水稻地上部单位器官物质分配过程的定量模拟

【目的】定量描述水稻植株地上部单位器官(叶片、叶鞘、节间、稻穗)干物质的动态分配过程,为作物形态建成模拟和可视化表达奠定基础。【方法】通过不同水稻品种和水氮试验中主茎和分蘖单位叶片、茎鞘及穗的干物质与水分及氮素含量的连续观测和定量分析,构建水稻地上部各单位器官干物质分配指数动态模型。【结果】模型采用线性和指数方程描述了叶片、茎鞘及穗单位器官分配指数随GDD的动态变化过程;分别用指数方程及一元二次方程描述了叶片、茎鞘及穗最大单位分配指数随不同叶位、鞘位以及穗位的动态变化过程;另外,以叶片、茎鞘及穗的氮素和水分因子法分别描述了水氮限制对各单位器官干物质分配过程的定量影响。利用独立的水稻田间试验资料对所建模型进行了初步的测试和检验,主茎与分蘖各单位器官干物重的观测值与模拟值的根均方差分别为0.93、0.81及6.8kg·ha-1。【结论】本模型可较好地模拟不同生长条件下水稻不同茎蘖各单位器官干物质动态的变化过程。

大鼠小肠上皮类器官单位的分离培养鉴定

目的采用机械分离和酶消化相结合的方法分离小肠上皮类器官单位(IOUs),并进行形态及功能鉴定,建立稳定的分离培养技术。方法采用机械法剪碎小肠组织,中性蛋白酶和胶原酶联合消化分离组织碎片,差速沉淀法获得IOUs,通过相差显微镜观察IOUs形态,组织学、免疫组化证实其增殖特性及上皮刷状缘完整性,原代二维培养观察IOUs体外增殖及细胞群体组成。结果分离的IOUs大部分形态完整,PAS染色显示连续的刷状缘,并可见杯状细胞, PCNA染色阳性并呈梯度改变,IOUs体外培养可见构成小肠的各胚层细胞。结论采用机械分离和酶消化相结合的方法可以得到形态完整、增殖活跃的IOUs,有望为组织工程小肠构建提供种子细胞。

改良法分离大鼠IOUs构建小肠的初步研究

目的采用改良方法分离大鼠小肠上皮类器官单位(IOUs),鉴定IOUs裸鼠体内发育能力。方法取出生5～8d大鼠的小肠组织,采用改良分离法获得IOUs,与细胞外基质胶混合后植入裸鼠皮下,定期取材,组织学鉴定。结果采用改良方法分离时间明显缩短,体内植入所有实验组均有多个囊泡样组织形成,植入2周后部分囊腔凹陷可见隐窝样结构,2周后部分囊泡内壁可见分化较成熟的上皮细胞突出,类似绒毛结构;上皮下可见少量平滑肌样细胞围绕囊状管腔周围。结论初步证实改良方法分离出IOUs用于组织工程肠管构建的可行性,并为出生后组织修复重构的研究奠定了基础。

组织工程小肠肌层发育形态学初探

目的采用改良方法构建组织工程小肠,初步从形态学上研究小肠肌层发育,探讨完善构建的条件。方法实验分4组:A组,空白管样多聚体支架植入近交系wistar大鼠体内,共4例,植入后第3、4周取材;B组,非改良方法分离小肠上皮类器官单位(Intestinal epithelium organoid units,IOUs)与多聚体支架复合植入大鼠体内,共4例,植入后第3、4周取材;C组,改良方法分离IOUs与多聚体支架复合植入大鼠体内,共8例,植入后第3、4、7、11周取材;D组,改良方法分离IOUs与细胞外基质胶(ECM胶)复合物注入裸鼠背部(每只注射4例,3例为复合物,1例为空白ECM胶注入),共16例,植入后第1、2、3、7周取材。取材后均行组织学、免疫组化染色进行组织形态学分析。结果改良方法分离IOUs构建的囊样小肠肠壁仅能见到类粘膜肌层发育,未见到典型的固有肌层发育。非改良方法可以见到团块样聚集的类固有肌层发育。空白支架植入未见小肠细胞发育。结论利用组织工程小肠模型研究大鼠肠道重构发育是一个较好的方法,粘膜肌层的重构可以不依赖环肌层和纵肌层肌细胞的存在。