后通过上述方法以及ATP检测试剂盒检测细胞的凋亡水平、线粒体活性氧水平、线粒体形态、AKT及其磷酸化水平、ATP浓度情况。结果·Western blotting结果提示(GR)_(50)-SK细胞构建成功,荧光显微镜的观察结果显示GFP CTRL-SK细胞构建成功。PI染色结果显示,(GR)_(50)-SK细胞较GFP CTRL-SK细胞的凋亡水平更高(P=0.016)。IF结果提示,(GR)_(50)-SK细胞中(GR)_(50)蛋白与线粒体存在部分共定位。与GFP CTRL-SK细胞相比,(GR)_(50)-SK细胞的线粒体形态及结构存在明显异常,其活性氧水平明显上升。(GR)_(50)-SK细胞中的AKT水平与GFP CTRL-SK细胞相仿,但磷酸化AKT水平显著下降。SC79处理(GR)_(50)-SK细胞后,可显著上调其AKT磷酸化水平,并下调其活性氧水平及凋亡水平。二甲双胍处理可明显上调(GR)_(50)-SK细胞中的磷酸化AKT水平,但对AKT水平无影响;可重塑该细胞中的部分线粒体形态结构、降低活性氧水平、增加ATP的生成(P=0.000),并下调细胞的凋亡水平(P=0.000)。结论·(GR)_(50)可通过下调AKT磷酸化引起线粒体形态及功能异常,并促进细胞凋亡;而二甲双胍则可抑制由(GR)_(50)蛋白诱导的上述病理事件的发生。

N-(4-二苯胺苯甲基)-甘氨酰丝氨酸甲酯的合成

主要以甘氨酸和4-二苯氨基苯甲醛为原料,通过还原氨化反应得到4-二苯胺-苯甲氨基乙酸,用叔丁氧羰基保护二级氨后,与丝氨酸甲酯脱水缩合生成N-(4-二苯胺苯甲基)-N-叔丁氧羰基-甘氨酰丝氨酸甲酯,脱去保护基后得到标题化合物。用~1HNMR、^(13)CNMR、IR、MASS、HRMS和HPLC对目标化合物的结构进行了表征。

大鼠二次脑损伤后兴奋性谷氨酸与环核甘酸改变意义

目的研究弥漫性脑损伤（ DBI）及其合并二次脑损伤（ SBI）后谷氨酸（ Glu）、环核苷酸系统（ cAMP和 cGMP）改变及意义。方法在 Marmarou模型基础上制成 SBI模型，测定脑 Glu、 cAMP、 cGMP水平变化。结果 DBI后 10 min Glu含量明显增加（ P< 0.01），随后下降于 24～ 72h达最低点，在 72h持续低水平或有回升趋势； DBI后 24 h cAMP浓度及 cAMP/cGMP比值明显下降（ P< 0.01）， cGMP水平明显升高（ P< 0.01）； SBI后变化趋势加剧。结论 Glu、 cAMP、 cGMP等水平变化是 DBI病理生理过程的重要因素；缺血性二次致伤因素可通过谷氨酸兴奋毒性及环核苷酸系统加重脑组织损伤程度。

二甲基乙二酰基甘氨酸对小鼠骨髓间充质干细胞缺血清凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的观察脯氨酸羟化酶抑制剂二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalglycine,DMOG)对无血清培养引起的小鼠骨髓间充质干细胞的凋亡影响及其对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax表达的影响。方法分离小鼠股骨及胫骨骨髓腔中的单个核细胞,传代后应用流式细胞仪进行细胞表型检测和三系分化以鉴定骨髓间充质干细胞。流式细胞仪TUNEL法观察DMOG作用于细胞后对细胞无血清培养凋亡的对抗作用,Westerm blot检测DMOG对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。结果实验所获的单个核细胞通过流式细胞仪细胞表型鉴定和三系分化鉴定证实为骨髓间充质干细胞。与无血清造模组相比,二甲基乙二酰基甘氨酸能明显降低骨髓间充质干细胞因缺血清导致的凋亡率(P<0.05),并上调凋亡抑制蛋白Bcl-2蛋白表达(P<0.05),抑制凋亡促进蛋白Bax蛋白表达(P<0.05)。结论脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG能抑制骨髓间充质干细胞因缺血清培养引起的凋亡。对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax表达的调控可能是DMOG对抗骨髓间充质干细胞凋亡的重要机制。

N,N-二甲基甘氨酸乙酯分解反应机理的理论研究

利用量子化学计算方法MP2/6 3 1+G 研究了N,N 二甲基甘氨酸乙酯在气相中热分解反应机理,并计算了反应的协同性,得出此反应是一个多步反应过程.主要有两个阶段:第一个阶段是N,N 二甲基甘氨酸乙酯热分解产生N,N 二甲基甘氨酸中间体和乙烯,第二个阶段是N,N 二甲基甘氨酸进一步分解生成三甲氨和二氧化碳.第一个反应阶段为速率控制步骤.研究表明,该反应机理是一个非协同的质子转移过程.

铕-N,N-二(N-亚甲基琥珀酰亚胺)甘氨酸-1,10-二氮杂菲三元配合物的光致变色

合成了Ｎ，Ｎ－二（Ｎ－亚甲基琥珀酰亚胺）甘氨酸，并以元素分析、ＩＲ、１ＨＮＭＲ和质谱进行表征．实验中发现铕（Ⅲ）与Ｎ，Ｎ－二（Ｎ－亚甲基琥珀酰亚胺）甘氨酸和１，１０－二氮杂菲形成的配合物具有光致变色的性质．在铕变色物种里，铕离子与Ｎ，Ｎ－二（Ｎ－亚甲基琥珀酰亚胺）甘氨酸中的羧基，１，１０－二氮杂菲中的氮原子相结合。

二茂钛二甘氨酸盐酸盐与DNA作用机理的研究

The interaction between titanocene glycine complex and DNA has been investigat-ed by UV-Vis spectra and fluorescence probe method. The results suggest that the complex forms an irreversible adduct with DNA in molar ratio 1:1, and induces the comformation changes of DNA at high ratio of the complex to DNA,leading to the disruption of DNA du-plexical structure.

二茂钛二甘氨酸盐酸盐的体外抗肿瘤活性及其与DNA的作用研究

研究了二茂钛二甘氨酸盐酸盐的体外抗肿瘤活性， 发现该化合物对艾氏腹水癌肿瘤细胞具有很高的活性． 又通过琼脂糖凝胶电泳技术研究了该化合物与ＰＢＲ３２２ ＤＮＡ 的作用， 发现它与ＰＢＲ３２２ ＤＮＡ之间不存在任何插入键合作用， 而且也不会引起ＤＮＡ 链的缺刻．

二甲基乙二酰基甘氨酸促进骨髓间充质干细胞成骨分化

目的观察二甲基乙二酰基甘氨酸对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的调控作用。化学性低氧模拟物(如二甲基乙二酰基甘氨酸)能够稳定低氧诱导因子,从而在骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化中发挥调控作用。方法于小鼠股骨及胫骨骨髓腔中分离获得小鼠骨髓单个核细胞,并以流式细胞仪鉴定及传代培养。使用二甲基乙二酰基甘氨酸对细胞进行干预,以便在常氧培养条件下模拟低氧环境。经过不同浓度二甲基乙二酰基甘氨酸干预后,使用MTT法检测细胞的增殖能力,使用碱性磷酸酶定量测定、碱性磷酸酶染色、茜素红钙结节染色评价骨髓间充质干细胞的成骨能力。结果流式细胞仪鉴定证实从小鼠骨髓腔中所获细胞为小鼠骨髓间充质干细胞。二甲基乙二酰基甘氨酸能够以剂量依赖的方式抑制骨髓间充质干细胞增殖(P<0.05),但0.5 mM浓度的二甲基乙二酰基甘氨酸能够上调碱性磷酸酶的表达和钙结节的沉积(P<0.05)。结论表明二甲基乙二酰基甘氨酸能抑制间充质干细胞的增殖,促进间充质干细胞的成骨分化。

利用二硝基苯甲酰苯基甘氨酸型手性固定相直接拆分丙卡特罗药物对映体

用手性源(R) 苯基甘氨酸,采用非对称合成方法制备了3,5 二硝基苯甲酰 (R) 苯基甘氨酸手性固定相(DNB PGCPS),利用它直接拆分了丙卡特罗药物的部分对映体,取得了良好的拆分效果。以不同比例的异丙醇 正己烷(体积比分别为20∶80,10∶90,5∶95,2∶98)为流动相,对丙卡特罗进行了拆分,其分离因子α的范围为1 54～1 67。此外,还测试了不同流动相组成对分离效果的影响,考察了液固吸附色谱保留值方程lnk=a+cCb+blnCb中保留因子k和分离因子α与强极性洗脱剂组分b的浓度Cb的关系,对拆分机理进行了讨论。

甘氨酸二亚甲基膦酸合成工艺研究

以甘氨酸、甲醛、亚磷酸二乙酯为主要原料,合成甘氨酸二亚甲基膦酸（GDMP）。通过正交实验筛选出最佳合成工艺条件：n（甘氨酸）：n（甲醛）：n（亚磷酸二乙酯）=1：1.9：2.1,反应温度90-100℃,pH 3.5-4.0,反应时间3.0-3.5 h。所制得的甘氨酸二亚甲基膦酸熔点测定结果与文献值相符合,红外光谱分析结果表明目标产物具有甘氨酸二亚甲基膦酸的各官能团,产品纯度达到进行缓蚀阻垢性能研究的要求。

2,4-二羟基苯甲醛缩甘氨酸的合成及荧光法测定粮食中痕量锌

合成了新席夫碱试剂2,4 二羟基苯甲醛缩甘氨酸(DHBZGC),并测定了其结构,基于Zn(Ⅱ)与DHBZGC OP形成配合物,导致体系荧光增敏的特性,提出了一种测定痕量锌的荧光方法。在pH6.5～8.0,NaH2PO4 Na2HPO4缓冲溶液和OP存在时,Zn(Ⅱ)与DHBZGC形成1∶1的配合物。在λex为330nm,λem为445nm处产生的荧光增敏最大,Zn(Ⅱ)在0～100μg·L-1范围内符合线性关系,检出限为0.4μg·L-1。方法应用于粮食中痕量锌的测定,结果满意。

4-(2-噻唑偶氮)-苯二甘氨酸的合成及其与钯显色反应的研究

报道了水溶性 4 ( 2 噻唑偶氮 ) 苯二甘氨酸 (TAPC)新试剂的合成。该试剂对钯具有较高灵敏度和选择性。在 0 .5mol/LHNO3介质中 ,TAPC与Pd(Ⅱ )形成 2∶1蓝色配合物 ,最大吸收波长 632nm。钯浓度在 0 μg/mL～ 1 .6μg/mL范围内符合比耳定律 ,表观摩尔吸光系数ε632 =5× 1 0 4 L·mol- 1 ·cm- 1 。可允许许多离子共存 。

水泥缓凝剂甘氨酸二(亚甲基膦酸)的合成与应用研究

以甘氨酸(Gly)、亚磷酸和甲醛为原料,通过Mannich反应合成水泥缓凝剂甘氨酸二(亚甲基膦酸)。重点考察了单体摩尔比对缓凝剂性能的影响。结果表明,当n(Gly)∶n(H3PO3)∶n(HCHO)=1.00∶2.05∶2.10,甲醛滴加时间为1 h,105℃下反应2 h时,合成缓凝剂的缓凝效果最佳。并从水泥水化的角度研究了缓凝剂的缓凝效果,能够有效降低水泥的水化放热速率和放热量,延缓水化放热峰值的出现。与减水剂的复配研究表明,其适应性好,且有一定的辅助保坍功能。

甘氨酸在尿素、甲脲及二甲脲水溶液中的体积性质

用精密数字密度计测定了甘氨酸在不同质量分数的尿素、甲脲和二甲脲水溶液中的密度,计算了甘氨酸的极限偏摩尔体积、迁移偏摩尔体积、理论水化数和体积作用系数,讨论了溶剂组成变化对甘氨酸迁移偏摩尔体积和理论水化数的影响.结果表明,甘氨酸与尿素及烷脲分子间的相互作用主要以1:1的形式为主.尿素、甲脲、二甲脲分子与氨基酸荷电中心的直接相互作用,削弱了两性离子带电中心对周围水分子的电致收缩效应,造成了理论水化数随溶液浓度的增加而减小.

N,N-二辛基甘氨酸萃取钯机理的研究

报道了 N ,N -二辛基甘氨酸从盐酸体系中萃取钯的机理 ,结果表明 :钯的萃取率随酸度、氯离子浓度、钯离子浓度的增大而降低。采用斜率法测得萃合物组成为 :R2 NCH2 COOH· HHPd Cl4,其萃取反应式为 :R2 NCH2 COOH· HCl( O) +HPd Cl- 4 ( A) =R2 NCH2 COOH· HHPd Cl4( O) +Cl- ( A)

N,N-二苄基甘氨酸对稀土元素萃取分离性能的研究

以Ｎ，Ｎ－ 二苄基甘氨酸的乙醇 苯溶液和氯仿溶液为固定相，以不同浓度的盐酸和高氯酸为展开剂，用反相纸层析法研究了Ｎ，Ｎ－ 二苄基甘氨酸对１１ 种稀土离子的萃取行为．结果表明：氯仿溶剂固定相对Ｌａ３ ＋ 、Ｎｄ３ ＋ 、Ｅｕ３ ＋ 的萃取能力比在乙醇 苯混合溶剂中大；在高氯酸展开剂中较盐酸展开剂中的萃取能力有所减弱．